【正文】 若低于此數(shù)值，便不能被稱為酸奶。凝固后的酸奶用慢速攪拌的方法，可以得到均勻的半固態(tài)可流動(dòng)產(chǎn)品，這就是攪拌型酸奶。 我們最終發(fā)酵所得的酸奶如下： 圖 14 發(fā)酵所得 酸奶 我們發(fā)酵所得酸奶： 從圖 14 可以看到在酸奶的上面有一層厚厚的 乳 白色固體，那個(gè)是 牛 奶發(fā)酵 過(guò)程 中 酪蛋白變 質(zhì)所得，屬正常現(xiàn)象。假如快速攪拌，則會(huì)破壞蛋白質(zhì)膠體，使產(chǎn)品變稀。 4. 放料 同取樣操作。 ⑷ 酸堿液，消泡劑操作同補(bǔ)料操作。控制器的初始化菜單上按 F1 設(shè)定“發(fā)酵批號(hào)”并確認(rèn) ，再按 F2 發(fā)酵開始并確認(rèn)，發(fā)酵數(shù)據(jù)才能自動(dòng)保存，設(shè)定發(fā)酵過(guò)程參數(shù)及適宜的控制模式。 7. 保溫過(guò)程應(yīng)根據(jù)罐溫及時(shí)調(diào)整蒸汽閥 S1。如發(fā)現(xiàn)電壓過(guò)低或聽(tīng)到接觸器繼續(xù)工作的撞擊聲時(shí)應(yīng)立即停機(jī)，以免損壞發(fā)生器。 ⑻ 當(dāng)發(fā)生器的水位到達(dá)正常水位時(shí)，綠色供水指示燈熄滅，表示停止供水，同時(shí)紅色加熱指示燈亮，表示電加熱器已開始加熱。水泵出水軟管接至發(fā)生器進(jìn)水口并用夾箍把軟管夾緊。 ⑵ 過(guò)濾器平衡口 K5口與排氣過(guò)濾器回水口 K2用硅膠管連接并移去彈簧夾J1，在消毒過(guò)程中防止培養(yǎng)基倒流進(jìn)入進(jìn)氣過(guò)濾器。嗜熱鏈球桿菌能發(fā)酵乳糖生成乳酸， 10℃不能升長(zhǎng)，最適合溫度在 45℃，能與保加利亞乳桿菌形成很好的共生關(guān)系。感官指標(biāo)：牛乳為乳白色或呈微黃色，不得含有肉眼可見(jiàn)的異物，不得有異常氣味。滅菌的冷卻階段，蒸汽將在器皿內(nèi)冷凝，如果不采取有效措施發(fā)酵罐內(nèi)會(huì)產(chǎn)生真空。 在加熱過(guò)程中，空氣出口管應(yīng)該打開，這樣可以講容器中的空氣排出十分重要，這樣可以使所有地方都可以充分地進(jìn)行濕熱滅菌， 達(dá)到最大的滅菌效果。進(jìn)行滅菌準(zhǔn)備時(shí)，必須從整個(gè)發(fā)酵系統(tǒng)來(lái)考慮：發(fā)酵罐，輔助容器，外圍設(shè)備及管路。這種途徑加熱階段的溫度 時(shí)間圖略有不同：夾套蒸汽加熱時(shí)溫度的變化會(huì)經(jīng)過(guò)一個(gè)對(duì)數(shù)變化階段而達(dá)到滅菌溫度，而電加熱則是線性關(guān)系。更大體積的容器則需要 30min 或更長(zhǎng)時(shí)間。使用實(shí)罐滅菌時(shí)，發(fā)酵罐和培養(yǎng)基可以選擇不同的滅菌方法和不同的滅菌時(shí)間，如對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基可以采用過(guò)濾法進(jìn)行除菌。氣升罐和泡罩罐通常高徑比較大，因而很難放入高壓滅菌器內(nèi)，此時(shí)采用一個(gè)大氣壓力的蒸汽滅菌幾個(gè)小時(shí)也是一個(gè)可行的選擇。有的實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵罐全部采用不銹鋼。本實(shí)驗(yàn)采用原位滅菌。（注：在接種過(guò)程中要帶好濕手套以免燒傷。 