功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法-全文預(yù)覽
【正文】 噬菌體展示技術(shù) 自 1985年 Smith G P等創(chuàng)建噬菌體展示技術(shù)，其原理是：以經(jīng)過(guò)改建的噬菌體為載體，把外源基因插入噬菌體外殼蛋白基因 PⅢ 區(qū)或 PⅧ 區(qū)，從而使表達(dá)的外源肽或蛋白質(zhì)展示在噬菌體的表面，并使表達(dá)產(chǎn)物保持良好的空間構(gòu)象。 液相蛋白質(zhì)芯片 是一種新型的、高度靈活的多元蛋白質(zhì)研究平臺(tái)，可以適用于蛋白質(zhì)組研究、臨床研究和藥物研究中的各種蛋白質(zhì)分析。 抗體芯片檢測(cè)的結(jié)果不是蛋白質(zhì)的絕對(duì)含量而是目的蛋白質(zhì)在兩個(gè)樣品之間的相對(duì)峰度。 檢測(cè)結(jié)果經(jīng)過(guò)軟件分析處理后 ， 可繪制出質(zhì)譜圖 ， 顯示相關(guān)蛋白質(zhì)的分子量 、 含量等信息 。 蛋白質(zhì)芯片分類 根據(jù) 固定介質(zhì) 的不同 ,可以分為兩大類 : 化學(xué)型蛋白質(zhì)芯片（ SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片） 生物型蛋白質(zhì)芯片（如抗體、受體、配體等）； 根據(jù) 片基材料 的不同可以分為： 膜芯片、玻璃芯片和液相芯片等。 ? 蛋白質(zhì)芯片技術(shù) ? 噬菌體展示技術(shù) ? 酵母雙雜交系統(tǒng) 蛋白質(zhì)芯片 蛋白質(zhì)芯片 是將大量蛋白質(zhì)分子按預(yù)先設(shè)置的排列固定于一種載體表面，形成微陣列，根據(jù)蛋白質(zhì)分子間特異性結(jié)合的原理，構(gòu)建微流體生物化學(xué)分析系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物分子的準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測(cè)。 以細(xì)胞內(nèi)與某個(gè)功能有關(guān)或某種條件下的一群蛋白質(zhì)為主要研究?jī)?nèi)容， 由此建立細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)傳遞的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。雜交反后的芯片上各個(gè)反應(yīng)點(diǎn)的熒光位置、熒光強(qiáng)弱經(jīng)過(guò)芯片掃描儀和相關(guān)軟件可以進(jìn)行分析，將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)成數(shù)據(jù)，即可獲得有關(guān)生物信息。 ＳＥＬＤＩ技術(shù)的基本原理 : 將待測(cè)樣品滴到芯片表面 (血清 、 尿液 、 分泌液 、細(xì)胞裂解液等 )， 通過(guò)親合作用樣品中的某些蛋白質(zhì)被吸附到芯片的固相基質(zhì)表面上 ， 用緩沖液洗去芯片上的雜質(zhì)蛋白和其他污染物 ， 然后在芯片上 加 入 能 量 吸 收 分 子 （ energy absorbing molecular,EAM） ， 芯片干燥后 ， 在真空管中用激光轟擊 ， 蛋白質(zhì)在吸收能量后被解析發(fā)生離子化 ， 在電場(chǎng)力作用下脫離芯片表面 ， 被離子檢測(cè)器所檢測(cè) 。
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