【正文】 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強(qiáng)抽血時）在病人輸液時采集標(biāo)本，必須從未輸液的一側(cè)肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 . 標(biāo)本運(yùn)輸 室溫 運(yùn)輸 . 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn) 溶血 、 受污染，或者含有凝塊的樣品。 LISS液 ，再加凝聚胺液 2滴，混合均勻。 2滴，輕輕轉(zhuǎn)動試管混合并同時觀察結(jié)果。 如果主側(cè)管和次側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集散開，則為凝集胺引起的非特異性，表示配血結(jié)果相合，可以輸用。 ，可影響配血結(jié)果的判斷。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學(xué)出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 16 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（微柱凝膠法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細(xì)胞分別與獻(xiàn)血員血細(xì)胞和血清進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，以排除各種因素引起的輸血反應(yīng)（如凝集或溶血），保證用血安全。 交叉配血就是將 患者血清和血細(xì)胞分別與獻(xiàn)血員血細(xì)胞和血清進(jìn)行主次測交叉配 試驗(yàn)，以排除各種因素引起的輸血反應(yīng)（如凝集或溶血），保證用血安全。 血標(biāo)本容器要清潔干燥并事先貼好標(biāo)簽，加血標(biāo)本前要認(rèn)真核對、無誤后再將血液注入。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 17 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 非急診病人輸血前，應(yīng)事先采取血標(biāo)本作血型鑒定，填寫在輸血申請單上，以便核對。 。 ： 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 18 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 40uL加樣槍取 40uL受血者血清加入主側(cè)管； 40uL加樣槍取 40uL獻(xiàn)血員血清加入次側(cè)管 10分鐘； 5分鐘 ，記錄。大多數(shù)傳統(tǒng)測試法仍然依賴于對液體環(huán)境下凝集反應(yīng)的解釋，由于缺乏客觀性的反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)結(jié)果的判讀準(zhǔn)確性因人而易。 11 注意事項(xiàng) 變質(zhì)的或受到細(xì)菌等物污染的樣品，試劑可能會帶來錯誤的陰或陽性結(jié)果； 因?yàn)閮\(yùn)不當(dāng)?shù)脑?，有時會發(fā)現(xiàn)微管的頂部存 在 小水珠或 氣 泡，在使用類似的凝膠卡前先離心，消除這類問題，如果無法消除，請棄之不用； 如果發(fā)現(xiàn) DiaMed卡封口損壞，或者 管內(nèi)膠量不足或干裂 ，請不要 使用 ； 用 非達(dá)亞美 2號 稀釋液來配制紅血球懸液可能會導(dǎo)致不良結(jié)果 ， 所用的紅血球的懸液濃度 與 建議使用的濃度 應(yīng)相 符 。目的在于避免血清里的抗體提前被抗人球試劑中和，從而造成假陰性結(jié)果。 抗體篩查就是利用 3瓶抗體篩選細(xì)胞與待檢（患者）血清反應(yīng)，如果待檢（患者）血清中存在抗體，則應(yīng)該可以和這 3瓶抗體篩選細(xì)胞中至少 1瓶顯示反應(yīng)。 ，加血標(biāo)本前要認(rèn)真核對、無誤后再將血液注入 。 ，應(yīng)事先采取血標(biāo)本作血型鑒定，填寫在輸血申請單上，以便核對。 6. 試劑 試劑名稱： DiaMed凝膠卡、 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)抗體篩查細(xì)胞（ %） 、達(dá)亞美 2號稀釋液（ Dil2） 試劑生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 試劑說明 ： 每張 DiaMed凝膠卡由 6個微孔管 (兩人份 )組成 DiaMedID Micro Typing System 離心機(jī)： IDCentrifuge 12 SⅡ 孵育器： IDIncubator 37 SⅠ 生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 8. 操作步驟 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)抗體篩查細(xì)胞（ %） ， 2 號稀釋液室溫平衡。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ06 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 抗體篩查試驗(yàn) （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 22 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 10. 