【正文】 再 加 入 藥 液 量6 % ～ 1 0 % 的 N a C l ， 鹽 析 ， 放 置 ， 濾 過沉 淀 溶 液溶 于 熱 水 ， 加 石 灰 乳 調(diào)p H 8 . 5 ～ 9 ， 趁 熱 濾 過溶 液加 H C l 調(diào) p H 2 ～ 3 ，放 置 ， 濾 過加 N H4 O H ， 調(diào) p H 8 ～ 9 ，放 置 ， 濾 過沉 淀以 甲 醇 或 乙 醇 重 結(jié) 晶小 檗 胺 母 液（ 主 要 含 藥 根 堿 ）結(jié) 晶加 石 灰 乳 調(diào) p H 9加 3 0 % 的 N a C l 濾 過溶 液鹽 酸 小 檗 堿水 洗 至 中 性 ， 抽 干加 濃 H C l , 調(diào) p H 3 ～ 4 , 加 1 5 % 的 N a C l藥 根 堿 鹽 酸 鹽 （ 粗 品 ）（二） 三顆針中生物堿的性質(zhì) （一）三顆針中生物堿主要有效成分及結(jié)構(gòu) 三 必備知識 （一）三顆針中主要有效成分及結(jié)構(gòu) 三顆針中主要含有小檗堿，常作為黃連的代用品。 ? ？ 任務(wù)四 三顆針中生物堿類成分的提取分離技術(shù) 學(xué)習(xí)目標(biāo) 一 二 三 三顆針中總生物堿的提取分離技術(shù) 必備知識 五 四 六 相關(guān)知識鏈接及拓展 課堂互動 目標(biāo)測試 一 學(xué)習(xí)目標(biāo) 2 掌握小檗堿的提取、分離技術(shù)。東莨菪堿有較強(qiáng)的親水性，可溶于水，易溶于乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等溶劑，難溶于苯、四氯化碳等強(qiáng)親脂性溶劑。東莨菪堿為粘稠狀液體，但形成一水化物為結(jié)晶體，熔點(diǎn) 59176。以洋金花為主藥的中藥麻醉劑，我國自古以來就有應(yīng)用。 中性硫酸鹽法常加入硫酸鈉等中性硫酸鹽，因生成的硫酸鉛在水中有一定溶解度，故脫鉛不徹底。 結(jié)晶法是實(shí)驗(yàn)室常用的成分純化方法 。 試劑沉淀法的基本原理 利用某成分能與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)或利用某些成分在不同溶劑中溶解度的差異，通過加入特定試劑或溶劑，使生成沉淀，而與其它成分分離。 但并不能利用結(jié)晶法直接進(jìn)行提取液的分離和純化 ， 因?yàn)檫^多的雜質(zhì)會干擾結(jié)晶的形成 ， 甚至有時少量的雜質(zhì)也會阻礙結(jié)晶的析出 ， 因此 ， 結(jié)晶前應(yīng)盡可能地除去雜質(zhì) 。 2．堿性 粉防己堿和防己諾林堿分子中均有兩個叔胺狀態(tài)的氮原子，堿性較強(qiáng)。 學(xué)習(xí)目的 二 防己中生物堿類化學(xué)成分的提取分離技術(shù) 防己（ Stephania tetrandra）又稱粉防已、漢防己、倒地拱，為防已科植物粉防己的干燥根，為臨床常用中藥。 薄膜蒸發(fā) 效率高，適用于大量水提液。 結(jié)晶法是實(shí)驗(yàn)室常用的成分純化方法 。溶劑沸點(diǎn)要適中、低毒安全、環(huán)保。 影響因素 溶劑、方法、粉碎度、溫度、時間等 1 藥材粉碎度：藥粉越細(xì)、表面積越大，提取效率越高。 由于麻黃堿和偽麻黃堿的分子較小，且屬芳烴仲胺生物堿，其溶解性與一般生物堿不完全相同。 學(xué)會 麻黃中生物堿類化合物 的色譜鑒定技術(shù) 。 ②生物堿鹽： 常以水為固定相， BAW（ nBuOHHACH2O）溶劑系統(tǒng) 為展開劑。 色譜檢識 比較樣品與對照品 Rf值（ TLC PC）或 tR（ HPLC GC）是否一致，從而作出判斷。 