蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能-在線(xiàn)瀏覽
2025-06-20 07:58本頁(yè)面
【正文】 G l u Cys G ly 谷胱甘肽的生理功用： ?解毒作用 ：與毒物或藥物結(jié)合 ， 消除其毒性作用； ?參與氧化還原反應(yīng) ：作為重要的還原劑 ，參與體內(nèi)多種氧化還原反應(yīng)； ?保護(hù)巰基酶的活性 ：使巰基酶的活性基團(tuán) SH維持還原狀態(tài)； ?維持紅細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定 ：消除氧化劑對(duì)紅細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的破壞作用 。 （ 3） 斷裂鏈內(nèi)二硫鍵 。 （ 5） 測(cè)定多肽鏈的氨基酸組成 。 （ 7） 測(cè)定各個(gè)肽段的氨基酸順序 （ 8） 確定肽段在多肽鏈中的順序 。 端基分析 ① N端分析 ★ DNScl法：最常用 ， 黃色熒光 ， 靈敏度極高 ， DNS多肽水解后的 DNS氨基酸不需要提取 。無(wú)色 PTH氨基酸，有機(jī)溶劑抽提，層析。 苯甲醛沉淀氨基酸的酰肼 ， C端游離氨基酸留在上清中 。 ★ 羧肽酶法 （ Pro不能測(cè) ） 羧肽酶 A：除 Pro、 Arg、 Lys外的所有 C端 羧肽酶 B：只水解 Arg、 Lys N H2N… … … … … Val— Ser— Gly C 肽鏈的部分裂解和肽段的分離純化 （ 1） 、 化學(xué)裂解法 ① 溴化氰 — Met— X— 產(chǎn)率 85% ② 亞碘?；郊姿? — Trp— X— 產(chǎn)率 70100% ③ NTCB（ 2硝基 5硫氰苯甲酸 ） — X— Cys— ④ 羥胺 NH2OH — Asn— Gly— 約 150個(gè)氨基酸出現(xiàn)一次 （ 2） 、 酶法裂解 ① 胰蛋白酶 Lys X (X ≠ Pro) Arg—— X ② 胰凝乳蛋白酶 Tyr—— X (X ≠ Pro) Trp—— X Phe—— X 胃蛋白酶 Phe(Trp、 Try、 Leu)—— Phe(Trp、 Try、 Leu) ③ Glu蛋白酶 Glu—— X （ Vs蛋白酶 ） ④ Arg蛋白酶 Arg—— X ⑤ Lys蛋白酶 X—— Lys ⑥ Pro蛋白酶 Pro—— X （ 4） 二硫鍵的確定 （ 對(duì)角線(xiàn)電泳法 ） 碘乙酰胺封閉 SH 胃蛋白酶酶解蛋白質(zhì) 第一向電泳 過(guò)甲酸氧化 — S— S— 生成 SO3H 第二向電泳 分離出含二硫鍵的兩條短肽 ， 測(cè)序 與拼接出的肽鏈比較 ， 定出二硫鍵的位置 。 親源關(guān)系越遠(yuǎn) ， 同源蛋白的氨基酸順序差異就越大 。 如：血紅蛋白在不同的脊椎動(dòng)物中都具有輸送氧氣的功能 ， 細(xì)胞色素在所有的生物中都是電子傳遞鏈的組分 。 鐮刀形紅細(xì)胞貧血現(xiàn)是由于血紅蛋白發(fā)生了遺傳突變引起的 ?鏈第 6位的 aa線(xiàn)基由正常的 Glu變成了疏水性的 Val ★ 一級(jí)結(jié)構(gòu)的部分切除與蛋白質(zhì)的激活 二、二級(jí)結(jié)構(gòu) （一）、蛋白質(zhì)分子中的非共價(jià)鍵 (次級(jí)鍵 ) 1. 氫鍵： ?氫鍵 (hydrogen bond)的形成常見(jiàn)于連接在一電負(fù)性很強(qiáng)的原子上的氫原子 ， 與另一電負(fù)性很強(qiáng)的原子之間 。 ?氫鍵的鍵能較低 (~12kJ/mol)，因而易被破壞。 ?