【文章內(nèi)容簡介】 nm處有最大吸收，而藥物本身在此波長處幾乎沒有吸收。規(guī)定：，%。含量測定：非水溶液滴定法。冰醋酸為溶劑，加入醋酸汞試液消除氫鹵酸的干擾，結(jié)晶紫為指示液。溴量法：鹽酸去氧腎上腺素及其注射液采用此方法測定含量。利用藥物中的苯酚結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中酚羥基鄰、對位活潑氫能與過量的溴定量地發(fā)生溴代反應(yīng)，再以碘量法測定剩余的溴，根據(jù)消耗的溴及硫代硫酸鈉兩種滴定液的量即可計算各供試品的含量。操作要點：⑴游離溴及碘極易揮散，操作過程中必須防止逸失。⑵不能加入太過量的溴，否則在溴代反應(yīng)中會引起酚羥基的氧化或溴化，一般加入的溴液以過量2%為宜。⑶為了校正操作中溴及碘的可能逸失，應(yīng)按平行條件進行空白試驗。氨基醚衍生物類藥物分析鹽酸苯海拉明的鑒別：與硫酸反應(yīng)顯色。初顯黃色，隨即變成橙紅色；滴加水，即成白色乳濁液。水解反應(yīng)。本品水溶液遇酸易水解，生成水溶性很小的二苯基甲醇，分散在水層，呈白色乳濁，加熱煮沸數(shù)分鐘，聚集呈油狀液體，放冷，凝成白色蠟狀。與硝酸銀反應(yīng)形成沉淀。紫外特吸收和紅外特征吸收光譜。鹽酸苯海拉明的含量測定：非水溶液滴定法。鹽酸苯海拉明原料藥為鹽酸鹽，在冰醋酸中加醋酸汞后，可定量地與高氯酸生成苯海拉明該氯酸鹽。酸性染料比色法。主要用于鹽酸苯海拉明片劑的含量測定及片劑溶出度的測定。陰離子表面活性劑滴定法。用于鹽酸苯海拉明注射液的含量測定。此方法還可測定生物堿、含氮雜環(huán)、季銨鹽類。溶劑：水、氯仿、稀硫酸，指示液：二甲基黃溶劑藍19混合指示液，滴定液：磺基丁二酸鈉二辛酯試液。注意：鹽酸苯海拉明含量測定：原料：非水溶液滴定法。片劑含量及溶出度：酸性染料比色法。注射液：陰離子表面活性劑滴定法。復(fù)習(xí)總結(jié)：維生素a醋酸酯等吸收法：在λ1的左右各選一點為λ2和λ3,使aλ2=aλ3=6/7aλ1。維生素a醇。③雜質(zhì)吸收：對維生素a的測定有影響的雜質(zhì)主要有：維生素a2和維生素a3；維生素a的氧化產(chǎn)物（環(huán)氧化物、維生素a醛和維生素a酸）；維生素a在光照下產(chǎn)生的無生物活性的聚合物鯨醇；維生素a的異構(gòu)體；合成時產(chǎn)生的中間體。④測定方法：第一法（使用于維生素a醋酸酯）取維生素a醋酸酯，精密稱定，加環(huán)己烷制成每1ml中含9～15單位的溶液。然后在300、31323360nm五個波長處分別測定吸收值，確定最大吸收波長（應(yīng)為328nm）。計算各波長下的吸收度與328nm波長下的吸收度的比值。計算：，吸收系數(shù)＝a/cl。（u/g），u/g＝吸收系數(shù)1900 1900為維生素a醋酸酯在環(huán)己烷溶液中測定的換算因數(shù)。標示量%＝（ad1900w）/（w100l標示量）1u= 1u= 第二法（適用于維生素a醇）說明：⑴維生素a醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程法（即代數(shù)法）推導(dǎo)出來的；維生素a醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（幾何法或成6/7定位法）推倒出來。⑵在應(yīng)用三點校正法時，除其中一點在最大吸收波長處測定外，其余兩點均在最大吸收峰的兩側(cè)上升或下降陡部的波長處進行測定。