【正文】 trifuge 12SⅡ離心機 孵育器： IDIncubator 37SI臺式保溫箱 生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達亞美 ） 8. 操作步 驟 預(yù)備 取 DiaMed低離子 /抗人球蛋白 卡 ，將有條形碼的一邊面向?qū)嶒炚撸徊⒃诖嗣鏄?biāo)記病人標(biāo)本及獻血員的編號。急診搶救輸血，未能事先采血檢測血型，則要求注明急診字樣由專人核對、貼標(biāo)簽、采取血標(biāo)本送檢。 血標(biāo)本標(biāo)簽填寫必須與申請單上的病人姓名、科別、床號、編號完全一致。 微柱凝膠檢測法是凝膠分子篩技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，通過調(diào)節(jié)凝膠（葡聚糖）的濃度，控制凝膠間隙大小，只允許游離紅細胞通過，從而達到分離游離紅細胞和凝集紅細胞的目的。 ： 所有申請輸用全血及紅細胞懸液的標(biāo)本。此時可在最后加懸浮液時，將試管立即放入 37℃水浴中，輕輕轉(zhuǎn)動試管，并在 30秒內(nèi)觀察結(jié)果。 如果主側(cè)管和次側(cè)管或單獨一側(cè)管內(nèi)紅細胞凝集不散開，則為 抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，表示配血結(jié)果不相合，禁忌輸用。如果在 301min內(nèi)凝集散開，表示凝聚胺引起的非特異性聚集，配血結(jié)果相合 。 3400r/min離心 15秒，然后把上清液倒掉，不要瀝干，讓試管底殘留 。 。 ，應(yīng)事先采取血標(biāo)本作血型鑒定，填寫在輸血申請單上，以便核 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ04 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （凝聚胺法） 生效日期： 20210211 第 14 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 對。 血標(biāo)本容 器要清潔干燥并事先貼好標(biāo)簽，加血標(biāo)本前要認真核對、無誤后再將血液注入。 ：輸血科主任負責(zé)對該標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程監(jiān)督執(zhí)行。 ，保證水溫正確。用量程準(zhǔn)確的 050度分辨率為 ，經(jīng)觀察若顯示溫度與測量溫度不一致，可按溫度“ +， ”鍵若干次直至兩者溫度相同。此時應(yīng)接好進水管和出水管，儀器清洗過程如下，先排空加熱箱中的水，再注入清水，開始循環(huán)，然后排空水，清洗完成時，儀器自動返回到初始狀態(tài)，可根據(jù)用戶水質(zhì)的好壞，一般 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ03 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 冰凍血漿解融操作規(guī)程 生效日期： 20210211 第 12 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 每周清洗 1至 2次。 ： 時間設(shè)定，一 般設(shè)定 18 分鐘，通過按“ +”或“ ”來調(diào)整設(shè)定時間，在解凍中可調(diào)整。 2 范圍 使用于本院輸血科 3 職責(zé) 發(fā)血、值班崗位完成 4 原理 KHR1型冰凍血漿解凍箱采用加熱箱、解凍箱、循環(huán)管路、儀器箱等組成的全自動循環(huán)冰凍血漿系統(tǒng)，水在加熱箱內(nèi)被加熱至設(shè)定溫度，然后由循環(huán)泵送入解凍槽，冰凍血漿袋放在專用的不銹鋼解凍架中，水的流體靜壓力包住血漿袋，與冰凍血漿進行熱交 換后再循環(huán)金加熱箱內(nèi)加熱。 ，速度不宜過快或過慢，以防假陽性或假陰性結(jié)果。 ，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細菌污 染。 5%為宜，過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當(dāng)，反應(yīng)不明顯易誤判。 ：凝集這為陽性反應(yīng)，反之為陰性反應(yīng)。 法 1滴抗 D試劑。 — 表示陰性，鏡下未見凝集，紅細胞均勻分布。 2 + = 紅細胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細胞。 D試劑。 6 試劑 ： RhD(IgM)血型定型試劑（單克隆抗體） ：德國 。標(biāo)本應(yīng)無溶血，標(biāo)簽填寫內(nèi)容齊全，無涂改。