【正文】 (2) P 是磷脂的主要成分。但在少量研究上盡量用蒸餾水，以防成分的變化引起不良效果。因此，沒有一種培養(yǎng)基能夠適合一切類型的植物組織或器官，在建立一項(xiàng)新的培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí)，首先必須找到一合適的培養(yǎng)基，培養(yǎng)才有可能成功。也可用于分離微莖尖的幼葉，可以自制。鑷子太長，使用起來不靈活。用于配制培養(yǎng)基時(shí)吸取不同種類的母液。為了增加通氣性，可在里面襯一層硫酸紙或牛皮紙。塑料容器具有質(zhì)輕、透明、不易破碎、成本低等優(yōu)點(diǎn)，如培養(yǎng)容器多為平底方盒形，可提高培養(yǎng)空間利用率的植株數(shù)，并能一層層地疊摞起來，從而節(jié)約空間。培養(yǎng)皿常用12cm直徑等規(guī)格，要求上、下能密切吻合。1離心機(jī)，用于收集原生質(zhì)體，轉(zhuǎn)速要求較低。磁力攪拌器還可加熱，使之更利于溶解。10．顯微鏡及解剖鏡，種類較多，用于分離微莖尖可采用雙筒實(shí)體解剖鏡。用于干燥需保持80～100℃；進(jìn)行干熱滅菌需保持150℃，達(dá)1～3h；若測定干物重，則溫度應(yīng)控制在80℃烘干至完全干燥為止。接種箱依靠密閉、藥劑熏蒸和紫外燈照射來保證內(nèi)部空間無菌。二、儀器設(shè)備和器皿用具（一）儀器設(shè)備（見實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)）1．超凈臺，優(yōu)點(diǎn)是操作方便自如，比較舒適，工作效率高，準(zhǔn)備時(shí)間短。由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度，最好不同種類有不同的培養(yǎng)室。 培養(yǎng)室是將接種的材料進(jìn)行培養(yǎng)生長的場所。接種室要求干爽安靜，清潔明亮。洗滌室專門負(fù)責(zé)試管苗出瓶與培養(yǎng)器皿的清洗工作；配置室則負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的配制、分裝、包扎和高壓滅菌等工作。室內(nèi)應(yīng)配備大型水槽，最好是白瓷水槽。三、影響單細(xì)胞培養(yǎng)的因子1．條件培養(yǎng)基條件培養(yǎng)基可有利于單細(xì)胞的生長與分裂2．細(xì)胞密度臨界密度：單細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，初始植板密度低于某值培養(yǎng)細(xì)胞就不能進(jìn)行分裂和發(fā)育成細(xì)胞團(tuán)，則該值就是臨界密度。若懸浮液與培養(yǎng)基以1:4混合，則應(yīng)把懸浮液的細(xì)胞密度調(diào)到 510 179。該方法是Bergmann(1960年)首創(chuàng)。此法簡便易行，效果好，易于成功?？烧T導(dǎo)形成單細(xì)胞培養(yǎng)系。 外植體(explant)：把由活植物體上切取下來以進(jìn)行培養(yǎng)的那部分組織或器官叫外植體。 1942年最早在蘭花上獲得成功，縮短了授粉到成熟的時(shí)間。1904年Hanning最早成功培養(yǎng)蘿卜和辣根的胚。 指兩種不同親株經(jīng)酶法去除細(xì)胞壁得到兩個(gè)原生質(zhì)體，并在助融劑作用下互相凝集并發(fā)生細(xì)胞間的融合，進(jìn)而導(dǎo)致基因重組，獲得新菌株。細(xì)胞工程以細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)為基礎(chǔ)，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于多個(gè)學(xué)科的基礎(chǔ)研究工作以及農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥與食品等生產(chǎn)中。 