維生素e 維生素e（消旋α生育酚醋酸酯）有天然片和合成品之分，天然品為右旋體（dα）；合成品為消旋體（dlα）。結(jié)構(gòu)：維生素e為苯丙二氫吡喃醇衍生物，苯環(huán)上又一個乙?；姆恿u基，故又稱生育酚。他主要有α、β、γ、δ四種異構(gòu)體，其中以α異構(gòu)體的生理作用最強。性質(zhì)：溶解性：微黃色或黃色透明的粘稠液體，易溶于乙醇、丙酮、乙醚、石油醚，不溶于水。具有紫外吸收。在無氧或其它氧化劑存在時，在酸性或堿性溶液中，加熱可水解生成游離生育酚；在有氧或其它氧化劑存在時，則進一步氧化生成醌型化合物。在堿性條件下加熱，這種氧化作用更易發(fā)生。鑒別試驗：⑴硝酸反應(yīng)：取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱約15min，溶液應(yīng)顯橙紅色。⑵水解后氧化反應(yīng)：取本品約10mg，加醇制氫氧化鉀試液2ml，煮沸5min，放冷，加水4ml與乙醚10ml，振搖、靜置使分層，取乙醚液2ml，加2,2’聯(lián)吡啶的乙醇溶液（→100）數(shù)滴和三氯化鐵的乙醇溶液（→100）數(shù)滴，應(yīng)顯血紅色。⑶紫外光譜法。⑷薄層色譜法。特殊雜質(zhì)：游離維生素e。利用游離維生素e的還原性，用硫酸鈰滴定液（）滴定，以二苯胺為指示劑，%。含量測定：⑴氣相色譜法：載氣：氮氣；固定相：硅酮（ov17），涂布于經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子小球上；檢測器：氫火焰離子化檢測器；理論板數(shù)：按維生素e峰計算應(yīng)不低于500；維生素e與內(nèi)標物質(zhì)的分離度應(yīng)大于2。內(nèi)標：正三十二烷。⑵高效液相色譜法：c18柱；流動相為甲醇：水（49：1）；紫外檢測器；波長292nm。維生素b1 結(jié)構(gòu)：維生素b1（鹽酸硫胺）是由氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過央甲基連接而成的季銨化合物，噻唑環(huán)上季銨及嘧啶環(huán)上氨基，為兩個堿性基團，可與酸成鹽。性質(zhì)：溶解性：本品在水中易溶，水溶液顯酸性反應(yīng)。在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。具有紫外吸收。在堿性中遇氧化劑，如鐵氰化鉀，可被氧化為具有熒光的硫色素，后者溶液正丁醇中呈藍色熒光。分子中含有兩個雜環(huán)，故可與某些生物堿沉淀試劑反應(yīng)生成組成恒定的沉淀。鑒別試驗 ⑴硫色素反應(yīng)方法：取本品約5mg，，強力振搖2min，放置使分層，上面的醇層顯強烈的藍色熒光。加酸使成酸性，熒光即消失。再加堿使成堿性，熒光又顯出。原理：維生素b1在堿性溶液中，可被鐵氰化鉀氧化生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或異丁醇等）中，顯藍色熒光。⑵沉淀反應(yīng)維生素b1與碘化汞生成淡黃色沉淀 維生素b1與碘生成紅色沉淀 維生素b1與硅鎢酸生成白色沉淀 含量測定方法有：硅鎢酸重量法、硫色素?zé)晒夥?、非水溶液滴定法和紫外分光光度法。中國藥典收載紫外分光光度法 維生素c 結(jié)構(gòu)：維生素c分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇結(jié)構(gòu)和內(nèi)酯環(huán)，且有二個手性碳原子（cc5），因此不僅使維生素c性質(zhì)極為活潑，且具旋光性。