東北制藥集團(tuán)的這段發(fā)展歷程使我不禁想到我們這些馬上就要面臨就業(yè)的大四學(xué)生們 ， 使我想到做什么事都不是一帆風(fēng)順的，都會(huì)遇到一些挫折，雖然我們所在的大學(xué)比較好，但是現(xiàn)在的就業(yè)形勢(shì)不太樂(lè)觀，不是那么輕易就能找到職位好，工資又高的工作的，很可能就是一個(gè)公司的基層員工，但是這并不代表我們沒(méi)有找到好的工作， 更不能代表我們不會(huì)有好的發(fā)展和前途。由于在東北制藥集團(tuán)的負(fù)債中， VC 項(xiàng)目占有相當(dāng)大的比重，因此，東北制藥集團(tuán)發(fā)生虧損與后來(lái)的加強(qiáng)管理、走出困境都與這 1 萬(wàn)噸VC 項(xiàng)目有關(guān)，用企業(yè)人士的話來(lái)說(shuō)就是“成也 VC，敗也 VC”。 1996 年又進(jìn)行了第二次降價(jià)，降到每公斤 5 美元再到 美元。同時(shí)，我們還了解到，一般銷售到國(guó)外的 VC 片的價(jià)格都較高，那是因?yàn)檫@些 VC 片的純度高，而且大多添加了有益成分。 VC 可增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的趨化性和變形能力，提高殺菌能力。 谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸組成的短肽，在體內(nèi)有氧化還原作用。 6．治療貧血。嚴(yán)重情況在胃、腸道、鼻、腎臟及骨膜下面均可有出血現(xiàn)象，乃至死亡。人體由細(xì)胞組成，細(xì)胞靠細(xì)胞間質(zhì)把它們聯(lián)系起來(lái)，細(xì)胞間質(zhì)的關(guān)鍵成分是膠原蛋白。粗品經(jīng)結(jié)晶精制得維生素 C 成品。生產(chǎn)維生素 C 的發(fā)酵罐均在 100 立方米 以上，瘦長(zhǎng)型，無(wú)機(jī)械攪拌，采用氣升式攪拌。 系以葡萄糖作為起始原料，經(jīng)催化加氫制成 D山梨醇，再經(jīng)醋桿菌深層發(fā)酵氧化制得收率很高的 L山梨糖， L 一山梨糖經(jīng)丙酮和硫酸處理（生產(chǎn)上俗稱丙酸化）生成雙丙酮 L山梨糖（簡(jiǎn)稱雙酮糖），再用苯或甲苯提取，提取液經(jīng)水法除去單酮山梨糖后蒸去溶劑而后分離出來(lái)，用高錳酸鈉氧化、水解、酯化、轉(zhuǎn)化、中和便得 VC。經(jīng)過(guò)多年的實(shí)踐，該公 司在維生素 C 生產(chǎn)過(guò)程中從發(fā)酵、提取、轉(zhuǎn)化、精制等流程著手，大膽進(jìn)行新工藝、新技術(shù)、新設(shè)備的研究創(chuàng)新，自發(fā)研制了兩步發(fā)酵法和堿轉(zhuǎn)化新工藝，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)空白。由于停產(chǎn)，所以一些罐子正在維修 中 （圖 4） 。 d) 氣霧免疫 主要在大群免疫時(shí)應(yīng)用，但不適宜于 30 日齡內(nèi)的雛雞和存在慢性呼吸道病的雞群，以免誘發(fā)呼吸道系統(tǒng)疾患。然后按要求加入疫苗，混勻后給雞飲服。 2020 年年底 ,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所成功研制出禽流感 新城疫重組二聯(lián)活疫苗 (rLH5 株 ),年需 SPF 雞卵 300 萬(wàn)枚 ,使得目前 SPF 雞卵供應(yīng)較為緊張。細(xì)胞毒液經(jīng)無(wú)菌檢驗(yàn)，毒價(jià)測(cè)定合格后供配苗用。 2. 細(xì)胞來(lái)源方便，制備簡(jiǎn)備，生命力強(qiáng)。 注： 濕苗：于雞胚液中加青、鏈霉素（每 ml500~1000u）放置 0~10℃，冷處理后分裝。 