功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法(存儲(chǔ)版)
【正文】 的不同可以分為： 膜芯片、玻璃芯片和液相芯片等。 抗體芯片檢測(cè)的結(jié)果不是蛋白質(zhì)的絕對(duì)含量而是目的蛋白質(zhì)在兩個(gè)樣品之間的相對(duì)峰度。 噬菌體展示技術(shù) 自 1985年 Smith G P等創(chuàng)建噬菌體展示技術(shù)，其原理是：以經(jīng)過改建的噬菌體為載體，把外源基因插入噬菌體外殼蛋白基因 PⅢ 區(qū)或 PⅧ 區(qū)，從而使表達(dá)的外源肽或蛋白質(zhì)展示在噬菌體的表面，并使表達(dá)產(chǎn)物保持良好的空間構(gòu)象。 如：抗體庫的構(gòu)建 表達(dá)載體噬菌粒 pCANTAB 5E 噬菌體展示技術(shù)的應(yīng)用 1. 與蛋白質(zhì)相互作用的研究 有研究利用 T7噬菌體展示篩選系統(tǒng)，以絲裂原活化蛋白激酶（ MAPK）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中 p38作為靶蛋白，篩選了與其有結(jié)合關(guān)系的多肽或蛋白，得到了 46個(gè)編碼蛋白的序列，在這些蛋白中有激酶、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白和離子通道相關(guān)蛋白等。 ? 該系統(tǒng)中轉(zhuǎn)錄激活的條件是 蛋白質(zhì)作為一個(gè)整體 起作用。另外 ,有些蛋白的正確折疊和功能有賴于其它非酵母蛋白的輔助 ,這限制了某些細(xì)胞外蛋白和細(xì)胞膜受體蛋白等的研究。 。 互作用的候選蛋白質(zhì)。 ? DNABD能夠識(shí)別 GAL4效應(yīng)基因的上游激活序列 (Up stream activating sequence, UAS),并與之結(jié)合，而 AD則通過與轉(zhuǎn)錄機(jī)制中的其他成分之間的作用 ,啟動(dòng) UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。目前已被成功應(yīng)用于蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)、抗原 抗體以及 DNA蛋白質(zhì)之間作用的研究，為功能基因組學(xué)的研究提供了一種新的方法。在液相系統(tǒng)中，為了區(qū)分不同的探針，在球形基質(zhì)的制造過程當(dāng)中，摻入了兩種不同的紅色分類熒光，根據(jù)這兩種紅色分類熒光的比例不同 (色彩編號(hào) )，區(qū)分不同的探針。微型化、集成化、高通量化是抗體芯片重要特點(diǎn)。熒光標(biāo)記 是芯片息采集中使用最多也是最成功的報(bào)告標(biāo)志。 ? 蛋白質(zhì)芯片反應(yīng)結(jié)果的檢測(cè)依據(jù)被檢測(cè)蛋白樣品的標(biāo)記種類來選擇不同的檢測(cè)設(shè)備。 抗體芯片 抗體芯片主要研究在不同生理或病理狀態(tài)下蛋白質(zhì)水平的量變。 ? 液相芯片體系由許多不同的小球
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