微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)大全-全文預(yù)覽
【正文】 板表面流動(dòng)，不易形成單菌落。平板菌落計(jì)數(shù)法，所選擇倒平板的稀釋度是很重要的。5．計(jì)數(shù)培養(yǎng)48h后，取出培養(yǎng)平板，算出同一稀釋度三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)，并按下列公式進(jìn)行計(jì)算，每毫升中菌落形成單位(cfu)=同一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)5一般選擇每個(gè)平板上長有30~300個(gè)菌落的稀釋度計(jì)算每毫升的含菌量較為合適。，這樣容易加大同一稀釋度幾個(gè)重復(fù)平板間的操作誤差。……其余依次類推，整個(gè)過程如圖153所示。OptionsEmail Replies將101試管置試管振蕩器上振蕩，使菌液充分混勻。(稀釋度)各3套。（三）器材1．菌種 大腸桿菌菌懸液。但是，由于待測樣品往往不易完全分散成單個(gè)細(xì)胞，所以，長成的一個(gè)單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個(gè)細(xì)胞。各中格中菌數(shù)AB二室平均值菌數(shù)/ml12345第一室第二室2．思考題(1)根據(jù)你的體會(huì)，說明用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的誤差主要來自哪些方面?應(yīng)如何盡量減少誤差．力求準(zhǔn)確?(2)某單位要求知道一種干酵母粉中的活菌存活率，請?jiān)O(shè)計(jì)1～2種可行的檢測方法。鏡檢，觀察每小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。位于格線上的菌體一般只數(shù)上方和右邊線上的。調(diào)節(jié)顯微鏡光線的強(qiáng)弱適當(dāng)，對于用反光鏡采光的顯微鏡還要注意光線不要偏向一邊，否則視野中不易舌清楚計(jì)數(shù)室方格線，或只見豎線或只見橫線。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。B（個(gè)）同理，如果是16個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板，1mL菌液中的總菌數(shù)=A/516104B=32000A計(jì)數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個(gè)大方格分成25個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格(圖15—2)；另一種是一個(gè)大方格分成16個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成25個(gè)小方格，但無論是哪一種規(guī)格的計(jì)數(shù)板，每一個(gè)大方格中的小方格都是400個(gè)。另外兩種計(jì)菌器的使用方法可參看各廠商的說明書。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)是直觀、快速、操作簡單。（二）基本原理顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將小量待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計(jì)菌器)，于顯微鏡下直接計(jì)數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。總之，測定微生物生長量的方法很多，各有優(yōu)缺點(diǎn)，工作中應(yīng)根據(jù)具體情況要求加以選擇。本學(xué)期的實(shí)驗(yàn)讓我最感動(dòng)是我們一個(gè)小組四名成員的精妙配合，造就了這學(xué)期的良好的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果總之，這學(xué)期的實(shí)驗(yàn)給我留下了深刻的印象，在最后，謝謝老師一學(xué)期的辛苦付出，為我未來的微生物學(xué)的學(xué)習(xí)和科研打好了良好的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)中的部分思想對未來的科研工作尤為重要，比如每一步都要設(shè)立空白對照組，在實(shí)驗(yàn)結(jié)果中做出比較討論，這在未來的自我進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，這種思想的培養(yǎng)尤為重要。無菌操作往往能決定著一個(gè)實(shí)驗(yàn)的成敗，學(xué)會(huì)無菌操作尤為重要。各種實(shí)驗(yàn)用具要嚴(yán)格高溫滅菌，防止用具本身污染。如果動(dòng)手能力太弱，所學(xué)習(xí)到的知識就無法通過有效的方式真正組織起來，那么學(xué)到的知識就只是輸入而沒有輸出，只有理論而沒有實(shí)踐，對于這樣一門學(xué)科，這樣的缺陷是致命的，而這樣的能力是必須具備的。現(xiàn)代信息技術(shù)的使用能力在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)中，有很多特殊的、特定的實(shí)驗(yàn)，如有毒有害物質(zhì)參與且不易排污的實(shí)驗(yàn)、不易操作或難以成功的實(shí)驗(yàn)、需要反復(fù)觀察的實(shí)驗(yàn)、反應(yīng)慢導(dǎo)致單位課時(shí)中難以完成的實(shí)驗(yàn)等。做實(shí)驗(yàn)絕對不能人云亦云，要有自己的看法，這樣就要有充分的準(zhǔn)備，若是做了也不知道是個(gè)什么實(shí)驗(yàn)，那么做了也是白做。眾所周知，微生物學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)與理論高度結(jié)合的科目，是一門以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)與生活生產(chǎn)息息相關(guān)的課程。一學(xué)期的時(shí)間雖短，但老師的諄諄教誨、同學(xué)們的良好配合和嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)操作，都將為微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程畫上一個(gè)完美的句號。當(dāng)在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)與預(yù)料過程所不符，那么必定是過程中出現(xiàn)錯(cuò)誤，而尋找并解決的這個(gè)過程是書本中無法給予的。試著通過自己現(xiàn)有的知識，多想，多做，多總結(jié)，我想首先是作為一個(gè)求知者在追求知識的道路上必須堅(jiān)守的原則，其次就是要敢于突破，我們都站在巨人的肩膀上，踮起腳尖即使觸不到天空，也可以更加拓寬自己的視野。尤其是微生物學(xué)這樣一種學(xué)科，動(dòng)手能力的強(qiáng)弱與知識的掌握其實(shí)是同等重要的。其中，做實(shí)驗(yàn)的過程中，我認(rèn)為以下的幾點(diǎn)對于我未來的學(xué)習(xí)和科研具有重大意義：嚴(yán)格的無菌操作，在微生物實(shí)驗(yàn)中，由于空氣和環(huán)境中存在大量的微生物，所以很可能造成培養(yǎng)基的污染，影響最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，所以實(shí)驗(yàn)中，無菌操作尤為重要。使用超凈工作臺時(shí)要嚴(yán)格紫外滅菌和打開排風(fēng)扇，手和相關(guān)器材進(jìn)入操作臺前要用酒精仔細(xì)擦拭，清除表面的微生物。另外實(shí)驗(yàn)中其他操作，比如稱量準(zhǔn)確性，移液管的使用都很重要，所以操作要十分規(guī)范。與實(shí)驗(yàn)操作相比，本學(xué)期的微生物學(xué)另一個(gè)重要的是學(xué)會(huì)團(tuán)隊(duì)的重要性，每個(gè)實(shí)驗(yàn)憑借一己之力是無法完成的，而一個(gè)團(tuán)隊(duì)就可以游刃有余。測定細(xì)胞物質(zhì)的方法有細(xì)胞干重的測定，細(xì)胞某種成分如氮的含量、RNA和DNA的含量測定，代謝產(chǎn)物的測定等。2．掌握使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法。除了用這些計(jì)菌器外，還有在顯微鏡下直接觀察涂片面積與視野面積之比的估算法，此法一般用于牛乳的細(xì)菌學(xué)檢查。本實(shí)驗(yàn)以血球計(jì)數(shù)板為例進(jìn)行顯微鏡直接計(jì)數(shù)。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板構(gòu)造如圖l51。設(shè)五個(gè)中方格中的總菌數(shù)為A，菌液稀釋倍數(shù)為B，如果是25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板，則1mL菌液中的總菌數(shù)=A/525104B=50000A2．鏡檢計(jì)數(shù)室在加樣前，先對計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。4．顯微鏡計(jì)數(shù)加樣后靜止5min，然后將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板置于顯微鏡
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