性質(zhì)：溶解性：維生素c在水中易溶，水溶液呈酸性，在乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。結(jié)構(gòu)遇糖類相似，也具糖的性質(zhì)。分子中二烯醇基具極強的還原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗維生素c,。c3oh由于受共軛效應(yīng)的影響，酸性較強；c2oh的酸性極弱，故維生素c一般表現(xiàn)為一元酸，能與碳酸氫鈉作用生成鈉鹽。分子中有兩個手性碳原子，故有四個光學(xué)異構(gòu)體，其中l(wèi)（+）維生素c活性最強。維生素c和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解，因雙鍵使內(nèi)酯環(huán)變得較穩(wěn)定；但在強堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解，生成酮酸鹽。維生素c有共軛雙鍵，在稀礦酸溶液中，在245nm波長處有最大吸收；若在中性或堿性條件下，則紅移至265nm處。鑒別試驗： ⑴與硝酸反應(yīng)方法：，加水10ml溶解。取該溶液5ml，即生成銀的黑色沉淀。原理：維生素c分子中有二烯醇基，具強還原性，可被硝酸銀氧化為去氫維生素c,同時可產(chǎn)生黑色銀沉淀。⑵與2,6二氯靛酚反應(yīng)方法：，加水10ml溶解。取該溶液5ml，加2,6二氯靛酚試液1～2滴，試液的顏色即消失。原理：，其氧化型在酸性介質(zhì)中為玫瑰紅色，堿性介質(zhì)中微藍色。與抗壞血酸作用后生成還原型的物色的酚亞胺。⑶與其它氧化劑反應(yīng) 維生素c還可被亞甲藍、高錳酸鉀、堿性酒石酸銅試液、磷鉬酸等氧化劑氧化為去氫維生素c,同時，維生素c可使這些試劑褪色，產(chǎn)生沉淀或顯色。⑷利用維生素c具糖類性質(zhì)的反應(yīng)維生素c可在三氯醋酸或鹽酸存在下水解、脫羧，生成戊糖，再失水，轉(zhuǎn)變?yōu)榭啡?，加入吡咯，加熱?0℃產(chǎn)生藍色。⑸紫外分光光度法，在243nm波長處有唯一的最大吸收，利用此特征進行鑒別。含量測定：碘量法：溶劑：水和稀醋酸，指示劑：淀粉。操作中加入稀醋酸10ml使滴定在酸性溶液中進行。在酸性介質(zhì)中維生素c受空氣中氧的氧化作用減慢，但樣品溶于稀酸后仍需立即進行滴定。加新沸過的冷水液是為了減少水中溶解氧對測定的影響。如片劑，溶解后應(yīng)濾過，取續(xù)濾液測定；注射液測定時要加2ml丙酮，以消除注射液內(nèi)含有的抗氧劑亞硫酸氫鈉對測定的影響?？股仡愃幬铴聝?nèi)酰胺類抗生素本類抗生素包括青霉素族和頭孢菌素族，他們的分子結(jié)構(gòu)中均含有β內(nèi)酰胺環(huán)。基本結(jié)構(gòu)：分子中都有一個游離羧基和酰胺側(cè)鏈。青霉素：β內(nèi)酰胺環(huán)和氫化噻唑環(huán) 頭孢菌素：β內(nèi)酰胺環(huán)和氫化噻嗪環(huán) 性質(zhì)： 溶解度：青霉素和頭孢菌素分子中的游離羧基具有相當(dāng)強的酸性，能與無機堿或某些有機堿形成鹽。其堿金屬鹽易溶于水，而有機堿鹽難溶于水，易溶于甲醇等有機溶劑。旋光性：青霉素族分子中含有三個手性碳原子，頭孢菌素族含有兩個手性碳原子，都具有旋光性。