細(xì)胞核移植技術(shù)（1） 概念：細(xì)胞核移植技術(shù)是將一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核轉(zhuǎn)移到另一個(gè)去除細(xì)胞核的細(xì)胞中去，從而使受體細(xì)胞獲得新的遺傳信息，產(chǎn)生新的生命現(xiàn)象的技術(shù)。但是由于學(xué)習(xí)的時(shí)間較長，學(xué)生遺忘嚴(yán)重，教師應(yīng)當(dāng)在課前提醒學(xué)生對相關(guān)知識進(jìn)行復(fù)習(xí)。三、重點(diǎn)難點(diǎn)重點(diǎn)轉(zhuǎn)基因動物：動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)目前研究最多的是轉(zhuǎn)生長激素基因，人們發(fā)現(xiàn)，將人的生長激素基因轉(zhuǎn)移到小鼠身上，小鼠會奇跡般地長大，體重可達(dá)到普通小鼠的兩倍；科學(xué)家們正試圖將人的生長激素基因轉(zhuǎn)移到牛、羊、豬、魚的身上，以期它們長得更快更大。轉(zhuǎn)基因的抗蟲植物：Bt是種常用的生物農(nóng)藥，其重要成分是蘇云金桿菌中的毒蛋白，它可以殺死害蟲。教后反思：一、基因工程我們知道動物、植物、微生物都具有遺傳性。導(dǎo)入過程：（運(yùn)載體為質(zhì)粒，受體細(xì)胞為細(xì)菌）（1）提取目的基因（2）目的基因與運(yùn)載體結(jié)合（DNA連接酶）。③ 種類：質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。② 結(jié)果：兩個(gè)相同的黏性未端的連接。關(guān)鍵步驟二：抗蟲基因與運(yùn)載體DNA連接。 對于基因工程的概念，教師應(yīng)在指導(dǎo)學(xué)生閱讀教材的基礎(chǔ)上，讓學(xué)生理解基因工程概念的兩種不同的表述方式（標(biāo)準(zhǔn)概念和通俗概念），并通過提問的方式指導(dǎo)學(xué)生找出概念中的關(guān)鍵詞語，便于學(xué)生的記憶，最后由教師歸納列表，引導(dǎo)學(xué)生獨(dú)立完成。教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn)：：基因工程的概念 基因工程的基本步驟。2．核酸中核苷酸的連接方式核酸是由核苷酸聚合而成的生物大分子，無分支結(jié)構(gòu)。動物病毒DNA通常是環(huán)狀雙鏈或線型雙鏈。原核細(xì)胞DNA集中在擬核。用圖表比較DNA、RNA的差異；理順DNA、RNA、核酸、核苷酸、堿基之間的關(guān)系。三 核酸在細(xì)胞中的分布： 學(xué)生自己閱讀教材P26~27實(shí)驗(yàn)：觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。基因突變的一般特征 突變的重演性和可逆性 突變的多方向行和復(fù)等位基因 突變的有利性和有害性第七節(jié) 細(xì)胞質(zhì)遺傳一、細(xì)胞遺傳的概念 由細(xì)胞質(zhì)控制的生物性狀遺傳的現(xiàn)象稱為細(xì)胞質(zhì)遺傳。第五節(jié) 近親繁殖與雜種優(yōu)勢近親繁殖 近親繁殖也叫近親交配，是指血統(tǒng)或親緣關(guān)系相近的兩個(gè)個(gè)體間的交配方式。三、連鎖遺傳規(guī)律 現(xiàn)代遺傳學(xué)的研究已經(jīng)證明，在生物的各個(gè)染色體上存在著許許多多個(gè)基因位點(diǎn)，它們就像一串珠子一樣，按照一定的順序排列著。（3）分離規(guī)律的解釋 孟德爾是用遺傳因子解釋分離現(xiàn)象的。不同之處： 有絲 減數(shù)1． 目的：增大營養(yǎng)體，維持正常的新陳代謝 形成配子，產(chǎn)生母細(xì)胞，而且只有性母細(xì)生物從生→死除了性母細(xì)胞之外， 胞成熟時(shí)方才可進(jìn)行的分裂方式都在進(jìn)行有絲分裂，各種器官內(nèi)都可進(jìn)行2．