【正文】 ................ 8 不同培養(yǎng)時間下的菌球直徑變化 ............................ 8 不同培養(yǎng)時間下的菌球密度變化 ............................ 9 不同培養(yǎng)時間下的液體培養(yǎng)基 pH 變化 ..................... 10 不同培養(yǎng)時間下的四種胞外酶活性變化 .................... 11 淀粉酶活性變化 ........................................ 11 羧甲基纖維素酶（ CMC 酶）活性變化 ..................... 12 多酚氧化物酶活性變化 ................................. 13 漆酶活性變化 .......................................... 14 4 結論與討論 ............................................... 15 結論 ..................................................... 15 討論 ..................................................... 15 參考文獻 ..................................................... 18 致 謝 ....................................................... 20 河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 1 1 前言 杏鮑菇的分類地位 杏鮑菇 （學名： Pleurotus eryngii），又稱 刺芹菇 、 刺芹側耳 ，是生長于歐洲地中海區(qū)域、中東和北非，但也在亞洲部分地區(qū)生長的食用性菇類。新鮮杏鮑菇粗蛋白含量為 20％ ， 粗脂肪為 ％ ， 粗纖維為 ％，灰分為 ％，礦物質含量較高 [3]， 人體中必需的微量元素鈣、鎂含量是猴頭菇鈣含量 20ug/g 的 倍，姬松茸鈣含量 倍 [4]。目前，食用菌多糖已廣泛應用于免疫性缺陷疾病 、自 身免 疫病和 腫瘤 等疾 病的臨 床治 療及 醫(yī)藥 領域的 其它用途，如制備醫(yī)用透析膜、藥物緩釋劑、血漿代用品及疫苗等 [8]。 二、菌種更純 。 六、操作更簡便 。 國內(nèi) 杏鮑菇液體菌種 研究現(xiàn)狀 我國較 早從 事食 用菌 液體 深層 發(fā)酵 研究 的是 上海 植物生 理研 究所孫美聿等人。 2．液體菌種生產(chǎn)技術要求較高，需要專業(yè)的技術人員管理，才能保證菌種不受污染。據(jù)報道，把杏鮑菇的液體菌種接到固體培養(yǎng)料中 ，由于液體菌種具有流動性，因而接入的菌種可流散在不 同的部 位萌發(fā) 生長 [15]。 試管培養(yǎng)基：采用 PDA 培養(yǎng)基 ， 馬鈴薯 200 克， 葡萄糖 20 克，瓊脂 15 克，自來水 1000 毫升，自然 pH。 二級菌 種的制 備 ： 將一級 菌種 按試驗 要求 接種于 裝有二 級培養(yǎng)基的 250ml 三角瓶中，恒溫振蕩培養(yǎng)，溫度 25℃ 、轉速 120r／ min。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 菌球密度（個）為縱坐標，繪制曲線。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 漆 酶 OD 值 為縱坐標，繪制曲線。 菌球直徑大小反應 了 菌種分裂生長能力 的強弱 。 菌球直徑越小，菌球密度越大，菌種干重越大，則液體菌種流動性越強，越易分散，發(fā)菌點越多，萌發(fā)越快。 這可 能與 杏鮑菇 液體 菌種 消耗有 機氮 源產(chǎn) 生酸 性代謝 廢物有關。在培養(yǎng)初期菌種淀粉酶分泌較少，之后在豐富的多糖誘導下大量分泌淀粉酶。至于第九天又出現(xiàn)上升趨勢，可能與半纖維素有關。菌球溶解后多酚氧化酶被釋放出來，所以 前期活性很低，后期較高。也就是說，在利用液體菌種生 產(chǎn)杏鮑菇的過程中，液體菌種的菌球直徑越小、密度越大、活性越強，則菌種的品質越好，越有利于生產(chǎn)。營養(yǎng)生長，即發(fā)菌養(yǎng)菌階段。他指出，我國雖然從產(chǎn)量和消費上已成為食用菌產(chǎn)業(yè)大國，但由于受小農(nóng)生產(chǎn)方式 和習慣影響，還遠遠不是食用菌強國。 總體來說，中國食用菌產(chǎn)業(yè)缺乏各環(huán)節(jié)的質量評價標準、質量保證和認證等規(guī)范化體系。但一些問題也接踵而至，其一，勞動力的問題。在以往的日子里，她忘我的工作熱情，執(zhí)著的求真精神，給我留下了深刻的印象，從中我深切地體會到了科學要嚴謹、求實的道理。你們在我試驗過程中幫我解開疑問、解決困難，是你們使我在整個試驗過程中充滿動力，感到溫暖，讓我明白了他人幫助和團隊合作的重要性。 本試 驗以 培養(yǎng)時 間為 變量 ，以菌 球直 徑、 菌球 密度、 培養(yǎng)基PH、 四種胞外酶活性為 指標，以期篩選出最佳培養(yǎng)周期，從而為杏鮑菇的標準化、周年化、規(guī)?；?