【正文】 急診搶救輸血，未能事先采血檢測血型，則要求注明急診字樣由專人核對(duì)、貼標(biāo)簽、采取血標(biāo)本送檢。 14 參考文獻(xiàn) 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第三版） 黃德明 《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)新技術(shù)與操作規(guī)程全書》 DiaMed 血型配血微量定型系統(tǒng)（ DiaMedID Micro Typing System）操作技術(shù)手冊。聚集帶的上方有少量紅細(xì)胞 0陰性 所有紅細(xì)胞穿過玻璃珠的縫隙，在柱的底部形成一個(gè)平整的紅細(xì)胞聚集帶。 溶血會(huì)導(dǎo)致玻璃珠上方呈淺粉色至紅色。 試劑說明 ： 每張 ORTho BioVueABORH 正反定型血型定型試劑卡有 6 個(gè)微柱組成，每一柱中含有緩沖液，其成分為牛血清蛋白、大分子增強(qiáng)劑以及 %（ W/V） 疊氮鈉和 乙二胺四乙酸（ EDTA） . 離心機(jī)： ORTho BioVue System Heat Block32 孵育器： ORTho BioVue System Centrifuge 生產(chǎn)廠家： ORThoClinical Diagnostics,Inc 8. 操作步驟 在凹板的凹槽（或試管）中分別加 1ml生理鹽水備用；取血型卡放置到室溫，將有條形碼的一邊面向?qū)嶒?yàn)者，并在此面空白處標(biāo)記病人標(biāo)本編號(hào)。 血標(biāo)本容器要清潔干燥并事先貼好標(biāo)簽，加 血標(biāo)本前要認(rèn)真核對(duì)、無誤后再將血液注入。 ABO輸血不相容存在潛在的嚴(yán)重后果，因此必須對(duì)輸血接受者和獻(xiàn)血者進(jìn)行可靠測試，以確認(rèn)是否存在 A和 B抗 原、紅細(xì)胞 ABO定型的結(jié)果通過使用已知的 A1 和 B 試劑紅細(xì)胞進(jìn)行反定型（血清）檢測加以確認(rèn)。用 3740℃ 生理鹽水洗滌紅細(xì)胞可去除紅細(xì)胞表面附著的導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。 判讀結(jié)果。 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXKCZ09 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 血型鑒定 （微柱凝膠法 DiMed） 生效日期： 20210211 第 30 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 采血時(shí)要防止溶血及多量組織液混入 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強(qiáng)抽血時(shí)）在病人輸液時(shí)采集標(biāo)本，必須從未輸液的一側(cè)肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。紅細(xì)胞上有 A抗原的 A型血清中有抗 B，紅細(xì)胞上有 B抗原的 B型血清中有抗 A，紅細(xì)胞上有 A和 B抗原的AB型血清中無抗 A和抗 B，紅細(xì)胞上無 A和 B抗原的 O型血清中有抗 A和抗 B。 （微柱凝膠法） 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ08 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 室內(nèi)質(zhì)量控制 生效日期： 20210211 第 28 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 質(zhì)控品 :衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)中選擇 1 個(gè)含有已知類型不規(guī)則抗體的血清標(biāo)本及一個(gè)不含有不規(guī)則抗體的血清標(biāo)本。 ：每日開始試驗(yàn)前，按 ABO、 RH 血型鑒定 SOP常規(guī)操作。 IgM類抗體質(zhì)控 :3個(gè) ABO血型互不相同的 EDTA抗凝血全血標(biāo)本，其中一個(gè)作為受者，另外 2個(gè)作為供者，進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。 D血清質(zhì)控 ：效價(jià)，陰性質(zhì)控，陽性質(zhì)控，有效期，外觀 ：來源：本實(shí)驗(yàn)室檢測出的 O型 Rh陽性紅細(xì)胞和 O型 Rh陰性紅細(xì)胞：制備：洗滌兩種紅細(xì)胞并制備成 40%的紅細(xì)胞懸液；保存： 28℃儲(chǔ)存。 3 職責(zé) 輸血科工作人員需按本制度常規(guī)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控操作。 ，說明有前帶現(xiàn)象發(fā)生。110管的稀釋度分別為 1： 1， 1： 2， 1： 4， 1： 8， 1： 16， 1： 32， 1： 64， 1： 128， 1： 256，1： 512。目的在于避免血清里的抗體提前被抗人球試劑中和，從而造成假陰性結(jié)果。大多數(shù)傳統(tǒng)測試法仍然依賴于對(duì)液體環(huán)境下凝集反應(yīng)的解釋，由于缺乏客觀性的反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)結(jié)果的判讀準(zhǔn)確性因人而易。 6. 