2. 接種途 徑 ：腦內(nèi)注射、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射 等 。清潔動(dòng)物（ CL）要求在 CV 的基礎(chǔ)上，還須不帶有動(dòng)物傳染病的病原體。我國(guó)現(xiàn)在尚未劃分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)。 ④．清潔普通動(dòng)物（ Clean conventional animal,CCV）（亦稱最低限度疾病動(dòng) 8 物 MOA）或稱清潔動(dòng)物（ Clean animal,CL） ,來(lái)自屏障系統(tǒng)的 SPF 動(dòng)物，飼養(yǎng)在設(shè)有兩條走廊的，溫濕度恒定的普通設(shè)施中的動(dòng)物。此種動(dòng)物同無(wú)菌動(dòng)物一樣是放在隔離器內(nèi)飼育的，但因其帶有已知的微生物，故隔離器內(nèi)有微生物及其代謝產(chǎn)物的污染。 7 其法：一般將臨產(chǎn)前的健康動(dòng)物用麻醉藥品或頸椎臼法處死后，立即浸泡在 37℃滅菌液中，送進(jìn)無(wú)菌室（或無(wú)菌隔離器），按無(wú)菌手術(shù)進(jìn)行剖腹，切除帶胎子宮（子宮內(nèi)首先應(yīng)無(wú)菌），將其 浸入消毒液里并輸送到另一隔離器中，切開子宮取胎，經(jīng)用滅菌紗布揩拭仔體并斷臍（電刀切斷）后，放隔離器內(nèi)人工喂乳或用其它品系的無(wú)菌母鼠作保姆供養(yǎng)。 6 盡量短捷、順暢。潔凈級(jí)別高的區(qū)域相對(duì)于潔凈級(jí)別低 的區(qū)域要保持 5 ~10Pa 的正壓差。 iii. 類毒素 ：取出病 原體的毒素，加以削弱毒性而成為無(wú)毒化。 4 b) 疫苗可分為三類 ： i. 活菌疫苗 ：減毒活疫苗作為疫苗用。近年來(lái)，企業(yè) 3 以市場(chǎng)為導(dǎo)向，不斷加大科研開發(fā)力度，與吉林大學(xué)、沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)等院校建立了長(zhǎng)期的產(chǎn)、學(xué)、研合 作關(guān)系，先后合作成功“仔豬大腸桿菌 K88ST1LTB 三價(jià)基因工程疫苗”、“仔豬紅?。é?β）雙價(jià)基因工程疫苗”等十余項(xiàng)新產(chǎn)品，逐步形成了開發(fā)一批、研制一批、儲(chǔ)備一批的新產(chǎn)品開發(fā)模式。 4. 學(xué)習(xí)東北制藥集團(tuán) VC 總公司生產(chǎn)維生素 C 的方法流程 。 1 目錄 第一部分 校外參觀實(shí)習(xí) ???????????????? 2 實(shí)習(xí)目的 ????????????????????? 2 實(shí)習(xí)地點(diǎn) ㈠ 遼寧益康生物制品有限公司 ??????? 2 一、 遼寧益康生物制品有限公司 簡(jiǎn)介 ????????? 2 二、 實(shí)習(xí)內(nèi)容 ????????????????? 3 三、 實(shí)習(xí)小結(jié) ????????????????????? 16 實(shí)習(xí)地點(diǎn) ㈡ 東北制藥廠 VC 總公司 ?????????? 16 一、 吳春江老師向我們介紹 東北制藥廠 ?????????? 16 二、 聽(tīng)工作人員給我們講解東藥 VC 的生 產(chǎn)流程?????? 17 三、 吳老師給我們普及 VC 知識(shí)????????????? 