細(xì)胞分裂一次，染色體分裂一次 細(xì)胞分裂二，染色體只分裂一次3．母細(xì)胞產(chǎn)生2個(gè)子細(xì)胞，并且每個(gè)子細(xì)胞 母細(xì)胞產(chǎn)生四個(gè)子細(xì)胞，子細(xì)胞的染色體中的染色體數(shù)為2n。后期Ⅱ著絲點(diǎn)分裂為二，各個(gè)染色單體由紡錘絲分別拉向兩極。這時(shí)期很短，有時(shí)和第二次分裂的前期無法分開。每個(gè)染色體的兩條染色單體雖然分開著，但仍然具有一個(gè)共同的著絲點(diǎn)，即裂而不分。E終變期（diakinesis）（濃縮期）染色體的周圍聚集了許多的染色基質(zhì)，螺旋化過程達(dá)到最高限度，整個(gè)染色體變得更短更粗（DNA，蛋白質(zhì)纖絲的折疊程度不斷加強(qiáng)的結(jié)果）。具有四條染色單體的一對染色體又可叫做四合體。⑤在分裂的過程中其它的生命活動都可正常的進(jìn)行。2．細(xì)胞生物的生長主要是通過細(xì)胞數(shù)目的增加和細(xì)胞體積的增大而實(shí)現(xiàn)的，所以只有植物能進(jìn)行正常的有絲分裂，才能保證生物進(jìn)行正常的生長和發(fā)育。這時(shí)所有的染色體都處于同一個(gè)平面，是染色體形態(tài)，數(shù)目觀察的最好時(shí)期，雖然染色體分裂成為兩個(gè)單體，但仍被著絲點(diǎn)連在一起的。細(xì)胞生長周期包括：間期 分裂期間期 兩次聯(lián)系的細(xì)胞分裂之間的一段時(shí)間為間期。根據(jù)著色的深淺不同，又可以把染色質(zhì)分為兩種：其一：異染色質(zhì)：在有絲分裂的各階段都被強(qiáng)烈染色的染色質(zhì)稱為異染色質(zhì)。（四）原核生物的染色體形態(tài)，結(jié)構(gòu)和數(shù)目：原核生物雖然沒有一定結(jié)構(gòu)的細(xì)胞核，但是他們同樣具有染色體只是染色體的組成十分簡單，是簡單的DNA分子或RNA分子，而沒有與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起。一般每個(gè)核中有一對染色體的次縊痕與核仁的形成有關(guān)。但每一物種細(xì)胞內(nèi)染色體的形狀，大小又是相對穩(wěn)定的，從而可以做為鑒定的標(biāo)準(zhǔn)。二、染色體的形態(tài)特征：染色體是細(xì)胞核內(nèi)的最重要的組成部分，生物中除了病毒和噬菌體之外，都是由細(xì)胞組成的大多數(shù)生物的細(xì)胞都很小，須借助于顯微鏡，才能看到細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，包括染色體在內(nèi)，至于噬菌體在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下也可以看到染色體的存在?？偨Y(jié)一下，從光學(xué)顯微鏡的研究中，可以把細(xì)胞的構(gòu)造分成下面幾個(gè)部分：細(xì)胞膜——質(zhì)膜 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 高爾基復(fù)合體線粒體細(xì)胞 細(xì)胞質(zhì) 中心體溶酶體基質(zhì)、質(zhì)體、核糖體、液泡核膜 細(xì)胞核 核仁核液染色質(zhì)目前有人把三大部分又歸成膜相結(jié)構(gòu)和非膜相結(jié)構(gòu)兩大類（根據(jù)膜的有無）。每層膜厚為6090 197。原生質(zhì)是指細(xì)胞所含有的全部生活物質(zhì)；包括細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核兩部分，細(xì)胞質(zhì)表現(xiàn)為粘稠的膠體狀態(tài)，是由細(xì)胞漿和各種細(xì)胞器組成。 