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， P89 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 8 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital Rh（ D）血型鑒定（鹽水法） 1 原理： 一般臨床上根據(jù)紅細胞表面 D抗原的有無，將 Rh血型分為 RH陰性和陽性。 IgM抗 A 和抗 B 與相應(yīng)紅細胞的反應(yīng)溫度以 4oC 為最強，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍再室溫（ 20~24oC）內(nèi)進行試驗， 37oC可使反應(yīng)減弱。 11注意事項 ，用畢后應(yīng)放置冰箱保存， 以免細菌污染。 ⑵能與大多數(shù)成年人的血清凝集，不管有無相應(yīng)的同種抗體。 （ 3） 檢查唾液中是否有 A、 B物質(zhì)， 如果時分泌型，可檢出 A物質(zhì)而無 B物質(zhì)。應(yīng)注意不應(yīng)先加鹽水 1滴于受檢者血清中而后和紅細胞作試驗，以免使血清中抗體被稀釋。 ，應(yīng)將細胞及血清試驗至少在室溫和 4oC放置 30min，用顯微鏡檢查核實。 將紅細胞洗滌數(shù)次，配成 5%鹽 水細胞懸液，用抗 A、抗 B、抗 A1，抗 A+B 及抗 H做試驗可以得到其它有用的信息。 。 各種原因引起的紅細胞溶解，誤判為不凝集。 ，抗原抗體比例不適當(dāng)，使反應(yīng)不明顯，誤判為陰性反應(yīng)。 5%為宜，過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當(dāng)，反應(yīng)不明顯易誤判。 ，使血清與細胞充分混勻，連續(xù)約 15min，以肉眼觀察有無凝集（或溶血）反應(yīng)。 MF = 混合凝集外觀（ mixed field）是指鏡下可見少數(shù)紅細胞凝集，而極大多數(shù)紅細胞仍成分散分布。 3 + = 紅細胞凝集成數(shù)小塊，血清尚清晰。 ，使沉于管底的紅細胞浮起，先以肉眼觀察有無凝集（或溶血）現(xiàn)象。分型血清各 1滴于試管底部，再以滴管分別加入受檢者 5%紅細胞鹽水懸液 1滴， 混合。 5 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn) ：細菌污染、溶血標(biāo)本標(biāo)簽填寫內(nèi)容不齊全或有涂改、標(biāo)本量太少不能作檢測。 ：抗凝要求 EDTAK2抗凝管或干燥管均可。成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫管理 文件編號： CDEYLABXKGL27 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 輸血實驗室質(zhì)量控制和管理制度 生效日期： 20210808 第 1 頁 共 2 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ01 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定（鹽水法） 生效日期： 20210211 第 2 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ01 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定（鹽水法） 生效日期： 20210211 第 3 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital ABO 血型鑒定（鹽水法） 1 原理 根據(jù)紅細胞上有或無 A抗原或 /和 B抗原，將血型分為 A型、 B型、 AB型和 O型 4種。 2 標(biāo)本采集： 標(biāo)本種類：采集靜脈血 34ml 待凝固后分離血清，將紅細胞用 %生理鹽水配成 5%紅細胞懸液。 4 標(biāo)本運輸 ：室溫運輸。 7 儀器 ： 802上海手術(shù)器械廠 ：上海醫(yī)療器械廠 ： OLYMPUS(日本 ) 8 操作步驟及結(jié)果判斷： 取潔凈小試管（內(nèi)徑 10mm*60mm） 3支，分別標(biāo)明抗 A、抗 B和抗 A+B，用滴管分別成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ01 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定（鹽水法） 生效日期： 20210211 第 4 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 加抗 A、抗 B和抗 A+B。 1000r/min離心 1min。 4 + = 紅細胞凝集成一大塊，血清清晰透明。 +/ = 鏡下可見數(shù)個紅細胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細胞。 （或白瓷板 1塊），用蠟筆劃成方格，標(biāo)明 A細胞、 B細胞和 O細胞，用滴管各加受檢者血清 2滴，再分別用滴管滴加 A、 B和 O型試劑紅細胞懸液 1滴。 