苦參堿與氧化苦參堿的分離 麻黃堿與偽麻黃堿的分離 利用生物堿及其鹽的溶解度不同分離 利用生物堿堿性的差異分離 總堿氯仿溶液 氯仿層 氯仿層 pH 5～ 6緩沖液萃取 （強(qiáng)堿性生物堿）酸水層 pH 3～ 4緩沖液萃取 pH 1～ 2緩沖液萃取 氯仿層 （中強(qiáng)堿性生物堿）酸水層 （弱堿性生物堿）酸水層 CHCl3 Et2O 分離方法 苦參堿 + + 總堿溶于少量 CHCl3，逐滴加入至 Et2O中，過濾 氧化苦參堿 + － CHCl3 甲苯 H2O 分離方法 麻黃堿 + + 麻黃堿草酸鹽 總堿溶于甲苯，用草酸溶液萃取，濃縮萃取液，麻黃堿草酸鹽析出。 脂溶性生物堿的提取 —— 酸水提取法 脂溶性生物堿的提取 —— 醇類溶劑提取法 利用游離堿及其鹽均溶于乙醇的性質(zhì)，將其提取出來。 NNC H 3C H3 N H C O OC H 3 C H 3 N H 2 N H21 3O C ON C H3C HC H2O HO C ON C H3OC HC H2O H莨菪堿 東莨菪堿 （三） 生物堿類化合物的提取與分離 生物堿的提取與分離 提取方法 分離方法 醇類溶劑提取法 利用生物堿堿性的差異分離 利用生物堿及其鹽的溶解度不同分離 利用生物堿的特殊官能團(tuán)分離 酸水提取法 親脂性有機(jī)溶劑提取法 利用色譜法分離 般來說 ， 天然藥物化學(xué)成分在常溫下多半是固體物質(zhì) ， 常具有結(jié)晶的通性 ， 因此 ， 可根據(jù)溶解度得不同 ， 用結(jié)晶法來達(dá)到分離 、 純化 、 精制的目的 。 誘導(dǎo)效應(yīng) 空間效應(yīng) sp3＞ sp2＞sp 生物堿分子中氮原子的孤電子對與 π電子基團(tuán)共軛時一般使生物堿的堿性減弱。 一般為無色或白色，少數(shù)有顏色。 熟練進(jìn)行薄荷中的揮發(fā)油和青蒿中的青蒿素的提取分離操作； 能進(jìn)行當(dāng)歸、丁香中揮發(fā)油的提取分離操作。 生物堿在植物界分布較廣，多數(shù)存在于雙子葉植物中。 游離生物堿 生物堿鹽 親脂性生物堿 一般易溶于水，可溶于醇類，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。 莨菪堿顯紅色；嗎啡顯棕色； 馬錢子堿顯血紅色； 奎寧顯淡橙色；士的寧顯藍(lán)紫色。 脂溶性生物堿的提取 —— 親脂性有機(jī)溶劑提取法 1. 原理 是將中藥中的生物堿有機(jī)酸鹽轉(zhuǎn)變成水溶性較大的無機(jī)酸或小分子有機(jī)酸鹽，將其提取出來。 游離堿大多溶于親脂性有機(jī)溶劑的性質(zhì)，故采用氯仿、 乙醚和苯等將其提取出來。 例如三尖衫酯堿和高三尖衫酯堿的分離。 大多采用改良碘化鉍鉀試液噴霧顯色，呈橘紅色斑點(diǎn)。 任務(wù)一 麻黃中生物堿類成分的提取分離技術(shù) 學(xué)習(xí)目標(biāo) 一 二 三 麻黃中生物堿的提取分離技術(shù) 必備知識 五 四 六 相關(guān)知識鏈接及拓展 課堂互動 目標(biāo)測試 一 學(xué)習(xí)目標(biāo) 2 掌握 麻黃中生物堿類化合物 的提取、分離及鑒定技術(shù)。麻黃中含有多種生物堿 ,因產(chǎn)地和品種的不同有一定的差異 ,一般以麻黃堿和偽麻黃堿為主 ,此外還含少量甲基麻黃堿、甲基偽麻黃堿和去甲基麻黃堿、去甲基偽麻黃堿。麻黃堿草酸鹽比偽麻黃堿草酸鹽在水中溶解度小。 2 提取溫度：一般熱提效率高，但要考慮有些成分溫度高易破壞，應(yīng)選擇適宜 溫度。 時間長次多，提取效率低。由于溶解度不同，麻黃堿草酸鹽從水溶液中析出，偽麻黃堿草酸鹽仍留在水中，過濾分離后再按溶劑提取法中的精制步驟將其精制成鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿。 熟悉粉防己堿和防己諾林堿的結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)。 防己生物堿的提取分離工藝流程 防 己 粗 粉9 5 % 乙 醇 加 熱 回 流 提 取乙 醇 提 取 液堿 水 層濃 縮乙 醇 浸 膏5 % 鹽 酸 溶 解 ， 過 濾酸 水 液 不 溶 物氨 水 堿 化 至 P H 9 . 0 1 0 . 