【正文】 03 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values0 0 圖 6 杏鮑菇多酚氧化酶活性變化曲線 Figure 6 Pleurotus eryngii polyphenol oxidase activity curve 由圖 6 可知： 杏鮑菇多酚氧化酶活性變化曲線呈 S 型。 通過對菌球直徑的測定得出第 六天菌球直徑最小 ，最小為 ；通過對菌球密度的測定得出第六天菌球密度最大 ，最大為 128 個 /ml；通過對培養(yǎng)基 pH 的測定得出前七天內(nèi)較適合菌種生長；通過對四種胞外酶活性的測定得出第六天酶活性 均 較高。我國生產(chǎn)食用菌使用的品種絕大多數(shù)是未經(jīng)審定、認定或登記的，導致穩(wěn)定性和一致性差，質(zhì)量參差不齊。綜合上述因素，再加上杏鮑菇市場價格普遍偏高的利益誘惑，廣大菇農(nóng)對杏鮑菇規(guī)?；⒐S化生產(chǎn)工藝創(chuàng)新提出了新的要求，他們急需一種容易掌握、操作方便、培養(yǎng)周期短、適宜大規(guī)模工廠化管理、生產(chǎn)的杏鮑菇栽培方式來取代現(xiàn)有的傳統(tǒng)栽培方式。 感謝在我實驗過程中給過我 極大 幫助的 候軍老師、 劉保國老師等。許多發(fā)達國家已經(jīng)形成了杏鮑菇的工廠化、周年化生產(chǎn)。對培養(yǎng)過程中各指標的變化情況分析如下：在培養(yǎng)前 3 天內(nèi)有少量新生菌球形成，為原轉(zhuǎn)接的菌球脫落體；培養(yǎng) 4 天，新生菌球增多，菌球邊緣有大量絨毛狀菌絲形成；第 6 天新生小菌球大量增加，是由于振蕩使大量絨毛狀菌絲脫落形成，所以數(shù)目急劇增多，菌球直徑達到最小；第 8 天菌球數(shù)目減少，可能是由于一些小菌球聚合成大的菌絲體，所以直徑變大； 9 天之后由于菌球開始老化自溶。 03 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values 圖 7 杏鮑菇漆酶活性變化曲線 Figure 7 Pleurotus eryngii laccase activity curve 由圖 7 可知： 杏鮑菇漆酶活性呈倒 V 型。 羧甲基纖維素酶（ CMC 酶）活性 變化 從液體菌種培養(yǎng)第三天起每天上午用分光光度計 在 520nm 處 測定羧甲基纖維素酶活性，以 OD 值表示 ，試驗結果見圖 5。 隨著培養(yǎng)時間的延長，由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗和代謝廢物的增多，使得菌種競爭加劇，生長環(huán)境變惡劣，培養(yǎng)基越來越不適合菌種的生長，菌種生長逐漸變?nèi)跎踔镣Ｖ?。（設置三個重復）。但是一定要注意， 3， 5二硝基水楊酸和 NaOH 的加入時間一定要很近，或者是先加入 NaOH。 液體菌種培養(yǎng)時間短則菌種活力不足，培養(yǎng)時間 長則菌種老化，所以確定適宜的培養(yǎng)周期非常關鍵。自 80 年代至 20 世紀來，我國許多科研院所的專家教授前輩開始對食用菌深層發(fā)酵、液體菌種及中小型發(fā)酵設備進行了反復、深入和刻苦的研究 ， 為今天我國液體菌種的社會化推廣應用，不論在發(fā)酵設備、工藝技術還是在栽培應用 上，都提供了寶 貴的經(jīng) 驗，奠 定了堅實 的基礎 [10]。 河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 3 三、周期更短 。 已測 17 種 氨基 酸 總量 為％。 amylase activity is very low in the first three days, four days increases rapidly fourth, sixth day maximum, the maximum is , then decreased gradually。 進度計劃 ～ 查找相關資料，進行試驗方法設計、儀器藥品的準備 ； ～ 進行杏鮑菇液體培養(yǎng)， 獲得可靠、詳實的試驗數(shù)據(jù)； ～ 結果統(tǒng)計分析，完成論文，進行畢業(yè)論文答辯。在分類學上杏鮑菇隸屬于真菌界，擔子菌門，傘菌綱，無隔擔子菌亞綱，傘菌目，側(cè)耳科，側(cè)耳屬 [1]。 杏鮑菇的經(jīng)濟價值 杏鮑菇在國內(nèi)開發(fā)生產(chǎn)時間較 晚 ，但 發(fā)展速度很快 ，由于栽培技術難度較小、產(chǎn)量較高等原因，常規(guī)生產(chǎn)的杏鮑菇市場價格一直偏低，一般均在每千克 46 元，超市售價一般為每千克 810 元；夏季反季節(jié)栽培的產(chǎn)品，一般在每千克 10 元左右，最高曾達 18 元，而且貨源很少。 液體菌種整個生產(chǎn)過程都是在一個罐體內(nèi)完成，按鍵操作，既成倍降低了生產(chǎn)、管理費用，又節(jié)省人工，輕松制種。一些小型食用菌生產(chǎn)廠家和一般菇農(nóng)很難生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的液體菌種應用于生產(chǎn)。配制方法：現(xiàn)將馬鈴薯洗凈去皮， 再稱取 200g 馬鈴薯切成小塊， 加水煮爛。 