試劑 試劑名稱： DiaMed凝膠卡、 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)抗體篩查細(xì)胞（ %） 、達(dá)亞美 2號(hào)稀釋液（ Dil2） 試劑生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 試劑說明 ： 每張 DiaMed凝膠卡由 6個(gè)微孔管 (兩人份 )組成 DiaMedID Micro Typing System 離心機(jī)： IDCentrifuge 12 SⅡ 孵育器： IDIncubator 37 SⅠ 生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 8. 操作步驟 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)抗體篩查細(xì)胞（ %） ， 2 號(hào)稀釋液室溫平衡。 ，加血標(biāo)本前要認(rèn)真核對(duì)、無誤后再將血液注入 。目的在于避免血清里的抗體提前被抗人球試劑中和，從而造成假陰性結(jié)果。大多數(shù)傳統(tǒng)測試法仍然依賴于對(duì)液體環(huán)境下凝集反應(yīng)的解釋，由于缺乏客觀性的反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)結(jié)果的判讀準(zhǔn)確性因人而易。 。 血標(biāo)本容器要清潔干燥并事先貼好標(biāo)簽，加血標(biāo)本前要認(rèn)真核對(duì)、無誤后再將血液注入。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 16 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（微柱凝膠法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細(xì)胞分別與獻(xiàn)血員血細(xì)胞和血清進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，以排除各種因素引起的輸血反應(yīng)（如凝集或溶血），保證用血安全。 如果主側(cè)管和次側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集散開，則為凝集胺引起的非特異性，表示配血結(jié)果相合，可以輸用。 LISS液 ，再加凝聚胺液 2滴，混合均勻。 采血時(shí)要防止溶血及多量組織液混入 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強(qiáng)抽血時(shí)）在病人輸液時(shí)采集標(biāo)本，必須從未輸液的一側(cè)肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 申請(qǐng)輸用手工血小板的 標(biāo)本。具體方法如下：在關(guān)機(jī)狀態(tài)下，按住面板上的“上下”檔開機(jī)，循環(huán)泵隨即打開，加熱箱內(nèi)的水上升至解凍槽內(nèi)，溫度窗口顯示即時(shí)水溫。 5 操作 ：按《 KHR1型冰凍血漿融化箱》使用說明書進(jìn)行安裝 ，連接進(jìn)水管、排水管 若顯示屏顯示“缺水”時(shí)，請(qǐng)采用人工加水，當(dāng)水位達(dá)到時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)進(jìn)入預(yù)溫狀態(tài)。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 10 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital IgM抗 D與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以 4oC為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍再室溫（ 20~24oC）內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)， 37oC可使反應(yīng)減弱。 10超出范圍結(jié)果處理： 細(xì)胞自凝：在冬天氣溫較低時(shí)，某些病人血清中含有冷凝集素而導(dǎo)致假陽性；若有此懷疑，建議在最后滴入懸浮液時(shí)將試管立即置入 37℃水浴中， 輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混勻，并在 30秒內(nèi)觀察結(jié)果。出現(xiàn)陰性、弱陽性或結(jié)果不清楚時(shí)，進(jìn)行試管法試驗(yàn)。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 9 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 3 + = 紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊，血 清尚清晰。 5 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn) ：細(xì)菌污染、溶血標(biāo)本標(biāo)簽填寫內(nèi)容不齊全或有涂改、標(biāo)本量太少不能作檢測。 、記錄，避免筆誤。 ⑸ 如有條件可用外源凝集素加以鑒別。 （ 2） 用受檢者紅細(xì)胞與自身血清作試驗(yàn)，血清中的抗 B不凝集自身紅細(xì)胞上的類 B抗原。如果懷疑時(shí)抗 I，用 O型（或ABO相合的）臍血紅細(xì)胞檢查。 ，如自身抗 I，常引起干擾。如抗 A血清效價(jià)不高，可將 A亞型誤定為 O型， AB型誤定為 B型。 （或白瓷板 1塊），用蠟筆劃成方格，標(biāo)明 A細(xì)胞、 B細(xì)胞和 O細(xì)胞，用滴管各加受檢者血清 2滴，再分別用滴管滴加 A、 B和 O型試劑紅細(xì)胞懸液 1滴。 4 + = 紅細(xì)胞凝集成一大塊，血清清晰透明。 7 儀器 ： 802上海手術(shù)器械廠 ：上海醫(yī)療器械廠 ： OLYMPUS(日本 ) 8 操作步驟及結(jié)果判斷： 取潔凈小試管（內(nèi)徑 10mm*60mm） 3支，分別標(biāo)明抗 A、抗 B和抗 A+B，用滴管分別成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXKCZ01 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定（鹽水法） 生效日期： 20210211 第 4 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 加抗 A、抗 B和抗 A+B。 2 標(biāo)本采集： 標(biāo)本種類：采集靜脈血 34ml 待凝固后分離血清，將紅細(xì)胞用 %生理鹽水配成 5%紅細(xì)胞懸液。 ：抗凝要求 EDTAK2抗凝管或干燥管均可。分型血清各 1滴于試管底部，再以滴管分別加入受檢者 5%紅細(xì)胞鹽水懸液 1滴， 混合。 3 + = 紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊，血清尚清晰。 ，使血清與細(xì)胞充分混勻，連續(xù)約 15min，以肉眼觀察有無凝集（或溶血）反應(yīng)。 ，抗原抗體比例不適當(dāng)，使反應(yīng)不明顯，誤判為陰性反應(yīng)。 。 ，應(yīng)將細(xì)胞及血清試驗(yàn)至少在室溫和 4oC放置 30min，用顯微鏡檢查核實(shí)。 （ 3） 檢查唾液中是否有 A、 B物質(zhì)， 如果時(shí)分泌型，可檢出 A物質(zhì)而無 B物質(zhì)。 11注意事項(xiàng) ，用畢后應(yīng)放置冰箱保存， 以免細(xì)菌污染。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， P89 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 8 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital Rh（ D）血型鑒定（鹽水法） 1 原理： 一般臨床上根據(jù)紅細(xì)胞表面 D抗原的有無，將 Rh血型分為 RH陰性和陽性。 6 試劑 ： RhD(IgM)血型定型試劑（單克隆抗體） ：德國 。 2 + = 紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細(xì)胞。 法 1滴抗 D試劑。 5%為宜，過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當(dāng)，反應(yīng)不明顯易誤判。 ，速度不宜過快或過慢，以防假陽性或假陰性結(jié)果。 ： 時(shí)間設(shè)定，一 般設(shè)定 18 分鐘，通過按“ +”或“ ”來調(diào)整設(shè)定時(shí)間，在解凍中可調(diào)整。用量程準(zhǔn)確的 050度分辨率為 ，經(jīng)觀察若顯示溫度與測量溫度不一致，可按溫度“ +， ”鍵若干次直至兩者溫度相同。 ：輸血科主任負(fù)責(zé)對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程監(jiān)督執(zhí)行。 ，應(yīng)事先采取血標(biāo)本作血型鑒定，填寫在輸血申請(qǐng)單上，以便核 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號(hào) ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 14 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 對(duì)。 3400r/min離心 15秒，然后把上清液倒掉，不要瀝干，讓試管底殘留 。 如果主側(cè)管和次側(cè)管或單獨(dú)一側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集不散開，則為 抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，表示配血結(jié)果不相合，禁忌輸用。 ： 所有申請(qǐng)輸用全血及紅細(xì)胞懸液的標(biāo)本。 血標(biāo)本標(biāo)簽填寫必須與申請(qǐng)單上的病人姓名、科別、床號(hào)、編號(hào)完全一致。 6 試劑 試劑名稱： DiaMed低離子 /抗人球蛋白 卡 試劑生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 試劑說明 ： 每張 DiaMed凝膠卡由 6個(gè)微孔管組成 ： IDCentrifuge 12SⅡ離心機(jī) 孵育器： IDIncubator 37SI臺(tái)式保溫箱 生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 8. 操作步 驟 預(yù)備 取 DiaMed低離子 /抗人球蛋白 卡 ，將有條形碼的一邊面向?qū)嶒?yàn)者；并在此面標(biāo)記病人標(biāo)本及獻(xiàn)血員的編號(hào)。即使自動(dòng)化判讀機(jī)也很難將微弱的血細(xì)胞凝集與陰性反應(yīng)區(qū)別開來。 12 參考文獻(xiàn) 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第三版