10超出范圍結(jié)果處理 ： 細胞自凝：在冬天 氣溫較低時，某些病人血清中含有冷凝集素而導(dǎo)致假陽性；若有此懷疑，建議在最后滴入懸浮液時將試管立即置入 37℃水浴中，輕輕轉(zhuǎn)動試管混勻，并在 30秒內(nèi)觀察結(jié)果。如抗 A血清效價不高，可將 A亞型誤定為 O型， AB型誤定為 B型。 A及 /或抗 B抗體，如丙種球蛋白缺乏癥。 ，如自身抗 I，常引起干擾。初步的檢查步驟包括： 1份新鮮血液標(biāo)本，這樣可以糾正因污染或搞錯樣本造成的不符合。如果懷疑時抗 I，用 O型（或ABO相合的）臍血紅細胞檢查。 ，加等滲鹽水 1滴，混合，往往可使緡錢現(xiàn)象消失。 （ 2） 用受檢者紅細胞與自身血清作試驗，血清中的抗 B不凝集自身紅細胞上的類 B抗原。多凝集紅細胞具有以下特點： ⑴能被人和許多家兔的血清凝集。 ⑸ 如有條件可用外源凝集素加以鑒別。 操作方法應(yīng)按規(guī)定，一般應(yīng)先加血清，然后再加紅細胞懸液，以便容易核實是否漏加血清。 、記錄，避免筆誤。 ：抗凝要求 EDTAK2抗凝管或干燥管均可。 5 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn) ：細菌污染、溶血標(biāo)本標(biāo)簽填寫內(nèi)容不齊全或有涂改、標(biāo)本量太少不能作檢測。 2滴 2%5%紅細胞生理鹽水懸液于抗 D混合試劑中。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 9 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 3 + = 紅細胞凝集成數(shù)小塊，血 清尚清晰。 MF = 混合凝集外觀（ mixed field）是指鏡下可見少數(shù)紅細胞凝集，而極大多數(shù)紅細胞仍成分散分布。出現(xiàn)陰性、弱陽性或結(jié)果不清楚時，進行試管法試驗。 ，肉眼或顯微鏡觀察有無凝集現(xiàn)象。 10超出范圍結(jié)果處理： 細胞自凝：在冬天氣溫較低時，某些病人血清中含有冷凝集素而導(dǎo)致假陽性；若有此懷疑，建議在最后滴入懸浮液時將試管立即置入 37℃水浴中， 輕輕轉(zhuǎn)動試管混勻，并在 30秒內(nèi)觀察結(jié)果。 ，因 Rh抗原抗體凝集反應(yīng)的凝集塊比較脆弱，觀察反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)輕輕彈動試管，不可用力搖動。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ02 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 Rh（ D）血型鑒定 （鹽 水法） 生效日期： 20210211 第 10 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital IgM抗 D與相應(yīng)紅細胞的反應(yīng)溫度以 4oC為最強，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍再室溫（ 20~24oC）內(nèi)進行試驗， 37oC可使反應(yīng)減弱。 文獻 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， P89 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ03 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 冰凍血漿解融操作規(guī)程 生效日期： 20210211 第 11 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 冰凍血漿解融操作規(guī)程 1 目的 融化新鮮冰凍血漿，使冰凍血漿從固態(tài)裝化解為液態(tài)狀，利于臨床輸注。 5 操作 ：按《 KHR1型冰凍血漿融化箱》使用說明書進行安裝 ，連接進水管、排水管 若顯示屏顯示“缺水”時，請采用人工加水，當(dāng)水位達到時，儀器會自動進入預(yù)溫狀態(tài)。具體方法：在圖 2狀態(tài)下，按動“左右”鍵使“清洗”反顯，再按“確定”，及其進入清洗狀態(tài)。具體方法如下：在關(guān)機狀態(tài)下，按住面板上的“上下”檔開機，循環(huán)泵隨即打開，加熱箱內(nèi)的水上升至解凍槽內(nèi)，溫度窗口顯示即時水溫。 ，沒半年對水溫測試是否與版面溫度顯示相同。 申請輸用手工血小板的 標(biāo)本。 . 標(biāo)本采集 標(biāo)本種類：新抽取的抗凝血 標(biāo)本要求： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 2ml 的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 標(biāo)本采集要求 采血時，一定要認真核對病室、床號和病人姓名，無誤后再抽血。 采血時要防止溶血及多量組織液混入