微生物學(xué)實驗總結(jié)大全-免費(fèi)閱讀
【正文】 抗酸染色法（1）、正確回答抗酸染色的各個步驟（包括用加熱法或不加熱法 初染的時間）。細(xì)菌的劃線分離培養(yǎng)技術(shù)（1）、將細(xì)菌分區(qū)劃線到普通瓊脂平碟上?？己藭r間：每人限6分鐘內(nèi)完成。(3)次生代謝產(chǎn)物的大量積累在哪個時期？根據(jù)細(xì)菌生長繁殖的規(guī)律，采用哪些措施可使次生代謝產(chǎn)物積累更多？評論這張第三篇：微生物學(xué)實驗總結(jié)“O”試驗（ASO test）：鏈球菌侵入體內(nèi)產(chǎn)生SLO，刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體ASO，當(dāng)兩者中和后，再加入SLO 乳膠試劑，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗體與乳膠試劑反應(yīng)，產(chǎn)生清晰凝集，為陽性；無凝集，為陰性。從早取出的培養(yǎng)液開始依次測定，對細(xì)胞密度大的培養(yǎng)液用LB液體培養(yǎng)基適當(dāng)稀釋后測定，~(測定OD值前，將待測定的培養(yǎng)液振蕩，使細(xì)胞均勻分布)。如圖15—6所示，只要接種1支試管或1個帶測定管的三角瓶，在不同的培養(yǎng)時間(橫坐標(biāo))取樣測定，以測得的klett units為縱坐標(biāo)，便可很方便地繪制出細(xì)菌的生長曲線。(二)基本原理大多數(shù)細(xì)菌的繁殖速率很快，在合適的條件下，一定時期的大腸桿菌細(xì)胞每20min分裂一次。（3）測OD值 將1至7號不同濃度的菌懸液搖均勻后于560nm波長、1cm比色皿中測定OD值。但是，由于光密度或透光度除了受菌體濃度影響之外，還受細(xì)胞大小、形態(tài)、培養(yǎng)液成分以及所采用的光波長等因素的影響。2．學(xué)習(xí)、掌握光電比濁計數(shù)法的操作方法。由1010106三個稀釋度計算出的每毫升菌液中菌落形成單位數(shù)也不應(yīng)相差太大。的稀釋菌懸液各lmL，對號放入編好號的無菌平皿中。將多余的菌液放回原菌液中。平板菌落計數(shù)法雖然操作較繁，結(jié)果需要培養(yǎng)一段時間才能取得，而且測定結(jié)果易受多種因素的影響，但是，由于該計數(shù)方法的最大優(yōu)點是可以獲得活菌的信息，所以被廣泛用于生物制品檢驗(如活菌制劑)，以及食品、飲料和水(包括水源水)等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測。A表示五個中方格中的總菌數(shù)；B表示菌液稀釋倍數(shù)。每個計數(shù)室選5個中格(可選4個角和中央的一個中格)中的菌體進(jìn)行計數(shù)。2．鏡檢計數(shù)室在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進(jìn)行鏡檢。血細(xì)胞計數(shù)板構(gòu)造如圖l51。除了用這些計菌器外，還有在顯微鏡下直接觀察涂片面積與視野面積之比的估算法，此法一般用于牛乳的細(xì)菌學(xué)檢查。測定細(xì)胞物質(zhì)的方法有細(xì)胞干重的測定，細(xì)胞某種成分如氮的含量、RNA和DNA的含量測定，代謝產(chǎn)物的測定等。另外實驗中其他操作，比如稱量準(zhǔn)確性，移液管的使用都很重要，所以操作要十分規(guī)范。其中，做實驗的過程中，我認(rèn)為以下的幾點對于我未來的學(xué)習(xí)和科研具有重大意義：嚴(yán)格的無菌操作，在微生物實驗中，由于空氣和環(huán)境中存在大量的微生物，所以很可能造成培養(yǎng)基的污染，影響最終的實驗結(jié)果，所以實驗中，無菌操作尤為重要。試著通過自己現(xiàn)有的知識，多想，多做，多總結(jié)，我想首先是作為一個求知者在追求知識的道路上必須堅守的原則，其次就是要敢于突破，我們都站在巨人的肩膀上，踮起腳尖即使觸不到天空，也可以更加拓寬自己的視野。一學(xué)期的時間雖短，但老師的諄諄教誨、同學(xué)們的良好配合和嚴(yán)格的實驗操作，都將為微生物學(xué)實驗課程畫上一個完美的句號。做實驗絕對不能人云亦云，要有自己的看法，這樣就要有充分的準(zhǔn)備，若是做了也不知道是個什么實驗，那么做了也是白做。如果動手能力太弱，所學(xué)習(xí)到的知識就無法通過有效的方式真正組織起來，那么學(xué)到的知識就只是輸入而沒有輸出，只有理論而沒有實踐，對于這樣一門學(xué)科，這樣的缺陷是致命的，而這樣的能力是必須具備的。無菌操作往往能決定著一個實驗的成敗，學(xué)會無菌操作尤為重要。本學(xué)期的實驗讓我最感動是我們一個小組四名成員的精妙配合，造就了這學(xué)期的良好的微生物學(xué)實驗的結(jié)果總之，這學(xué)期的實驗給我留下了深刻的印象，在最后，謝謝老師一學(xué)期的辛苦付出，為我未來的微生物學(xué)的學(xué)習(xí)和科研打好了良好的基礎(chǔ)。（二）基本原理顯微鏡直接計數(shù)法是將小量待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計菌器)，于顯微鏡下直接計數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。另外兩種計菌器的使用方法可參看各廠商的說明書。B（個）同理，如果是16個中方格的計數(shù)板，1mL菌液中的總菌數(shù)=A/516104B=32000A調(diào)節(jié)顯微鏡光線的強(qiáng)弱適當(dāng)，對于用反光鏡采光的顯微鏡還要注意光線不要偏向一邊，否則視野中不易舌清楚計數(shù)室方格線，或只見豎線或只見橫線。鏡檢，觀察每小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。但是，由于待測樣品往往不易完全分散成單個細(xì)胞，所以，長成的一個單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個細(xì)胞。(稀釋度)各3套?！溆嘁来晤愅?，整個過程如圖153所示。5．計數(shù)培養(yǎng)48h后，取出培養(yǎng)平板，算出同一稀釋度三個平板上的菌落平均數(shù)，并按下列公式進(jìn)行計算，每毫升中菌落形成單位(cfu)=同一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)5一般選擇每個平板上長有30~300個菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。，如果過少菌液不易涂布開，過多則在涂布完后或在培養(yǎng)時菌液仍會在平板表面流動，不易形成單菌落。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時，菌體計數(shù)可采用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)，平板菌落計數(shù)或細(xì)胞干重測定等方法。（四）操作步驟1．標(biāo)準(zhǔn)曲線制作（1）編號 取無菌試管7支，分別用記號筆將試管編號為7。3．根據(jù)所測得的光密度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得每毫升的含菌數(shù)。用于測定細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量的方法已在上述實驗作了介紹。2．接種(培養(yǎng)10~12h)轉(zhuǎn)入盛有
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