第二節(jié) 遺傳細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)一、細(xì)胞的構(gòu)造 細(xì)胞最外面的一層很薄的膜就是細(xì)胞膜，又稱為質(zhì)膜，它是一切細(xì)胞不可缺少的表面結(jié)構(gòu)，厚度為70100埃。這里要強(qiáng)調(diào)指出，這兩類變異的劃分是相對的。這就是生物的遺傳。農(nóng)業(yè)生物技術(shù)具有創(chuàng)新性、綜合性、滲透性，只是技術(shù)與人才的聚集性、基本密集性和增值性等高新技術(shù)特征。第二節(jié) 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的發(fā)展史一、按照生物技術(shù)的發(fā)展歷程分類，大致可分三個(gè)階段：傳統(tǒng)生物技術(shù)階段，近代生物技術(shù)階段和現(xiàn)代生物技術(shù)階段。備 課 本（2011年—2011 學(xué)年2學(xué)期）學(xué) 校 專 業(yè) 課 程 農(nóng)業(yè)生物技術(shù) 年 級 班 次 教 師 云南省農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校 編制日期201 年 月 日上午下午授課內(nèi)容第一章 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)概述教學(xué)時(shí)數(shù)12重點(diǎn)了解生物技術(shù)的含義及種類 了解農(nóng)業(yè)生物技術(shù)發(fā)展史 了解生物技術(shù)的特點(diǎn) 了解生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展及應(yīng)用難點(diǎn)了解農(nóng)業(yè)生物技術(shù)發(fā)展史 了解生物技術(shù)的特點(diǎn) 教學(xué)內(nèi)容及過程設(shè)計(jì)第一節(jié) 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的內(nèi)涵 生物技術(shù)的含義：是指人們以生命科學(xué)為基礎(chǔ)，應(yīng)用基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理，產(chǎn)用先進(jìn)的技術(shù)手段，按照預(yù)先的設(shè)計(jì)改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達(dá)到某種目的的技術(shù)。第三節(jié) 生物技術(shù)的特點(diǎn)一、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)以生命科學(xué)領(lǐng)域的重大理論和技術(shù)突破為基礎(chǔ)，多學(xué)科相互滲透，呈現(xiàn)明顯的高新技術(shù)的特點(diǎn)。三、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)是以基因工程為核心的綜合技術(shù)。在生物的繁殖過程中還有另一個(gè)引人注目的現(xiàn)象，即同種生物世代之間或同代不同個(gè)體之間的性狀不會完全相同。因?yàn)樵谝欢ǖ沫h(huán)境條件下通過長期定向的影響和選擇，由量變的積累可以轉(zhuǎn)化為質(zhì)變，不遺傳的變異就有可能形成為遺傳的變異。1197。主要的細(xì)胞器有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，核糖體，高爾基復(fù)合體，線立體，溶酶體，動物及一些蕨類及裸子植物中特有中心體，植物細(xì)胞還有特殊的結(jié)構(gòu)，液泡和質(zhì)體等。核的周隙為150300 197。其中后者的非膜相結(jié)構(gòu)包括質(zhì)相結(jié)構(gòu)和核相結(jié)構(gòu)兩個(gè)部分的內(nèi)容。