【正文】 質的空間結構穩(wěn)定上起著重要的作用。 同源蛋白質： 在不同的生物體內行使相同或相似功能的蛋白質 。 Gln、 Asn、 Cys、 Arg不能用此法 。 ★ DNFB法： Sanger試劑 ， DNP多肽 ， 酸水解 ， 黃色DNP氨基酸 ， 有機溶劑 （ 乙酸乙酯 ） 抽提分離 ， 紙層析 、 薄層層析 、 液相等 ★ PITC法： Edman法，逐步切下。 （ 6） 多肽鏈部分裂解成肽段 。 （二）一級結構的測序 測序的一般步驟 （ 1） 測定蛋白質分子中多肽鏈的數(shù)目 （ 2） 拆分蛋白質分子中的多肽鏈 。 ?凡氨基酸殘基數(shù)目在 50個以上 ， 且具有特定空間結構的肽稱蛋白質；凡氨基酸殘基數(shù)目在 50個以下 ， 且無特定空間結構者稱多肽 。一個氨基酸分子的 α 羧基與另一個氨基酸分子的 α 氨基在適當?shù)臈l件下經脫水縮合即生成 肽 。 除一級結構外 ， 蛋白質的二 、 三 、 四級結構均屬于空間結構 ， 即 構象 。 ?甲醛反應 （ 2）羧基參與的反應 成鹽 、 成酯反應 成酰氯的反應 氨基被保護后 ， 羧基可與二氯亞砜或五氯化磷反應 ， 生成酰氯 ， 使羧基活化 ， 在多肽的人工合成中常用 。 其吸收峰在 280nm左右 ，以 色氨酸 吸收最強 。 (2) 氨基酸的兩性解離和酸堿滴定曲線 HA → A + H+ pH=pKa/ +Log[A]／ [HA] ?pKa/ 就是 HA50%解離（ [堿 ] = [酸 ]）時溶液的 pH值，Ka/就是此時溶液的 [H+] ?當 HA50%解離時，溶液的 pH值等于 pKa/ ?pH = pKa/ 時， [堿 ] = [酸 ]（ 50%解離） pH pKa/ 時， [堿 ] [酸 ]（＞ 50%解離） pH pKa/ 時， [酸 ] [堿 ]（＜ 50%解離） ?氨基酸分子是一種兩性電解質。 二、基本氨基酸的分類： ? 根據(jù) R側鏈基團性質的不同 ， 可將氨基酸進行分類 ? 雜環(huán)氨基酸 、 芳香族氨基酸與脂肪族氨基酸 ? 極性氨基酸與非極性氨基酸 按照 R基的化學結構分類 （ 1）、 R為脂肪烴基的氨基酸（ 5種） （ 2）、 R中含有羥基和硫的氨基酸（共 4種） （ 3）、 R中含有酰胺基團（ 2種） （ 4）、 R中含有酸性基團（ 2種） （ 5）、 R中含堿性基團（ 3種） （ 6）、 芳香族氨基酸 （ 7）、雜環(huán)族氨基酸（ 1種） 極性分類可分為： a)非極性氨基酸： Ala， Val， Leu， Ile，Pro， Phe,Try,Met。 ? 天然的蛋白質完全水解 ， 最后都可得到約二十種不同的氨基酸 。 第一節(jié) 蛋白質通論 ?蛋白質的組成與分類 ?蛋白質的大小與分子量 ?蛋白質的構象 ?蛋白質的功能 第二節(jié) 蛋白質的組成－氨基酸 ? 組成蛋白質的基本單位是氨基酸 。 非蛋白質氨基酸：存在于生物體內但不組成蛋白質 (約 150種 )。 ② 不溶于非極性溶劑 → 極性分子 ③ 介電常數(shù)高 → 水溶液中的氨基酸是極性分子 。 OH O H R — CH — C O O H R — CH — C O O R — CH — C O O │ H+ │ H+ │ N H 3+ N H 3+ N H 2 p H p I p H = p I p H p I 2.2.2.33RRpKNHpKapIapKC O O HpKapIaNHpKC O O HpKapIa??????????????堿性酸性中性2． 紫外吸收性質： ?組成天然蛋白質分子的 20種氨基酸中 ，只有色氨酸 、 酪氨酸和苯丙氨酸對紫外光有光吸收 。 λ（ nm） ε Tyr 275 103 Phe 257 102 Trp 280 103 3． 氨基酸的化學反應 （ 1） 氨基參與的反應 ?與亞硝酸反應 （ Van Slyke 法測定氨基酸 ） ?Sanger 反應 ： （ DNFB） ?Edman反應：苯異硫氰酸酯， PITC ? 生成西佛堿的反應（ Schiff）：西佛堿是某些酶促反應的中間產物（如轉氨基反應的中間產物）。 ?蛋白質的分子結構可人為劃分為一 、 二 、三 、 四級結構 。 一、一級結構 （一）氨基酸的連接方式 肽鍵 二硫鍵 鉸鏈 異肽鍵 ?蛋白質是由若干氨基酸的氨基與羧基經脫水縮合而連接起來形成的長鏈化合物。 ?多肽鏈具有方向性 ， 頭端為 氨基端 （ N端 ） ， 尾端為 羧基端 （ C端 ） 。 G lu Cys G l y G lu Cys G ly S H S S