【正文】 lence, PBE）和個體生物等效性（ Individual Bioequivalence,IBE）的概念。故在評價時，若出現(xiàn)某些不等效特殊情況，需具體問題加以具體分析。正文前應(yīng)有簡短摘要；正文末，應(yīng)注明實驗單位、研究負(fù)責(zé)人、參加實驗人員，并簽名蓋章，以示對研究結(jié)果負(fù)責(zé)。 結(jié)果評價： 緩（控）釋受試制劑單次給藥的相對生物利用度估算同普通制劑。穩(wěn)態(tài)峰濃度（ Cssmax）、達(dá)峰時間（ Tmax）及谷濃度（ C ssmin）的實測值。 （三）復(fù)方制劑 對復(fù)方化學(xué)藥品制劑生物等效性研究，一般情況下某一成分的體內(nèi)行為不能說明其它成分的體內(nèi)行為，故原則上應(yīng)證實每一個有效成分的生物等效性。由于儀器性能的改善和自動進(jìn)樣器的使用，一天內(nèi)可以完成幾 個分析批，一個分析批也可以持續(xù)幾天完成，但連續(xù)測量不宜超過 3天。 高變異性藥物（ Highly variable drug）：當(dāng)某一藥物的個體內(nèi)變異系數(shù)（以 AUC或 Cmax計算的個體內(nèi)變異系數(shù)）大于或等于 30%時，稱之為高變異藥物。 三、與其他指導(dǎo)原則的關(guān)聯(lián)性和適用范圍 本指導(dǎo)原則適用于化學(xué)藥品新藥申請、已有國家標(biāo)準(zhǔn)藥品申請以及上市后變更補(bǔ)充申請中的 BA和 BE 研究。 實驗設(shè)計與操作主要從實驗中應(yīng)注意的幾個關(guān)鍵點進(jìn)行說明。（見參考文獻(xiàn) 2.） 生物樣本分析方法的建立和確證內(nèi)容主要參照 FDA 的關(guān)于方法確證指導(dǎo)原則并考慮了國內(nèi)可操作性撰寫而成。如不選擇原創(chuàng)藥，應(yīng)盡量提供參比制劑的質(zhì)量證明。該問題已經(jīng)引起 有關(guān)部門重視，并正在著手實施建立我國的參比制劑數(shù)據(jù)庫，待條件成熟后再對此要求進(jìn)行修訂。由于種種原因，目前國內(nèi)尚缺乏一明確參比制劑標(biāo)準(zhǔn)，故本指導(dǎo)原則中暫沒有做硬性要求，僅提出原則上要求盡量選擇原創(chuàng)藥。在目前國內(nèi)缺乏參比制劑標(biāo)準(zhǔn)的情況下，參比制劑的質(zhì)量如不能得到保證，將對結(jié)果合理評價造成很大困難。 五、有關(guān)數(shù)據(jù)和資料來源的說明 本指導(dǎo)原則是在國家藥品監(jiān)督管理局（ SDA） 2020年頒布的《化學(xué)藥品人 體生物利用度和生物等效性研究指導(dǎo)原則》基礎(chǔ)上，主要參考美國 FDA、歐盟EMEA、日本 MHLW最新公布的有關(guān)生物利用度和生物等效性研究指導(dǎo)原則以及近期發(fā)表的有關(guān)文獻(xiàn)而起草的。 因為生物樣本分析方法是生物利用度和生物等效性研究的關(guān)鍵 ，有必要而且也可以從技術(shù)上提高對方法的考核以及方法的質(zhì)控要求，所以對有關(guān)方法學(xué)考核方面作出了較為具體的要求。 二、指導(dǎo)思想和一般原則 本指導(dǎo)原則闡述了當(dāng)前對生物利用度和生物等效性研究的認(rèn)識和一般性原則。 快速溶出（ Rapidly dissolving） :利用規(guī)定的第一法裝置 100rpm(或二法裝置50rpm)，使用 900 ml或少于 900 ml的下列每種介質(zhì)測定溶出度： 1） ； 2） PH ； 3） PH 。一般配制高、中、低三個濃度的質(zhì)控樣品。 （二）特殊活性成分制劑， 如活性成分為蛋白質(zhì)多肽、激素、維生素、電解質(zhì)等，因為存在內(nèi)源性物質(zhì)干擾問題以及體內(nèi)降解問題，所以生物樣本分析方法的確定是其重點。如用劑量調(diào)整公式計算 AUC（如以 1次給藥 AUC的 2倍計），將會使測得的 AUC 值不能準(zhǔn)確反映實際 AUC 值。 參比制劑：若國內(nèi)已有相同產(chǎn)品上市，應(yīng)選用該緩（控）釋制劑相同 的國內(nèi)上市的原創(chuàng)藥或主導(dǎo)產(chǎn)品作為參比制劑；若系創(chuàng)新的緩（控）釋制劑，則以該藥物已上市同類普通制劑的原創(chuàng)藥或主導(dǎo)產(chǎn)品作為參比制劑。 