紫外吸收特性青霉素分子中的母核部分無紫外吸收，但出側(cè)鏈酰胺基上r如具苯環(huán)共軛系統(tǒng)，則有紫外吸收特性。頭孢菌素由于母核部分具有oc=nc=c結(jié)構(gòu)，故有紫外吸收。β內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性β內(nèi)酰胺環(huán)是青霉素族結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定的地方，如與酸、堿、青霉素酶、羥胺及某些金屬離子（銅、鉛、汞和銀）等作用時，易發(fā)生水解和分子重排，導(dǎo)致β內(nèi)酰胺環(huán)的破壞而失去活性。鑒別試驗：⑴鉀、鈉鹽的火焰反應(yīng) ⑵呈色反應(yīng)①羥肟酸鐵反應(yīng)：青霉素及頭孢菌素在堿性中與羥胺作用，β內(nèi)酰胺環(huán)破裂生成羥肟酸，在稀酸中與高鐵離子呈色。頭孢哌酮：紅棕色；氨芐西林：紫紅色；頭孢氨芐：紅褐～褐色；頭孢噻吩鈉：紅褐色；普魯卡因青霉素：紫紅色；頭孢唑啉鈉：紅棕色。②硫酸—硝酸呈色反應(yīng)：頭孢菌素能與硫酸—硝酸反應(yīng)后成色。頭孢噻吩鈉：紅棕色；頭孢氨芐：黃色；頭孢噻肟鈉：亮黃色。③茚三酮反應(yīng)：某些具有α氨基的本類藥物（如氨芐西林）遇茚三酮即顯藍紫色。④與斐林試劑反應(yīng)：本類藥物具有類似肽鍵結(jié)構(gòu)，可產(chǎn)生雙縮脲反應(yīng)。開環(huán)分解，使堿性酒石酸銅鹽還原顯紫色。阿莫西林、氨芐西林鈉可采用本法鑒別。⑤變色酸—硫酸呈色反應(yīng)：阿莫西林加變色酸硫酸實際混合后，于150℃加熱2～3min，因分解除甲醛與變色酸縮合而呈深褐色。⑥與重氮苯磺酸呈色反應(yīng)：頭孢菌素族7位側(cè)鏈含有酚羥基基團時，能與重氮苯磺酸試液產(chǎn)生偶合反應(yīng)，顯橙黃色。⑦與銅鹽呈色：頭孢氨芐加醋酸、硫酸銅、氫氧化鈉試液后，生成銅配位鹽，顯橄欖綠色。⑶沉淀反應(yīng)①在稀酸中生成白色沉淀：青霉素鉀和青霉素鈉加水溶解后，加稀鹽酸2滴，即析出難溶于水的游離基白色沉淀。此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或過量的鹽酸中成鹽。②有機胺鹽的特殊反應(yīng) 重氮化偶合反應(yīng)：普魯卡因青霉素水溶液酸化后，顯普魯卡因芳伯氨基的重氮化偶合反應(yīng)，生成偶氮染料紅色沉淀。與三硝基苯酚的反應(yīng)：芐星青霉素經(jīng)氫氧化鈉堿化后，用乙醚提取，蒸去乙醚后的殘渣含有二芐基乙二胺，加稀乙醇使殘渣溶解，加三硝基苯酚的飽和溶液，加熱后放冷，即析出二芐基乙二胺苦味酸結(jié)晶。⑷光譜法①紫外分光光度法 最大吸收波長鑒定法水解產(chǎn)物的最大吸收波長鑒定法 ②紅外吸收光譜 ③核磁共振光譜 ⑸色譜法 ①薄層色譜法 ②高效液相色譜法 含量測定⑴碘量法（芐星青霉素）青霉素或頭孢菌素分子不消耗碘，其降解產(chǎn)物消耗碘。反應(yīng)分兩步進行：第一步反應(yīng)是按化學(xué)計算量進行；第二步青霉噻唑烷酸在酸性條件下被碘氧化的反應(yīng)受溫度、ph、時間等諸多因素影響，故耗碘量沒有固定的量關(guān)系。因此試驗過程中要嚴格控制溫度，同時采用與青霉素標準品平行對照測定，則可抵消上述可變因素的影響。，溫度在24～26℃為最好。1摩爾青霉素能吸收8摩爾的碘,故本法的靈敏度較高。注意：在滴定終點時放慢滴定速度，并強力振搖；如果滴定至終點又返現(xiàn)藍色，說明真正的終點尚未到達。