、工廠化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。從市場前景上看，我國的食用菌消費潛力還相當大，我國 13 億人口， 2021 年人均蔬菜年消費量達到 240kg，而人均食用菌年消費量只有 3kg 左右，僅為 1／ 80，潛在消費空間非常大。如食用菌生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境、設施標準，添加劑、殺蟲劑、農(nóng)藥、化肥的使用方法和標準。 從生產(chǎn)銷售總體上看，中國食用菌存在著生產(chǎn)經(jīng)營不規(guī)范、產(chǎn)量大、價格低等問題。 杏鮑菇菌絲的生長發(fā)育包括菌絲的發(fā)菌、生長周期、生長速度、生長勢、抗逆性、菌絲表現(xiàn)等。所以總的來講：杏鮑菇四種胞外酶活性在第六天最大，菌種活性最強。 多酚氧化 酶 在培養(yǎng)前期分泌較少，活性較低。 河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 13 上述變化可能與培養(yǎng)基內(nèi)纖維素有關。第八天以 后淀粉酶活性逐漸下降。 由圖 3 可知： 培養(yǎng)基 pH 變化曲線呈緩慢下降趨勢。 由圖 2 可知： 液體菌種菌球密度變化曲線呈拋物線型：隨培養(yǎng)時間的延長菌球密度逐漸增加，在第 35 天呈指數(shù)型增加，在第六天達到最大，每毫升最多有 128 個。 試驗結果見圖 1。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 多酚氧化物酶 OD 值為縱坐標，繪制曲線。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 菌球直徑（ mm）為縱河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 7 坐標，繪制曲線。取 左右的母種菌塊接種于裝有 150ml 一級培養(yǎng)基的 250ml 三角瓶中，每瓶 3 塊， 25℃ 下靜置 2 天，然后在溫度 25℃ 、轉速150r/min，振蕩培養(yǎng) 5 天 [17]。 實驗用具 80 目篩網(wǎng)，電磁爐， 250ml 三角瓶，試管，燒杯，吸管，培養(yǎng)皿，玻璃棒，量筒，溫度計，試管架， 100ml 容量瓶， 500ml 容量瓶，比色皿等。生產(chǎn)的液體菌種可以用作栽培用的母種或原種，也可直接作栽 培種。 杏鮑菇液體菌種 生產(chǎn)中 存在的問題 液體菌種雖然在栽培上 具有許多優(yōu)點，但目前仍不能 取代固體菌種推廣使用，原因主要有以下 幾 方面 [14]： 1．生產(chǎn)液體菌種的投入比較大。 1948 年美國科學家 Humfeld 等成功地對蘑菇進行了液體深層培養(yǎng)，從而揭開了人類進行食用菌液體培養(yǎng)和液體菌種研究的序幕，并很快使歐美國家蘑菇生產(chǎn)在五、六十年代快步進入了液體菌種和工業(yè)化栽培時代 [9]。 五、污染更少 。液體 菌種具 有固體菌 種不可比擬的優(yōu)勢： 一、 工藝更簡便 ?，F(xiàn)代醫(yī)學研杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 2 究發(fā)現(xiàn)，食用菌中能顯著增強癌癥患者抵抗力的生理活性物質即為食用菌多糖。 杏鮑菇營養(yǎng)豐富，質地脆嫩，口感絕佳，風味獨特，故有 “ 草原上的美味牛肝菌 ” 之美稱。 liquid culture。綜上所述， 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期為 六 天。 河 南 科 技 大 學 畢 業(yè) 設 計 (論 文 ) 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 畢 業(yè) 設 計（ 論 文 ）任 務 書 （指導教師填表） 填表時間： 2021 年 3 月 5 日 學生姓名 專 業(yè) 班 級 園藝 093 指 導 教 師 課 題 類 型 論文 設計（論文）題目 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 主要研 究內(nèi)容 1．不同培養(yǎng)時間 對杏鮑 菇液體 菌種 生長 性狀 的 影響 ： 包括菌球直徑，菌球密度，培養(yǎng)基 pH。 結果顯 示： 菌球 直徑 先變 小后 增大 ，第 六天 達到 最小， 最小 為；菌 球密 度 先 變大 后變 小， 在第 六天 達到 最大 ， 最 大為 128個 /ml；培養(yǎng)基 pH 一直變??；淀粉酶活性在 前三 天內(nèi)活性很低， 第四4 天迅速增大， 第六天達到最大，最大為 ， 隨后逐漸下降；羧甲基纖維素酶 在前四天內(nèi) 活性很低，到第五天迅速增大，第六天達到最大， 最大為 ， 之后又迅速下降；多酚氧化酶活性在前五天內(nèi)逐漸 上升，第七天達到最大， 最大為 ， 而后又下降；漆酶活性在前六天內(nèi)逐漸增加，第六天達到最大， 最大為 ， 而后迅速下降，第七天以后漆酶的活性一直處于較低水平。 laccase activity gradually increased the previous six days, the sixth day maximum, the