結(jié)果的評價應(yīng)結(jié)合研究目的出發(fā)，進(jìn)行生物等效性評價的目的提供兩制劑可替換使用的依據(jù)；進(jìn)行生物利用度研究，則主要分析獲得的相對生物利用度數(shù)值進(jìn)一步確定新劑型的臨床使用劑量。故對受試制劑與參比制劑的生物等效性評價，應(yīng)從藥物吸收程度和吸收速度兩方面進(jìn)行，評價反映這兩方面的 3個藥代動力學(xué)參數(shù) 即 AUC0→t 、 Cmax 和 Tmax是否符合前述等效標(biāo)準(zhǔn)。 4. 群體生物等效性和個體生物等效性 目前均采用平均生物等效性（ Average Bioequivalence ,ABE）評價方法，藥物生物等效性的統(tǒng)計推斷是以受 試制劑和參比制劑生物利用度參數(shù)平均值為考察指標(biāo)的 ,從他們的樣本均數(shù)推斷總體均數(shù)是否等效。在生物等效性實驗中，方差分析可提示誤差來源，為雙單側(cè) t檢驗計算提供了誤差值（ MSE）。 AUC0→t 以梯形法計算； AUC0→∞ 按公式計算： AUC0→∞ ＝ AUC0→t ＋ Ct/λz（ t 為最后一次可實測血藥濃度的采樣時間； Ct為末次可測定樣本藥物濃度； λz系對數(shù)濃度 時間曲線末端直線部份求得的末端消除速率常數(shù)，可用對數(shù)濃度 時間曲線末端直線部分的斜率求得； t1/2 用公式t1/2＝ ／ λz計算。試驗工作應(yīng)在 I期臨床試驗觀察室進(jìn)行。但該方法不能反映藥物吸收速度，誤差因素較多，一般不提倡采用。一般在吸收相部分取 23個點，峰濃度附近至少需要 3個點，消除相取 35個點。受試制劑和參比制劑一般應(yīng)服用相等劑量，需要使用不相等劑量時，應(yīng)說明理由并提供所用劑量范圍內(nèi)的線性藥代動力學(xué)特征依據(jù)，結(jié)果可以劑量校正方式計算生物利用度。若為完成特定研究目的，可選用相同藥物的其它藥劑學(xué)性質(zhì)相近的上市劑型作為參比制劑，這類參比制劑亦應(yīng)該是已上市的且質(zhì)量合格的產(chǎn)品。 如已知藥物存在遺傳多態(tài)性導(dǎo)致代謝差異，應(yīng)考慮受試者由于慢代謝可能出現(xiàn)的安全性等問題。按體質(zhì)指數(shù) (Body Mass Index , BMI)＝體重（ kg）／身高 2（ m2）計算，一般應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)體重范圍內(nèi)。 2. 受試者的選擇 受試者入選條件： 受試者的選擇應(yīng)當(dāng)盡量使個體間差異減到最小，以便能檢測出制劑間的差 異。 根據(jù)試驗制劑數(shù)量不同一般采用 22交叉、 33交叉等設(shè)計。 提供 20%受試者樣品測試的色譜圖復(fù)印件，包括相應(yīng)分析批的標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣品的色譜圖復(fù)印件。 濃度高于定量上限的樣品，應(yīng)采用相應(yīng)的空白介質(zhì)稀釋后重新測定。推薦由獨立的人員配制不同濃度的質(zhì)控樣品對分析方法進(jìn)行考核。 提取回收率 從生物樣本基質(zhì)中回收得到分析物質(zhì)的響應(yīng)值除以純標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的響應(yīng)值即為分析物的提取回收率。 準(zhǔn)確度是指在確定的分析條件下，測得的生物樣品濃度與真實濃度的接近程度 (即質(zhì)控樣品的實測濃度與真實濃度的偏差 )，重復(fù)測定已知濃度分析物樣品可獲得準(zhǔn)確度。 當(dāng)線性范圍較寬的時候，推薦采用加權(quán)的方法對標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計算，以使低濃度點計算得比較準(zhǔn)確。必須至少用 6個濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲 線，對于非線性相關(guān)可能需要更多濃度點。必須提供證明所測定物質(zhì)是受試藥品的原形藥物或特定活性代謝物，生物樣品所含內(nèi)源性物質(zhì)和相應(yīng)代謝物、降解產(chǎn)物不得干擾對樣品的測定，如果有幾個分析物，應(yīng)保證每一個分析物都不被干擾。對于難溶性但高滲透性的藥物，如已建立良好的體內(nèi)外相關(guān) 關(guān)系，也可用體外溶出的研究來替代體內(nèi)研究。