21 四、 參觀生產(chǎn)車間??????????????????? 24 五、 實(shí)習(xí)心得????????????????????? 24 第二部分 校內(nèi)實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵酸奶 ???????????? ? 26 一、 實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò) ?????????????????? ? 26 二、 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ?????????????????? ? 28 第三部分 實(shí)習(xí)總結(jié) ?????????????????? 42 2 第一部分 校外參觀實(shí)習(xí)： 經(jīng)過(guò)大 學(xué)三年 的理論 性教育，使我們對(duì)生物制藥 以 及生物工程設(shè)備 這 兩 門學(xué)科有了理論上的大體認(rèn)識(shí)，在大三下 學(xué)期期末在舒老師和劉老師的帶領(lǐng)下， 我們?nèi)ミ|寧省益康生物制品有限公司和東北制藥集團(tuán)進(jìn)行參觀 實(shí)習(xí)。 5. 將理論知識(shí)與實(shí)踐操作相結(jié)合 ?，F(xiàn)已推出新 支 減 流、新 支 減、 SPF 系列產(chǎn)品等。如小兒麻痹、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹 等疫苗皆是。接種類毒素的話，血中可制造某種物質(zhì)，使菌中的毒素?zé)o毒化，可借此預(yù)防疾病。如工藝無(wú)特殊要求，一般潔凈區(qū)溫度為 18 ~ 26℃，相對(duì)濕度為 45％ ~65％。物流路線的一條線是原輔料，物料經(jīng)過(guò)外清處理，進(jìn)行濃配、稀配；另一條線是 安 瓿 瓶， 安 瓿 經(jīng)過(guò)外清處理后，進(jìn)入洗灌封聯(lián)動(dòng)線清洗、烘干。象小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻煩，故采用保姆代養(yǎng)較為方便。例如，人工投給的微生物，除可在飲水中增殖外，還能在隔離器內(nèi)放出大量的氨氣。墊料、飼料、用具等均應(yīng)經(jīng)過(guò)高壓消毒。 1980 年 10 月在北京召開醫(yī)學(xué)科研存設(shè)計(jì)座談會(huì)，有 30 多位國(guó)內(nèi)著名專家教授參加，根據(jù)我國(guó)具體條件，這次會(huì)議對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行了分級(jí)，列舉如下： Ⅰ級(jí)：用于教學(xué)示教的動(dòng)物，應(yīng)沒(méi)有能傳染給人的疾病，如結(jié)核、假結(jié)核、痢疾、傷寒沙門氏菌感染、出血性黃疸螺旋體病、淋巴細(xì)胞脈絡(luò)腦膜炎病毒感染，皮膚霉菌病，體外寄生蟲病等。無(wú)特定病原體動(dòng)物（ SPF）要求在 CL 基礎(chǔ)上還須不帶有干擾實(shí)驗(yàn)的微生物。 工序三 ： 觀察與收獲 根據(jù)觀察征象和檢查的結(jié)果選出符合要求的發(fā)病動(dòng)物按規(guī)定方式剖殺，采取收集含毒高器官組織。 凍干苗：按比例加入保護(hù)劑（ 5%蔗糖脫脂乳）、濾過(guò)、加青鏈霉素、分裝、凍干。如豬瘟兔化弱毒牛睪丸細(xì)胞疫苗用犢牛睪丸原代細(xì)胞，狂犬病弱毒細(xì)胞適應(yīng)疫苗，采用 BHK21。 工序五： 配苗 1．滅活疫苗：不同病毒采用不同滅活劑，有的需加佐劑，分裝。 20 世紀(jì) 80 年代 ,農(nóng)業(yè)系統(tǒng)進(jìn)行 SPF 雞技術(shù)的開發(fā)研究。 