⑵汞量法（青霉素鈉、青霉素鉀）青霉素分子不與汞鹽反應(yīng)，而其堿性水解產(chǎn)物青霉噻唑酸及繼續(xù)水解生成的青霉胺都能與汞鹽定量反應(yīng)，根據(jù)消耗的汞鹽量可以計算青霉素的含量。電位滴定法：指示電極：鉑電極；參比電極：汞硫酸亞汞電極。滴定液：硝酸汞。每1ml的硝酸汞滴定液（）。總青霉素的百分含量與降解產(chǎn)物的百分含量之差值即為青霉素的含量。注意：青霉素含量計算以第二次滴定終點為依據(jù)；水解必須完全；空白試驗也要稱取供試品，但不經(jīng)氫氧化鈉水解；與碘量法比較，汞量法測定青霉素的主要優(yōu)點是不需要青霉素標準品作對照，汞鹽滴定液用edta標定即可。⑶酸堿滴定法（苯唑西林鈉）⑷紫外可見分光光度法 ⑸高效液相色譜法 氨基糖苷類抗生素 雜環(huán)藥物 吡啶類藥物異煙肼的鑒別試驗：還原反應(yīng)。異煙肼的酰肼基有還原性，可還原硝酸銀中的ag+成單質(zhì)銀，肼基則被氧化生成氮氣。加氨制硝酸銀試液1ml，即產(chǎn)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡?？s合反應(yīng)。異煙肼的酰肼基可以和含羰基的試劑（如芳醛）發(fā)生縮合反應(yīng)。異煙肼與香草醛反應(yīng)，生成異煙腙，測定熔點供鑒別。沉淀反應(yīng)。異煙肼分子中的吡啶環(huán)具有堿性，可以和重金屬鹽類（如氯化汞、硫酸銅、碘化鉍鉀）乙基苦味酸形成沉淀。異煙肼和氯化汞可生成白色沉淀。和硫酸銅枸櫞酸試液反應(yīng)，先產(chǎn)生綠色沉淀，加熱，沉淀變?yōu)榧t棕色。尼克剎米的鑒別：戊烯二醛反應(yīng)。屬吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng)。尼克剎米分子中的吡啶環(huán)與溴化氰反應(yīng)，開環(huán)形成戊烯二醛的衍生物，再與苯胺縮合，形成黃色的希夫氏堿。異煙肼也可發(fā)生戊烯二醛反應(yīng)，但需先用高錳酸鉀或溴水氧化為異煙酸，再與溴化氰作用。與苯胺縮合形成黃色至棕黃色產(chǎn)物，與聯(lián)苯胺紫外分光光度法形成淡紅至紅色產(chǎn)物。水解反應(yīng)。尼克剎米分子中的酰胺基在堿性條件下可水解，加氫氧化鈉試液，加熱，即有二乙胺臭味逸出，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變成藍色。沉淀反應(yīng)。尼克剎米分子中的吡啶環(huán)也可以和重金屬離子反應(yīng)。尼克剎米和硫酸銅及硫氰酸銨作用，生成草綠色配位化合物的沉淀。異煙肼中游離肼的檢查：薄層色譜法。，%。異煙肼的含量測定：異煙肼分子中的酰肼基具有還原性，可采用氧化還原滴定法測定其含量。溴酸鉀法。甲基橙作指示劑，溴酸鉀滴定止粉紅色消失。每1ml的溴酸鉀滴定液（）。異煙肼的片劑、注射劑均采用溴酸鉀法測定含量。還可使用溴量法、剩余碘量法測定含量，也可用非水溶液滴定法。尼克剎米含量測定：非水溶液滴定法。溶劑：冰醋酸，指示劑：結(jié)晶紫，滴定液：高氯酸。至溶液藍綠色。每1ml高氯酸滴定液（）。紫外分光光度法。測定尼克剎米注射劑含量。注射劑的溶劑對非水溶液滴定法有干擾，所以采用本法。%硫酸溶液溶解樣品，是為了使藥物呈離解狀態(tài)，易溶于水。甾體激素類藥物基本結(jié)構(gòu)：均具有環(huán)戊烷駢多氫菲母核。分類：：皮質(zhì)酮衍生物，如可的松、潑尼松