0氯 仿 萃 取氯 仿 層回 收 氯 仿殘 留 物氧 化 鋁 柱 層 析 分 離環(huán) 己 烷 丙 酮 ( 4 : 1 ) 洗 脫（ 漢 防 己 甲 素 ）粉 防 己 堿防 己 諾 林 堿( 漢 防 己 乙 素 )鹽 酸 酸 化 至 P H 3 . 0 4 . 0加 飽 和 雷 氏 銨 鹽 至 沉 淀 完 全靜 置 ， 過 濾沉 淀丙 酮 溶 解 ， 過 濾丙 酮 液通 過 氧 化 鋁 柱 除 去 雜 質(zhì)丙 酮 液濾 液沉 淀定 量 加 入 B a C l2溶 液（ 把 上 步 加 入 A g2S O4中 的 S O42 沉 淀 完 全 ）沉 淀濾 液減 壓 濃 縮 ， 析 出 晶 體 （ 粗 品 ）熱 水 重 結(jié) 晶輪 環(huán) 藤 酚 堿 鹽 酸 鹽方 法 二加 入 熱 飽 和 A g2S O4溶 液過 濾方 法 一加 冷 苯 溶 解苯 液 不 溶 物回 收 苯丙 酮 重 結(jié) 晶丙 酮 重 結(jié) 晶（ 漢 防 己 甲 素 ）粉 防 己 堿防 己 諾 林 堿( 漢 防 己 乙 素 )（二） 防己生物堿的性質(zhì) （一）防己中主要有效成分及結(jié)構(gòu) 三 必備知識 （一）防己中主要有效成分及結(jié)構(gòu) 防已中的生物堿含量高達(dá) %一 %，其中主要為粉防己堿和防己諾林堿，還含少量的輪環(huán)藤酚堿。但由于兩者的分子結(jié)構(gòu)中 7位取代基的差異，前者為甲氧基，后者為酚羥基，故粉防己堿的極性較小，能溶于冷苯；防己諾林堿極性較大，難溶于冷苯。 酸沉淀與堿沉淀各自的沉淀范圍 酸沉淀：適用于分離提純酸性、堿性或兩性有機(jī)化合物，如 黃酮、蒽醌類酚酸性成分等。 結(jié)晶法是實(shí)驗(yàn)室常用的成分純化方法 。這種沉淀反應(yīng)是可逆的，可使有效成分與其它雜質(zhì)分離。 了解洋金花中生物堿的提取分離新進(jìn)展?，F(xiàn)代藥理研究表明，洋金花中所含的莨菪堿及其外消旋體阿托品有解痙鎮(zhèn)痛、解有機(jī)磷中毒和散瞳作用；東莨菪堿除除具有莨菪堿的生理活性外，還有鎮(zhèn)靜、麻醉的作用。這些生物堿除阿托品無旋光活性外．其他生物堿均具有左旋的旋光活性。 4．洋金花中莨菪烷類生物堿的鑒別反應(yīng) （ l）氯化汞沉淀反應(yīng) 莨菪堿（或阿托品）在氯化汞的乙醇溶液中發(fā)生反應(yīng)生成黃色沉淀，加熱后沉淀變?yōu)榧t色。 知識要求 3 能力要求 1 掌握三顆針中生物堿的提取分離原理及操作技術(shù)。小檗堿為異喹啉類原小檗堿型生物堿，具有明顯的抗菌作用。如果在水溶液中加入過量的堿，可抑制季銨離子的解離，使其部分轉(zhuǎn)變?yōu)槿┦交虼际?，溶液也變成了棕色或黃色。 學(xué)習(xí)目的 二 烏頭中生物堿類化學(xué)成分的提取分離技術(shù) 烏頭為毛莨科植物烏頭的干燥母根。這就是把烏頭經(jīng)水浸、加熱使烏頭堿等雙酯型堿水解的炮制原理。 常用吸附劑： （ 1）硅膠 為極性吸附劑。 脫活化 :在吸附劑中加入一定量的水分，降低其活性的過程稱為。（ C.弱堿 ） __。（ 法 ） ___。（ ） TLC顯色劑是 ___。 以親水性溶劑為吸附劑，則被分離成分極性大的被吸附牢固，解吸附就困難，色譜中展開的速度就慢。硅膠顯弱酸性，適用于中性或酸性成分的分離。 3．堿性 烏頭堿、美沙烏頭堿、烏頭次堿等生物堿分子中含一個呈叔胺狀態(tài)的氮原子，因此它們具一般叔胺堿的堿性，能與酸成鹽。其中以烏頭堿和烏頭次堿為主要成分。 了解烏頭中生物堿的提取分離新進(jìn)展。小檗堿和酸結(jié)合成鹽，其鹽類在水中的溶解度見表 15。三顆針中主含小檗堿，小檗堿同時也是毛茛科植物黃連（ Coptis chinensis Franch.）中的主要成份，黃連中小檗堿含量較高但資源有限，工業(yè)生產(chǎn)上提取小檗堿主要以三顆針為原料。 （二）洋金花生物堿的理化性質(zhì) 四 課 堂 互 動 ? 。臨床上用的硫酸阿托品為白色結(jié)晶性粉末，極易溶于水，遇光易變質(zhì)。 C。 學(xué)習(xí)目的