香菇原生質(zhì)體外文翻譯--擁有再生能力和交配型穩(wěn)定性的香菇原生質(zhì)體的高收益制備(編輯修改稿)
2025-06-25 14:15 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 il303waSe，其擔(dān)孢子只可獲得一個(gè)交配型的菌落。本研究選用 Mofi 440擔(dān)孢子的初步確定為 A1B1()， A1B2()， A2B1()和 A2B2(NO .47)四種交配型的單核菌株做進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。因在 A≠B=配對(duì)反應(yīng)中只有極少數(shù)鎖狀聯(lián)合出現(xiàn)，故而 A因子或 B因子相同的交配反應(yīng)有待將來使用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)一步精確測(cè)定其交配型。 原生質(zhì)體的釋放 材料的培養(yǎng)：快速生長、均勻一致的幼齡茵絲看來是制備原生質(zhì)體的最合適材料。因?yàn)橄愎骄z一般生長不快，固而我們?cè)诰z接種方法和培養(yǎng)基方面進(jìn)行了卓有成效的改進(jìn)，即液體培養(yǎng)菌絲、剃刀切碎進(jìn)而經(jīng)過尼龍網(wǎng)過濾菌絲的接種方法。在平菇中，亞硫酸鹽婁紙漿廢液組分證明能夠刺激菌絲生長進(jìn)而改善了原生質(zhì)體的產(chǎn)量和再生率。為了促進(jìn)生長，本實(shí) 驗(yàn)對(duì)亞硫酸鹽類紙漿廢液組分作為香菇培養(yǎng)基的一類掭加劑進(jìn)行了檢驗(yàn)，期望獲得與在平菇中相似的促進(jìn)效果。結(jié)果表明：三種亞硫酸鹽婁紙漿廢液組分(LS、 LSD、 Sanpearl CP)和木質(zhì)索， 以 Sanpearl cP作為添加劑時(shí)改善香菇菌絲生長的效果最佳。然而如表 1所示，對(duì)于原生質(zhì)體釋放 。 Sanpearl cP單獨(dú)添加效果并不十分顯著，而木質(zhì)素的效果最好。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，菌絲由于一些不定物質(zhì)在表面上的附著而變黑 。 因而必須洗滌除去這些物質(zhì)， 在用其它亞硫酸鹽紙漿廢液組分作為添加劑時(shí)，也同樣可見少量褐色物質(zhì)在菌絲表面的附 著，而 Sanpea rlcP為最少。因此 % sanpearl cP和 % 木質(zhì)素混合添加到 MYG培養(yǎng)基中是比較理想的。 在改進(jìn)的菌絲切割接種方法和添加特殊物質(zhì)封培養(yǎng)基中的條件下， 穩(wěn)定而足夠量的香菇菌絲在培養(yǎng) 34天時(shí)就可以很容易地得到： 5075毫克／ 10毫升培養(yǎng)基／ 100毫升三角瓶。對(duì)于原生質(zhì)體產(chǎn)生最佳時(shí)期為 3—4天菌齡（見表 l， 實(shí)驗(yàn) 2） . 酶： 對(duì)于多種酶的組臺(tái)在不同濃度和 pH值的情況下進(jìn)行了檢查。測(cè)試過的酶有：纖維素酶 OnOzuka RS和 R一 10， 纖維素酶 Y—c， MelcelaSe P— l，崩潰酶 (DrlselaSe)，Novozyme 23 Zymolyase100， 000，幾丁質(zhì)酶、 一葡萄糖昔醛酸酶、 一乙酰艙壁酶、半纖維素酶、蝸牛酶、果膠酶 Y一 20和崩解酶 MaeerozymeR 10。在用上述酶做的組合華中農(nóng)業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文外文翻譯 4 中，以 % 幾丁質(zhì)酶 (Sigma， 4U／ m1)和 2—3 %纖維素酶 Onozuka RS的組合效果最好。 酶反應(yīng)混合液中的滲透 壓穩(wěn)定劑：在幾種測(cè)試的滲透壓穩(wěn)定劑中，對(duì)于香菇原生質(zhì)體的釋放，甘露醇和硫酸鎂是優(yōu)秀的，并且 。 酶液 pH值：在 ， 纖維素酶 Onoz~a RS和幾丁質(zhì)酶的最適酶解反應(yīng) pH值在 。遠(yuǎn)低于其它擔(dān)子菌原生質(zhì)體制備時(shí)常常使用的 pH值： —。 酶解反應(yīng)的其它條件與前文報(bào)導(dǎo)基本一致。 原生質(zhì)體的再生 菌齡：有一個(gè)趨勢(shì)：菌齡越短，再生率越高。在 “材料和方法 ”中敘述的培養(yǎng)條件下
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