菌種 發(fā)酵罐培養(yǎng) 收毒 中間品檢驗(yàn) 種子培養(yǎng) 培養(yǎng)基 滅菌 裝箱 貼標(biāo) 軋蓋 壓塞 入庫(kù) 28℃ 標(biāo)簽 滅菌 鋁蓋 成品檢驗(yàn) 清洗 病毒液暫存 15℃ 化苗 配苗 分裝 凍干保護(hù)劑 配制 滅菌 滅菌 西林瓶 精洗 粗洗 滅菌 粗洗 膠塞 精洗 凍干干燥 半壓塞 15 特別注意疫苗的用水量，一般為雞日飲水量的 30%，疫苗用量高于平均用量的 2~3 倍，保證所有的雞同時(shí)喝到疫苗水，并在 ~1 小時(shí)內(nèi)飲完。氣霧免疫時(shí)，將疫苗按規(guī)定稀釋好，用噴霧器或空壓機(jī)將疫苗液噴成氣霧粒子。 圖 3 圖 4 三、 實(shí)習(xí) 小結(jié) ： 這次去益康，我們收獲頗多， 由于他們實(shí)驗(yàn)室的潔凈程度特高，要進(jìn)去得經(jīng)過(guò)好幾層的消毒，而且還要穿防護(hù)服，所以我們沒(méi)有進(jìn)去 參觀，不過(guò)通過(guò)他們的微機(jī)監(jiān)控室我們也能夠清楚的看見(jiàn)各個(gè)車間都是做 什么的，再加上工作人員的認(rèn)真講解，我們學(xué)到很多課本上沒(méi)有的知識(shí)，也將有些學(xué)過(guò)的知識(shí)結(jié)合與實(shí)踐相結(jié)合。 在萬(wàn)噸級(jí)維生素 C 生產(chǎn)裝置的實(shí)際應(yīng)用中，該公司設(shè)計(jì)采用了 300 立方米氣升式發(fā)酵罐，為國(guó)內(nèi)首創(chuàng)；同時(shí)引進(jìn)了具有世界先進(jìn)水平的超濾裝置，并采用先進(jìn)的連續(xù)式流程和滲析半連續(xù)組合工藝。 此方法的生產(chǎn)流程可簡(jiǎn)單寫為： D葡萄糖 ? ?? H2 D山梨醇 ? ?? O2 L 18 山梨糖 ??? ?? 硫酸、丙酮 雙丙酮 L山梨 糖 ??????? ?? 4K M n O2ON a O H][ 、氧化 雙丙酮 L古龍酸糖 ??? ?? HC l][酸化 2酮 L古龍酸 ?? ?? ][轉(zhuǎn)化 維生素 C 此方法的 注意事項(xiàng)及三廢處理 1) 車間進(jìn)行還原反應(yīng)時(shí)氫氣自制，故配有氫氣柜。種子和發(fā)酵培養(yǎng)基的成份類似 ,主要有 L山梨糖、玉米漿、尿素、碳酸鈣、磷酸二氫鉀等， pH 值為 。 此步驟的生產(chǎn)流程可簡(jiǎn)單寫為： 古龍酸粉 ???? ?? 甲醇、濃硫酸 古龍 酸甲酯 ?? ?? 小蘇打 VCNa （甲醇溶液） ??? ?? 結(jié)晶、冷凍 晶體 ?? ?? 過(guò)濾 VCNa溫品 ?? ?? 加水 VCNa 水溶液 ??? ?? 離子交換 VC 水溶液????????? ?? 結(jié)晶、脫水碳吸附、壓濾、濃縮、 粗 VC 20 ⑷ 精制 : 在潔凈區(qū)中 操作。膠原蛋白占身體蛋白質(zhì)的 1/3，生成結(jié)締組織，構(gòu)成身體骨架。 3．牙齦萎縮、出血。使難以吸收利用的三價(jià)鐵還原成二價(jià)鐵，促進(jìn)腸道對(duì)鐵的吸收，提高肝臟對(duì)鐵的利用率，有 助于治療缺鐵性貧血。它有兩種存在形式，即氧化型和還原型，還原型對(duì)保證細(xì)胞膜的完整性起重要作 23 用。 促進(jìn)淋巴母細(xì)胞的生成，提高機(jī)體對(duì)外來(lái)和惡變細(xì)胞的識(shí)別和殺滅；參與免疫球蛋白的合成； 提高 CI 補(bǔ)體酯酶活性，增加補(bǔ)體 CI 的產(chǎn)生； 促進(jìn)干擾素的產(chǎn)生，干擾病毒 mRNA 的轉(zhuǎn)錄，抑制病毒的增生。