【正文】 0左右，使生物堿從樹脂中游離出來，再用三氯甲烷或乙醚等有機(jī)溶劑回流提取，回收溶劑即可得到總生物堿。 莨菪堿（ ） 東莨菪堿（ ） 游離生物堿：如苦參中苦參堿和氧化苦參堿的分離。 （ 2）分配柱色譜 對(duì)某些結(jié)構(gòu)特別相近的生物堿，可采用分配色譜法。 四、生物堿的色譜檢識(shí) 常用 方法：薄層色譜法、紙色譜法、高效液相色譜法和氣相色譜法 （一）薄層色譜法 （ 1）吸附劑 吸附劑常用硅膠和氧化鋁。 （ 1）支持劑與固定相： 通常選用硅膠或纖維素粉作支持劑，以甲酰胺或水為固定相。 展開劑在使用前也需用固定相液 飽和。由于流動(dòng)相為偏堿性系統(tǒng)，分離效果良好。 γ 苦參堿為液態(tài) ，沸點(diǎn) 223℃/6mmHg 。 苦參堿、氧化苦參堿和羥基苦參堿具內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)，可被水解皂化生成羧酸衍生物，酸化后又脫水環(huán)合為原來結(jié)構(gòu)。 結(jié)構(gòu)分類：麻黃生物堿分子中的氮原子均在側(cè)鏈上，為有機(jī)胺類生物堿。 游離麻黃堿可溶于 水，但 偽麻黃堿在水中的溶解度較麻黃堿小 。 麻黃堿和偽麻黃堿的提取分離流程圖 圖 續(xù) 1 圖 續(xù) 2 利用麻黃堿和偽麻黃堿在游離狀態(tài)時(shí)具有揮發(fā)性，可用水蒸氣蒸餾法從麻黃中提取。 （六 ） 麻黃生物堿在臨床應(yīng)用中應(yīng)注意的問題 麻黃生物堿具興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)及強(qiáng)心、升高血壓的作用 ，因此用量過大 （治療量的 5～ 10倍）或急性中毒者，可引起頭痛，煩躁，失眠，心悸，大汗不止，體溫及血壓升高，心動(dòng)過速，心律失常，嘔吐，甚至昏迷、驚厥、呼吸及排尿困難，心室纖顫等癥狀，甚至心肌梗死或死亡。 注意：小檗堿及其鹽類干燥時(shí)，溫度不宜過高，一般不超過 80℃ 。 小糪堿和甲基黃連堿的提取分離流程圖 （五）黃連生物堿的生物活性 藥理實(shí)驗(yàn)表明，其主要成分小檗堿有明顯的抗菌、抗病毒作用，小檗堿、黃連堿、巴馬丁、藥根堿等原小檗型生物堿還具有明顯的抗炎、解痙、抗?jié)?、免疫調(diào)節(jié)及抗癌等作用。附子具有升壓、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈等作用，中醫(yī)用于回陽救逆。醫(yī)用阿托品為硫酸鹽（ B2在酸堿接觸下或加熱時(shí)，可通過烯醇化起外消旋作用而成為阿托品。 莨菪烷類生物堿都是氨基醇的酯類，易水解，尤其在堿性水溶液中更易水解。 （四）洋金花中生物堿的生物活性 現(xiàn)代藥理研究表明，莨菪堿及其外消旋體阿托品有解痙鎮(zhèn)痛、解救有機(jī)磷中毒和散瞳作用；東莨菪堿除具有莨菪堿的生理活性外，還有鎮(zhèn)靜、麻醉作用。 （ EtOH），味極苦，毒性極強(qiáng)。 此外，有毒成分能經(jīng)皮膚吸收，外用不宜大面積涂敷。 4）氫氧化鈉堿水溶液加 HCl調(diào)至 pH23，加飽和 NaCl溶液放置，沉淀的生物堿是 [答疑編號(hào) 5630020312] 【正確答案】 B，鹽酸小檗堿不溶于水。 