淀粉酶活性的測定 在試管加入 %可溶性淀粉溶液（ 、 沖液） ，再加入稀釋 10 倍粗酶液 ，混勻，于 38℃ 水浴保溫 30min，取出后立即加入 DNS 試劑 ，煮沸 5min 后取出，冷卻后加入蒸餾水 ，混勻，測 520nm 處 OD 值，以煮沸滅活 15min的酶液作對照 [ 20]（設置三個重復）。菌球直徑越小說明液體菌種流動性越強，菌種生長越迅速。但當培養(yǎng)基 pH 在 以下時菌種開始生長不良。杏鮑菇優(yōu)先分解利用纖維素，纖維素消耗完后開始分解利用半纖維素。本實驗結果：菌球直徑在第六天最??；菌球密度在第六天最大。這主要表現(xiàn)在生產(chǎn)各環(huán)節(jié)的不規(guī)范，從而導致產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定甚至低下。我們 正處在一個特定的發(fā)展時期，農(nóng)村勞動力 需要大量轉(zhuǎn)移而 傳統(tǒng)的杏鮑菇栽培方式需要大量的勞動力。 感謝給我?guī)椭膶W姐學長呂恒、趙喬明等，還要感謝跟我一起實驗的趙鋒、盧慧兵同學。在食用菌的國際貿(mào)易中，我國的貿(mào)易量占到亞洲的 80％，占到全球的 40％。而液體菌種不同培養(yǎng)期對菌種各項指標影響巨大，探討最佳培養(yǎng)周期無疑具有巨大意義。本實驗結果：淀粉酶活性在第 57 天內(nèi)達到最大；羧甲基纖維素酶活性在第六天達到最大；多酚氧化酶活性在 68 天內(nèi)很大；漆酶在第六天內(nèi)達到最大。但在第九天又出現(xiàn)回升趨勢。所測結果 見圖 3。 3 結果與分析 不同培養(yǎng)時間下的菌球直徑變化 從液體菌種培養(yǎng)第三天起每天上午在超凈工作臺上吸取 1ml 培養(yǎng)液放入培養(yǎng)皿中，取 20 個 菌球排成一列，測總長度，然后計算單個菌球直徑 [21]。 測定方法 菌球直徑的 測定 取 lml 培養(yǎng)液放入培養(yǎng)皿中，按 lml培養(yǎng)液含菌球大小的數(shù)量比，取 20 個菌球在培養(yǎng)皿中排成一列，測總長度，然后計算單個菌球直徑，取 3 次求平均值 [19]。 所需藥品 葡萄糖，蛋白胨，磷酸二氫鉀，硫酸鎂，維生素 b，蒸餾水 , 醋酸，醋酸鈉，羧甲基纖維素鈉，可溶性淀粉，酒石酸鉀鈉， 3， 5二硝基水楊酸，苯酚，氫氧化鈉，磷酸氫鉀，鄰聯(lián)甲苯胺 ，鄰苯二酚等。雖然有資料表示液體菌種在 04℃ 保存2— 3 個月仍可作菌種，但也有試驗顯示液體菌種 04℃ 保存超過 3天，菌種的生活力就有所下降，萌發(fā)慢，菌袋易污染。 用液體菌種無論是生產(chǎn)栽培種還是栽培袋，其菌種成本就 2－ 3 分錢。 杏鮑菇的藥用價值 杏鮑菇中含有豐富的多糖物質(zhì)，多糖又稱多聚糖，是由 單糖縮合成的多聚物，廣泛存在于高等植物、動物和微生物中 [5]。 laccase activity gradually increased the previous six days, the sixth day maximum, the maximum is , then decreased rapidly, the seventh day after the laccase activity has been at a low level. In summary, Optimal Pleurotus eryngii liquid bacteria culture period is six days. KEY WORDS: eryngii。 河 南 科 技 大 學 畢 業(yè) 設 計 (論 文 ) 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 畢 業(yè) 設 計（ 論 文 ）任 務 書 （指導教師填表） 填表時間： 2021 年 3 月 5 日 學生姓名 專 業(yè) 班 級 園藝 093 指 導 教 師 課 題 類 型 論文 設計（論文）題目 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 主要研 究內(nèi)容 1．不同培養(yǎng)時間 對杏鮑 菇液體 菌種 生長 性狀 的 影響 ： 包括菌球直徑，菌球密度，培養(yǎng)基 pH。 liquid culture。現(xiàn)代醫(yī)學研杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 2 究發(fā)現(xiàn)，食用菌中能顯著增強癌癥患者抵抗力的生理活性物質(zhì)即為食用菌多糖。 五、污染更少 。 杏鮑菇液體菌種 生產(chǎn)中 存在的問題 液體菌種雖然在栽培上 具有許多優(yōu)點，但目前仍不能 取代固體菌種推廣使用，原因主要有以下 幾 方面 [14]： 1．生產(chǎn)液體菌種的投入比較大。 實驗用具 80 目篩網(wǎng)，電磁爐， 250ml 三角瓶，試管，燒杯，吸管，培養(yǎng)皿，玻璃棒，量筒，溫度計，試管架， 100ml 容量瓶， 500ml 容量瓶，比色皿等。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 菌球直徑（ mm）為縱河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 7 坐標，繪制曲線。 試驗結果見圖 1。 由圖 3 可知： 培養(yǎng)基 pH 變化曲線呈緩慢下降趨勢。 河南科技大學畢業(yè)