功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法-免費閱讀
【正文】 包括篩庫過程中自發(fā)升高的 BDx融合蛋白自我激活導(dǎo)致的假陽性，在 BDx融合蛋白不存在的情況下 ADY融合蛋白單獨激活報告基因，導(dǎo)致的假陽性 ,以及酵母中其他蛋白質(zhì)作用引起的假陽性等。 作為一種分析蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間相互作用的簡便而有效的研究體系 ,酵母雙雜交的最大的優(yōu)點是不需要分離、純化蛋白質(zhì) ,整個過程只是對核酸進行操作。 3 在疾病的治療和致病機理方面的研究 有研究以 HCV非結(jié)構(gòu)蛋白 NS4A作為固相靶分子，用 T7噬菌體表面展示的人肝細胞 cDNA文庫進行 5輪篩選后，確定了與 HCV非結(jié)構(gòu)蛋白 NS4A結(jié)合的是肝細胞蛋白絲裂原激活蛋白激酶（ MAPK）激活蛋白激酶 5（ MAPKAPK5），為進一步研究HCV的致病機制奠定了基礎(chǔ)。 ? Navagen公司用 T7噬菌體構(gòu)建的各種 cDNA表達文庫，將外源基因序列插入到編碼 T7噬菌體包膜蛋白基因中，插入片段基因長度可在 300 bp ～ 3 000 bp之間，所表達的多肽或蛋白質(zhì)以與噬菌體包膜蛋白融合的形式展示在噬菌體表面，大小在50個～ 1 200個氨基酸。 ，然后利用不依賴細胞 的體外蛋白表達系統(tǒng) ， 在原位合成靶蛋白 。 ＳＥＬＤＩ技術(shù)的基本原理 : 將待測樣品滴到芯片表面 (血清 、 尿液 、 分泌液 、細胞裂解液等 )， 通過親合作用樣品中的某些蛋白質(zhì)被吸附到芯片的固相基質(zhì)表面上 ， 用緩沖液洗去芯片上的雜質(zhì)蛋白和其他污染物 ， 然后在芯片上 加 入 能 量 吸 收 分 子 （ energy absorbing molecular,EAM） ， 芯片干燥后 ， 在真空管中用激光轟擊 ， 蛋白質(zhì)在吸收能量后被解析發(fā)生離子化 ， 在電場力作用下脫離芯片表面 ， 被離子檢測器所檢測 。 以細胞內(nèi)與某個功能有關(guān)或某種條件下的一群蛋白質(zhì)為主要研究內(nèi)容， 由此建立細胞內(nèi)外信號傳遞的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。 蛋白質(zhì)芯片分類 根據(jù) 固定介質(zhì) 的不同 ,可以分為兩大類 : 化學(xué)型蛋白質(zhì)芯片（ SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片） 生物型蛋白質(zhì)芯片（如抗體、受體、配體等）； 根據(jù) 片基材料
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