豆科植物內(nèi)生固氮菌的分離與篩選(編輯修改稿)
2025-06-25 16:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 PCR和 16SrRNA 基因全序列分析【 J】。華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2020， 26（ 4）： 7376 【 3】李倍金。禾草內(nèi)生固氮菌的促生效能研究【 D】。烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文， 2020 三 、研究方案 （以下各項均可加頁） （ 包括研究目標(biāo)、研究內(nèi)容以及擬解決的關(guān)鍵問題，擬采取的研究方法、技術(shù)路線、實驗方案及可行性分析，本課題的特色與創(chuàng)新之處） 1. 研究目標(biāo)： 以 阿須 貝無氮培養(yǎng)基為選擇 分離條件對豆科植物內(nèi)生細菌進行初步篩選，并通過 nif 基因引物擴增確定其為具有固氮酶活性的菌株。 2. 研究內(nèi)容： （ 1） 豆科內(nèi)生固氮菌的分離培養(yǎng) （ 2） 通過 nif 基因引物擴增對菌種固氮酶活性進行測定 ： （ 1） 目的菌株所在植物的選擇。 （ 2） 目的菌株的 分離 純化。 （ 3） 固氮酶活性的測定。 4. 擬采取的研究方法 及技術(shù)路線： 實驗過程中嚴(yán)格按照篩選固氮菌 的實驗步驟，純化不可少，酶活力測定中產(chǎn)酶培養(yǎng)基微量元素的制備要準(zhǔn)確，消耗性藥品由微生物實驗室提供。 5. 實驗方案： （ 1）：采 豆科植物 進行菌的培養(yǎng)。 （ 2）： 選擇 培養(yǎng)， 劃線 培養(yǎng)。 （ 3）：通過 nif 基因引物擴增 測酶活力 。 (4):酶活性的鑒定。 （ 1） 材料 幾種阿拉爾地區(qū)豆科植物。 （ 2） 培養(yǎng)基及緩沖液 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 (NA， g／ L)：牛肉膏 5，蛋白胨 1O，蔗糖 10，酵母浸膏 1， pH值 7． 2。 多碳源低氮培養(yǎng)基 (CCM)： 目的 植株 的選擇 利用無氮培養(yǎng)基對 菌 種進行 篩選 培養(yǎng) 測酶活力 酶活的鑒定 溶液 I： KH2PO4 0． 2g， NaC1 0． 1g， K2HPO4 0． 8g， Na2FeEDTA 28mg，鉬酸鈉25mg，酵母浸膏 100mg，甘露醇 5g，蔗糖 5g，乳酸鈉 O． 5mL，蒸餾水 900mL。 溶液Ⅱ： MgSO4 7H20 0． 2g， CaC1 2H2O 0． 06g，蒸餾水 100mL。 ． 溶液 I、Ⅱ分別滅菌，冷卻至 50℃左右混合后再
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