馬錢子堿在此條件下不能產(chǎn)生相似的顏色反應(yīng)。 結(jié)構(gòu)分類：吲哚類生物堿（單萜吲哚類）。 莨菪堿（或阿托品）、 東莨菪堿等莨菪烷類生物堿分子結(jié)構(gòu)中具有莨菪酸部分者，用發(fā)煙硝酸處理，產(chǎn)生硝基化反應(yīng)，生成三硝基衍生物，此物再與苛性堿醇溶液反應(yīng)，分子內(nèi)雙鍵重排， 生成醌樣結(jié)構(gòu)的衍生物而呈深紫色，漸轉(zhuǎn)暗紅色，最后顏色消失。 ④ 山莨菪堿由于多一個(gè)羥基，親脂性較莨菪堿弱，能溶于水和乙醇。除山莨菪堿所表現(xiàn)的左旋性是幾個(gè)手性碳原子的總和外，其他三個(gè)生物堿的旋光性均來自莨菪酸部分。 結(jié)構(gòu)分類：莨菪烷類生物堿，由莨菪醇類和芳香族有機(jī)酸結(jié)合生成的一元酯類化合物。 （二）川烏中主要毒性生物堿在炮制過程中的變化 烏頭次堿 烏頭原堿 毒性大?。? 雙酯型烏頭堿＞ 單酯型烏頭堿 ＞ 無酯鍵的醇胺型生物堿。 （ 2）漂白粉顯色反應(yīng) 在小檗堿的酸性水液中加入漂白粉（或通入氯氣），溶液變?yōu)闄鸭t色。 （二）小檗堿的理化性質(zhì) ① 自水或稀乙醇中析出的小檗堿為黃色針狀結(jié)晶，含 ， 100℃ 干燥后仍能保留 結(jié)晶水，加熱至 110℃ 變?yōu)辄S棕色，于 160℃ 分解。 （五）麻黃生物堿的生物活性 藥理實(shí)驗(yàn)表明， 麻黃堿有收縮血管、興奮中樞神經(jīng)作用，能興奮大腦、中腦、延髓和呼吸循環(huán)中樞；有類似腎上腺素樣作用，能增加汗腺及唾液腺分泌，緩解平滑肌痙攣 。 在麻黃堿和偽麻黃堿的水溶液中加硫酸銅試劑后，隨即加氫氧化鈉試劑呈堿性，溶液呈藍(lán)紫色，再加乙醚振搖分層，乙醚層為紫紅色，水層為藍(lán)色。 堿性麻黃堿和偽麻黃堿為有機(jī)仲胺衍生物，堿性較強(qiáng)。此外還含少量的甲基麻黃堿、甲基偽麻黃堿和去甲基麻黃堿、去甲基偽麻黃堿。 可利用兩者溶解性的差異將其分離。 苦參堿 氧化苦參堿 羚基苦參堿 去氫苦參堿 N甲基金雀花堿 （二）苦參生物堿的理化性質(zhì) 苦參堿有 α 、 β 、 γ 、 δ 四種異構(gòu)體。 如用 HPLC法分離分析罌粟殼中的嗎啡、可待因和罌粟堿時(shí)，采用 Waters μ Bondapak C18色譜柱，流動(dòng)相為 %乙酸銨 1%三乙胺 甲醇（ 49： 1： 50） ,檢測(cè)波長 230nm，柱溫 25℃ 。 ① 水：可用濾紙本身含有的 6%～ 7%水分，也可用水浸潤濾紙； ② 甲酰胺：將甲酰胺溶于丙酮，再將濾紙置于其中浸濕片刻，取出，揮去丙酮即可； ③ 酸性緩沖液（也稱多緩沖紙色譜）：將不同 pH值的酸性緩沖液自起始線由高到低間隔 2cm 左右的距離涂布若干個(gè)緩沖液帶，晾干即可使用。 在展開劑中加入少量堿性試劑，如二乙胺、氨水等，可改善分離效果。 分離原理 要點(diǎn) 利用堿性差異分離 pH梯度萃取 利用溶解度差異分離 苦參（乙醚）、防己（冷苯）、麻黃（草酸） 利用特殊官 能團(tuán)分離 羧基、酚羥基、內(nèi)酯與內(nèi)酰胺 利用色譜法分離 吸附色譜、分配色譜 高效液相色譜法 最佳選擇題 分離漢防己甲素和漢防己乙素的原理（ ） [答疑編號(hào) 5630020205] 【正確答案】 D（漢防己甲素的極性小于漢防己乙素，可溶于冷苯） 三、水溶性生物堿（季銨堿）的分離 （一）沉淀法 實(shí)驗(yàn)室常用雷氏銨鹽試劑純化季銨堿。 （ 1）吸附柱色譜 常用氧化鋁或硅膠作為吸附劑，有時(shí)也用纖維素、聚酰胺等。 對(duì)于堿性有差別的兩種生物堿，可采用調(diào) pH后 簡(jiǎn)單萃取法分離。 可升華的生物堿如咖啡堿可用升華法提取。（具體方法：利用酸提堿沉得方法使生物堿游離，萃取使其與雜質(zhì)分離） ① 用于檢查生物堿的有無。 一般來說，空間效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)共存，空間效應(yīng)居主導(dǎo)地位；共軛效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)共存，共軛效應(yīng)居主導(dǎo)地位。如胡椒堿、 秋水仙堿或咖啡堿等。 麻黃堿（ ） 去甲麻黃堿（ ） 苯異丙胺（ ） 特例： 季銨型小檗堿是由醇胺型異構(gòu)而來，季銨型穩(wěn)定，故呈強(qiáng)堿性；蛇根堿分子中氮原 子的 α 、 β 位有雙鍵，氮原子的未共用電子對(duì)與雙鍵的 π 電子可發(fā)生轉(zhuǎn)位，形成季銨型共軛酸，因而堿性強(qiáng)。 堿性隨雜化程度的升高而增強(qiáng)，即 sp3＞ sp2＞ sp。生物堿在酸水中成 鹽溶解，調(diào)堿性后又游離 不同的酸的鹽 通常生物堿的無極酸鹽水溶性大于有機(jī)酸鹽；無機(jī)酸鹽中含氧酸鹽的 水溶性大于鹵代酸鹽；小分子有機(jī)酸鹽大于大分子有機(jī)酸鹽 練習(xí)題 最佳選擇題 水溶性最強(qiáng)的生物堿是 [答疑編號(hào) 5630020207] 【正確答案】 A 四、堿性 生物堿分子中氮原子上的孤電子對(duì)，能給出電子或接受質(zhì)子而使生物堿顯堿性。 秋水仙堿 （ 1）具有酚羥基或羧基的生物堿： 具有酸、堿兩性，故即可溶于酸水，又可溶于堿水。 通常左旋體的生理活性比右旋體強(qiáng)。 生物堿多具苦味 ,少數(shù)呈辛辣味或其他味道 ,如甜菜堿具有甜味 。吲哚類生物堿主要由色氨酸衍生而成，根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，主要分為四類。如罌粟中具解痙作用的罌粟堿，烏頭中的 強(qiáng)心成分去甲烏藥堿，厚樸中的厚樸堿等。 （二）莨菪烷類生物堿 此類生物堿多 來源于鳥氨酸 ，由莨菪烷環(huán)系的 C3醇羥基與有機(jī)酸縮合成酯。 藻類、水生類植物中未發(fā)現(xiàn)生物堿。 二、生物堿的分布 植 物 類 型 科 屬 雙子葉植物 （多見，已知有 50多個(gè)科的 120多個(gè)屬） 如毛茛科（黃連屬黃連，烏頭屬烏頭、附子）、防己科（漢防己、北豆根）、罌粟科（罌粟、延胡索）、茄科（曼陀羅屬洋金花、顛茄屬顛茄、莨菪屬莨菪）、馬錢科（馬錢子）、小檗科（三棵針）、豆科（苦參屬苦參、槐屬苦豆子）、蕓香科吳茱萸屬（吳茱萸）等 單子葉植 物 如石蒜科、百合科（貝母屬的川貝母、浙貝母）、蘭科等 裸子植物 如麻黃科、紅豆杉科、三尖杉科和松柏科等 低等植物 如煙堿存在于蕨類植物中 ,麥角生物堿存在于菌類植物中 地衣、苔蘚類植物中僅發(fā)現(xiàn)少數(shù)簡(jiǎn)單的吲哚類生物堿。如苦參