通過測量不同時間點的生物樣本 （如全血、血漿、血清或尿液）中藥物濃度，獲得藥物濃度 時間曲線 （ ConcentrationTime curve,CT）來反映藥物從制劑中釋放吸收到體循環(huán)中的動 態(tài)過程。 BA和 BE 研究在藥品研發(fā)的不同階段有不同作用： 在新藥研究階段，為了確定新藥處方、工藝合理性，通常需要比較改變上述因素后制劑是否能達(dá)到預(yù)期的生物利用度；開發(fā)了新劑型，要 對擬上市劑型進(jìn)行生物利用度研究以確定劑型的合理性，通過與原劑型比較的 BA研究來確定新劑型的給藥劑量，也可通過 BE 研究來證實新劑型與原劑型是否等效；在臨床試驗過程中，可通過 BE 研究來驗證同一藥物的不同時期產(chǎn)品的前后一致性，如：早期和晚期的臨床試驗用藥品，臨床試驗用藥品（尤其是用于確定劑量的試驗藥）和擬上市藥品等。 治療等效性 (Therapeutic equivalence)：如果兩制劑含有相同活性成分，并且臨床上顯示具有相同的安全性和有效性，可以認(rèn)為兩制劑具有治療等效性。 二、 BA和 BE基本概念及應(yīng)用 1. 生物利用度： 是指藥物活性成分從制劑釋放吸收進(jìn)入全身循環(huán)的程度和速度 。允許這種預(yù)測的前提是制劑中活性成分進(jìn)入體內(nèi)的行為是一致并且可重現(xiàn)的。鑒于藥物濃度和治療效果相關(guān)， 假設(shè)在同一受試者，相同的血藥濃度 時間曲線意味著在作用部位能達(dá)到相同的藥物濃度，并產(chǎn)生相同的療效，那么就可以藥代動力學(xué)參數(shù)作為替代的終點指標(biāo)來建立等效性，即生物等效性（ Bioequivalence BE）。通常意義的 BE研究是指用 BA研究方法，以藥代動力學(xué)參數(shù)為終點指標(biāo)，根據(jù)預(yù)先確定的等效標(biāo)準(zhǔn)和限度進(jìn)行的比較研究。而含有相同的活性成分只是活性成分化學(xué)形式不同（如某一化合物的鹽、酯等）或劑型不同（如片劑和膠囊劑）的藥物制劑也可能治療等效； 基本相似藥物（ Essentially similar product）：如果兩個制劑具有等量且符合同一質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的藥物活性成分，具有相同劑型，并且經(jīng)過證明具有生物等效性 ,則兩個制劑可以認(rèn)為是基本相似藥物。以提高生物利用度為目的研發(fā)的新制劑，需要進(jìn)行 BA 研究，了解變更前后生物利用度的變化。 臨床比較試驗 當(dāng)無適宜的藥物濃度檢測方法，也缺乏明確的藥效學(xué)指標(biāo)時，也可以通過以參比制劑為對照的臨床比較試驗，以綜合的療效終點指標(biāo)來驗證兩制劑的等效性。 （一）生物樣本分析方法的建立和確證 生物樣品一般來自全血、血清、血漿、尿液或其他組織，具有取樣量少、 藥物濃度低、干擾物質(zhì)多以及個體的差異大等特點，因此必須根據(jù)待測物的結(jié)構(gòu)、生物介質(zhì)和預(yù)期的濃度范圍，建立適宜的生物樣品定量分析方法，并對方法進(jìn)行確證。對于以軟電離質(zhì)譜為基礎(chǔ)的檢測法（ LC－MS、 LCMSMS）應(yīng)注意考察分析過程中的介質(zhì)效應(yīng)，如離子抑制等。 標(biāo)準(zhǔn)曲線各濃度點的實測值與標(biāo)示值之間的偏差 *在可接受的范圍之內(nèi)時，可判定標(biāo)準(zhǔn)曲線合格。其準(zhǔn)確度應(yīng)在真實濃度的 80%～ 120%范圍內(nèi)，相對標(biāo)準(zhǔn)差 (RSD)應(yīng)小于 20%。低濃度選擇在 LLOQ的 3倍以內(nèi)，高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限，中間選一個濃度。 微生物學(xué)和免疫學(xué)方法確證 上述分析方法確證主要針對色譜法，很多參數(shù)和原則也適用于微生物學(xué)或免疫學(xué)分析，但在方法確證中應(yīng)考慮到它們的一些特殊之處。每個分析批生物樣品測 定時應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測定高、中、低三個濃度的質(zhì)控樣品。在臨床報告中，應(yīng)提供完成這些實驗工作的相關(guān)的詳細(xì)資料。 其他相關(guān)信息 項目編號、分析方法編號、分析方法類型、分析方法確證進(jìn)行簡化的理由、以及相應(yīng)的項目