染色體在細(xì)胞間期一般看不到，必須在細(xì)胞分裂期，經(jīng)過一定的處理才能看到一些能被堿性染料著色的點(diǎn)狀或桿狀的小體所以叫做染色體。三、染色體的細(xì)微結(jié)構(gòu)1．染色絲：每條染色體都有兩條平行的染色絲，他們相互盤繞成螺旋形，這是染色體的最基本的結(jié)構(gòu)。四、染色體的數(shù)目，大?。ㄒ唬┤旧w的數(shù)目 不同的生物種群具有不同數(shù)目的染色體，同一生物體細(xì)胞中的染色體是性細(xì)胞之中染色體的二倍，如體細(xì)胞之中的染色體數(shù)用2n表示，那么性細(xì)胞之中的染色體為幾個(gè)，也就是說：合子或體細(xì)胞之中的染色體數(shù)為2n，配子或性細(xì)胞之中的染色體數(shù)為n，最少的為2條1對，有的達(dá)400600對以上的染色體。在形態(tài)上有些呈線條狀，有些連接成環(huán)狀（線粒體）。具有異染色質(zhì)的染色體區(qū)段稱為異染色區(qū)。分裂期 分為有絲分裂和減數(shù)分裂。3．后期(anaphase) 染色單體移向一極，著絲點(diǎn)分裂，由于紡錘絲的收縮和牽引使赤道板上的成對的染色單體在以著絲點(diǎn)為前導(dǎo)的情況下開始分離并向兩極移動，每極有一組染色單體，其數(shù)目和原來的親本相同。染色體有絲分裂過程中所表現(xiàn)出來的運(yùn)動規(guī)律，也就是遺傳物質(zhì)的運(yùn)動規(guī)律。無絲分裂是高等植物某些專化組織中成病變和衰退組織中以及高等植物中生長迅速的部分的分裂方式。D雙線期四合體繼續(xù)縮短變粗，（各個(gè)聯(lián)會了的二價(jià)體雖因非姊妹染色單體相互排斥而松解，但仍被一、二個(gè)以至幾個(gè)交叉（chiasmate）聯(lián)結(jié)在一起。這是前期Ⅰ終止的標(biāo)志。后期由于著絲點(diǎn)的排斥力及紡錘絲的牽動，使成對的同源染色體以染色體為單體分別向兩極移動，從而聯(lián)會變成了分裂。接著進(jìn)行第二次分裂。末期Ⅱ拉到兩極的染色體形成新的子核，同時(shí)細(xì)胞質(zhì)又分為兩部分。 數(shù)為n。（4）基因型、表現(xiàn)型及基因型分析 生物細(xì)胞內(nèi)的基因組合成為基因型，如[CC][Cc]等。因此，也形象的比喻為染色體的串珠結(jié)構(gòu)，每一個(gè)位點(diǎn)就是一個(gè)控制生物性狀發(fā)育的基因。一、自交的遺傳效應(yīng)：自交使雜合體分離 自交可以導(dǎo)致隱性基因得到純和，使有害的隱性性狀得以表現(xiàn) 自交可以使基因重新組合和穩(wěn)定二、回交及其遺傳效應(yīng) 回交是指雜種后代與相親之一再次交配的過程。二、胞質(zhì)遺傳的表現(xiàn) 比較常見的葉綠體所控制的性狀遺傳。：（1）甲基綠 + DNA → 綠色 吡羅紅 + RNA → 紅色（2）鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。特別指出：部分病毒的遺傳信息，直接儲存在RNA中，如HIV、SARS病毒、禽流感病毒等。真核細(xì)胞DNA分布在核內(nèi)，與蛋白質(zhì)組成染色體（染色質(zhì)）。植物病毒基因組大多是RNA，DNA較少見。核酸中的核苷酸以磷酸二酯鍵彼此相連。：基因工程的基本原理。 提出問題，引導(dǎo)學(xué)生回答：生物體的不同性狀是基因特異性表達(dá)的結(jié)果。 基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)人類需要的基因產(chǎn)物2．基因操作的工具關(guān)鍵步驟三：抗蟲基因進(jìn)入棉細(xì)胞。在繁殖時(shí)，生物把自己的遺傳物質(zhì)傳給自己的后代，現(xiàn)代生物學(xué)研究表明，這種遺傳物質(zhì)叫做脫氧核糖核酸，簡稱DNA，每一個(gè)DNA上都有成千上萬個(gè)基因片斷，不同的基因決定了不同的生物性狀。當(dāng)人們把這種毒蛋白的基因轉(zhuǎn)移到棉花中后，棉花就可在葉子里自己合成毒蛋白，進(jìn)而殺死棉鈴蟲，這就是人們常