蛋白質(zhì)分子中的許多氨基酸殘基側(cè)鏈也是非極性的 ， 這些非極性的基團(tuán)在水中也可相互聚集 ， 形成疏水鍵 ， 如 Leu， Ile，Val， Phe， Ala等的側(cè)鏈基團(tuán) 。 ?在近中性環(huán)境中 ， 蛋白質(zhì)分子中的酸性氨基酸殘基側(cè)鏈電離后帶負(fù)電荷 ， 而堿性氨基酸殘基側(cè)鏈電離后帶正電荷 ， 二者之間可形成離子鍵 。 ?蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈主鏈原子局部的空間結(jié)構(gòu) ， 但不包括與其他肽段的相互關(guān)系及側(cè)鏈構(gòu)象的內(nèi)容 。 酰胺平面（肽平面） 1. 由于 C=O雙鍵中的 π電子云與 N原子上的未共用電子對(duì)發(fā)生 “ 電子共振 ” ， 使肽鍵具有部分雙鍵的性質(zhì) ， 不能自由旋轉(zhuǎn) 。 但由于α 碳原子與其他原子之間均形成單鍵 ，因此兩相鄰的肽鍵平面可以作相對(duì)旋轉(zhuǎn) 。 ★ 肽鍵的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： （ 1） 酰胺氮上的孤對(duì)電子與相鄰羰基之間形成共振雜化體 。 （ 3） 肽鍵具有平面性 ， 組成肽鍵的 4個(gè)原子和 2個(gè) Cα幾乎處在同一平面內(nèi) （ 酰氨平面 ） 。 （ 5） 肽鏈中的肽鍵一般是反式構(gòu)型 ， 而 Pro的肽鍵可能出現(xiàn)順 、 反兩種構(gòu)型 ． ★ 多肽鏈可以看成由 Cα串聯(lián)起來(lái)的無(wú)數(shù)個(gè)酰胺平面組成 ★ 當(dāng) Φ(Ψ)旋轉(zhuǎn)鍵兩側(cè)的主鏈呈順式時(shí)，規(guī)定Φ(Ψ) =0176。 （二）蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的類(lèi)型： ?蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要包括 α 螺旋 ，β 折迭 ， β 轉(zhuǎn)角及無(wú)規(guī)卷曲等幾種類(lèi)型 。 , Ψ= 48176。 ， 沿軸上升 ④ 氨基酸殘基側(cè)鏈向外 ⑤ 相鄰螺圈之間形成鏈內(nèi)氫鏈 ， 氫鍵的取向幾乎與中心軸平行 。 典型的 α螺旋用 ， 13表示氫鍵封閉的環(huán)包括 13個(gè)原子 。 2. β 折迭： ?β 折迭是由若干肽段或肽鏈排列起來(lái)所形成的扇面狀片層構(gòu)象 ， 其結(jié)構(gòu)特征為： ⑴ 由若干條肽段或肽鏈平行或反平行排列組成片狀結(jié)構(gòu)； ⑵ 主鏈骨架伸展呈鋸齒狀； ⑶ 借相鄰主鏈之間的氫鍵維系 。 回折部分所形成的一種二級(jí)結(jié)構(gòu) ， 其結(jié)構(gòu)特征為： ⑴ 主鏈骨架本身以大約 180176。 ⑵ 回折部分通常由四個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成 。 4. 無(wú)規(guī)卷曲： ?無(wú)規(guī)卷曲是指多肽鏈主鏈部分形成的無(wú)規(guī)律的卷曲構(gòu)象 。 復(fù)繞 α螺旋（ αα結(jié)構(gòu) ） βxβ結(jié)構(gòu) β曲折（ βmeander） 回形拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)（希臘鑰匙） β折疊桶
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