微生物學(xué)實驗總結(jié)大全-閱讀頁
2024-10-29 04:15本頁面
【正文】 用價值?(3)本實驗為什么采用560nm波長測定酵母菌懸液的光密度?如果你在實驗中需要測定大腸桿菌生長的OD值，你將如何選擇波長?四 大腸桿菌生長曲線的測定(一)目的要求1．通過細菌數(shù)量的測量了解大腸桿菌的生物特征和規(guī)律，繪制生長線。(二)基本原理大多數(shù)細菌的繁殖速率很快，在合適的條件下，一定時期的大腸桿菌細胞每20min分裂一次。以培養(yǎng)時間為橫坐標，以細菌數(shù)目的對數(shù)或生長速率為縱坐標作圖所繪制的曲線稱為該細菌的生長曲線。測定細菌的生長曲線，了解其生長繁殖規(guī)律，這對人們根據(jù)不同的需要，有效地利用和控制細菌的生長具有重要意義。本實驗用分光光度計(spectrophotometer)進行光電比濁測定不同培養(yǎng)時間細菌懸浮液的OD值，繪制生長曲線。如圖15—6所示，只要接種1支試管或1個帶測定管的三角瓶，在不同的培養(yǎng)時間(橫坐標)取樣測定，以測得的klett units為縱坐標，便可很方便地繪制出細菌的生長曲線。圖15—5 帶側(cè)臂試管的三角燒瓶(三)器材1．菌種 大腸桿菌2．培養(yǎng)基 LB液體培養(yǎng)基70ml，分裝2支大試管(5ml/支)，剩余60ml裝入250ml的三角瓶。圖15—6 直接用試管測OD值(四)操作步驟1．標記取11支無菌大試管，用記號筆分別標明培養(yǎng)時間，即0、1116和20h。3．培養(yǎng)將已接種的試管置搖床37℃振蕩培養(yǎng)(振蕩頻率250r/min)，分別培養(yǎng)0、1116和20h，將標有相應(yīng)時間的試管取出，立即放冰箱中貯存，最后一同比濁測定其光密度值。從早取出的培養(yǎng)液開始依次測定，對細胞密度大的培養(yǎng)液用LB液體培養(yǎng)基適當稀釋后測定，~(測定OD值前，將待測定的培養(yǎng)液振蕩，使細胞均勻分布)。測定完畢后，取出試管置37℃繼續(xù)振蕩培養(yǎng)。該方法準確度高、操作簡便。(五)實驗報告1．結(jié)果(1)將測定的OD600值填入下表：培養(yǎng)時間對照 0 3 4 6 8 10 12 14 16 20光密度值OD600(2)繪制大腸桿菌的生長曲線。(3)次生代謝產(chǎn)物的大量積累在哪個時期？根據(jù)細菌生長繁殖的規(guī)律，采用哪些措施可使次生代謝產(chǎn)物積累更多？評論這張第三篇：微生物學(xué)實驗總結(jié)“O”試驗（ASO test）：鏈球菌侵入體內(nèi)產(chǎn)生SLO，刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體ASO，當兩者中和后，再加入SLO 乳膠試劑，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗體與乳膠試劑反應(yīng)，產(chǎn)生清晰凝集，為陽性；無凝集，為陰性。用途：輔助診斷傷寒，副傷寒結(jié)果：考慮正常人群抗體水平動態(tài)觀察：恢復(fù)期效價增加≥4倍OIgM,出現(xiàn)早，維持時間短，特異性差HIgG,出現(xiàn)遲，維持時間長，特異性強O高H高腸熱癥可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染O低H高預(yù)防接種或曾患過傷寒(acidfast stain)：以5％石炭酸復(fù)紅加溫染色，再用3％鹽酸酒精脫色，然后用美藍復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色(+)，其他細菌和背景物質(zhì)為藍色()。結(jié)核菌素試驗陰性者應(yīng)接種或補種卡介苗②作為嬰幼兒(尚未接種過卡介苗者)結(jié)核病的輔助診斷③在未接種卡介苗的人群中作結(jié)核桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查,了解人群自然感染率④測定腫瘤患者的細胞免疫功能：變形桿菌代替相應(yīng)的立克次體抗原進行非特異性凝集反應(yīng)，檢測人類或動物血清中有無相應(yīng)的抗體本質(zhì)：交叉凝集試驗，立克次體病的輔助診斷：制片→涂片→干燥→固定→染色初染（結(jié)晶紫1min）→媒染（碘液1min）→（95%酒精 30sec）→復(fù)染（稀釋復(fù)紅30sec）→印干→油鏡鏡檢第四篇：微生物學(xué)實驗考試題《微生物學(xué)實驗》試題在進行高壓蒸汽滅菌時，是否只要滅菌鍋壓力表到達所需的值時鍋內(nèi)就能獲得所需的滅菌溫度？為什么？在手提式高壓滅菌鍋的蓋上有哪些部件？它們各起什么作用？高壓蒸汽滅菌鍋的操作有哪幾個步驟？每一步驟應(yīng)注意哪些問題？在微生物學(xué)實驗中，常用于配制固體培養(yǎng)基的凝固劑是什么？它有哪些特性？如何使用？環(huán)境樣品梯度稀釋、涂布平板法分離微生物時，如何選擇不同稀釋梯度樣品的涂布順序？為什么？在革蘭氏染色實驗中，為什么會出現(xiàn)假陽性和假陰性？如何避免？在革蘭氏染色實驗中，不經(jīng)復(fù)染這一步，能否區(qū)別革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌？為什么？為何用計數(shù)板可以計得樣品中的總菌值？如何計算樣品中的菌體濃度？血球計數(shù)板計數(shù)時，計數(shù)室內(nèi)如有氣泡會對結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？如何避免產(chǎn)生氣泡？試分析血球計數(shù)板計數(shù)法的誤差來源，并提出減少誤差的方法和措施。第五篇：微生物學(xué)實驗考核辦法本科微生物學(xué)實驗考核辦法考核方式：按學(xué)號順序逐一進場應(yīng)考?？己藭r間：每人限6分鐘內(nèi)完成。（2）、掌握顯微鏡（油鏡）保護方法血清對倍稀釋法（1）、用生理鹽水將血清進行對倍稀釋，終濃度達到1/ 1/ 1 /8三個稀釋度。玻片凝集試驗（1）、要求用傷寒診斷血清，采用玻片凝集試驗的方法檢測待檢細菌是否為傷寒桿菌。（3）、無菌操作正確。細菌的劃線分離培養(yǎng)技術(shù)（1）、將細菌分區(qū)劃線到普通瓊脂平碟上。（3）、無菌操作正確。（2）、要求各環(huán)節(jié)無菌操作正確。（2）、正確描述液體培養(yǎng)基中的細菌生長情況?？顾崛旧ǎ?）、正確回答抗酸染色的各個步驟（包括用加熱法或不加熱法 初染的時間）。注：經(jīng)一次考核不及格者，可在全班同學(xué)考核結(jié)束后，允許補考一次。
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