臨床意義 ： 在交叉配血試驗(yàn)前或輸血前，提前進(jìn)行抗體篩選和鑒定檢測，可發(fā)現(xiàn)具有臨床意義的不規(guī)則抗體，提醒臨床醫(yī)生需提前備血，以防緊急用血時找不到相容的獻(xiàn)血員； 抗篩可以縮短交叉配血時間，快速獲得相容的供血 通過抗體篩選 /鑒定試驗(yàn)，可以提高不相容性檢出率（ %）。大多數(shù)傳統(tǒng)測試法仍然依賴于對液體環(huán)境下凝集反應(yīng)的解釋，由于缺乏客觀性的反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)結(jié)果的判讀準(zhǔn)確性因人而易。 12. 注意事項(xiàng) 變質(zhì)的或受到細(xì)菌等物污染的樣品，試劑可能會帶來錯誤的陰或陽性結(jié)果； 因?yàn)閮\(yùn)不當(dāng)?shù)脑?，有時會發(fā)現(xiàn)微管的頂部存 在 小水珠或 氣 泡，在使用類似的凝膠卡前先離心，消除這類問題，如果無法消除，請棄之不用； 如果發(fā)現(xiàn) DiaMed卡封口損壞，或者 管內(nèi)膠量不足或干裂，請不要 使用 ； 使用 非達(dá)亞美 2 號 稀釋液來配制紅血球懸液可能會導(dǎo)致不良結(jié)果 ， 所用的紅血球的懸液濃度 與 建議使用的濃度 應(yīng)相 符 。目的在于避免血清里的抗體提前被抗人球試劑中和，從而造成假陰性結(jié)果。 試劑 B血清，效價 128， 28℃避光保存，有效期為一年，在效期內(nèi)使用 . Ⅱ Ⅱ名稱：人 ABO血型反定型紅細(xì)胞試劑 Ⅱ生產(chǎn)廠家：上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司 Ⅱ組成： A B及 O型試劑紅細(xì)胞鹽水懸液。110管的稀釋度分別為 1： 1， 1： 2， 1： 4， 1： 8， 1： 16， 1： 32， 1： 64， 1： 128， 1： 256，1： 512。 ：于另外 10支試管中每管加入 2%O紅細(xì)胞懸液 。 ，說明有前帶現(xiàn)象發(fā)生。 ，可能產(chǎn)生的誤差越大。 3 職責(zé) 輸血科工作人員需按本制度常規(guī)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控操作。 ：詳見“抗血清效價測定 SOP” 。 D血清質(zhì)控 ：效價，陰性質(zhì)控，陽性質(zhì)控，有效期，外觀 ：來源：本實(shí)驗(yàn)室檢測出的 O型 Rh陽性紅細(xì)胞和 O型 Rh陰性紅細(xì)胞：制備：洗滌兩種紅細(xì)胞并制備成 40%的紅細(xì)胞懸液；保存： 28℃儲存。 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ08 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 室內(nèi)質(zhì)量控制 生效日期： 20210211 第 27 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 質(zhì)控品： IgG 類抗體陽性質(zhì)控品：標(biāo)化后的 IgG 抗 D 與 O 型 RhD 陽性紅細(xì)胞； IgG類抗體陰性質(zhì)控品： AB型血清（經(jīng)確認(rèn)無不規(guī)則抗體）與 O型 RhD陽性紅細(xì)胞。 IgM類抗體質(zhì)控 :3個 ABO血型互不相同的 EDTA抗凝血全血標(biāo)本，其中一個作為受者，另外 2個作為供者，進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。符合以上視為在空，否則為失控。 ：每日開始試驗(yàn)前，按 ABO、 RH 血型鑒定 SOP常規(guī)操作。 作：每次開始試驗(yàn)前，按微柱凝膠法交叉配血 SOP常規(guī)操作。 （微柱凝膠法） 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ08 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 室內(nèi)質(zhì)量控制 生效日期： 20210211 第 28 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 質(zhì)控品 :衛(wèi)生部室間質(zhì)評活動中選擇 1 個含有已知類型不規(guī)則抗體的血清標(biāo)本及一個不含有不規(guī)則抗體的血清標(biāo)本。 5 相關(guān)文件 《臨床輸血質(zhì)量管理》《輸血相容性檢測室內(nèi)質(zhì)量控制管理》 6 記錄 室內(nèi)質(zhì)控記錄表 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ09 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 血型鑒定 （微柱凝膠法 DiMed） 生效日期： 20210211 第 29 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 血型鑒定（微柱凝膠法 DiMed） ： 為了進(jìn)一步提高 ABO和 RH血型鑒定的檢測 水平，以最大程度保障臨床輸血的安全性。紅細(xì)胞上有 A抗原的 A型血清中有抗 B，紅細(xì)胞上有 B抗原的 B型血清中有抗 A，紅細(xì)胞上有 A和 B抗原的AB型血清中無抗 A和抗 B，紅細(xì)胞上無 A和 B抗原的 O型血清中有抗 A和抗 B。 5 標(biāo)本 ：新抽取的抗凝血 ： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 5ml的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 離心要求：轉(zhuǎn)速必須大于 3500轉(zhuǎn) /分，時間必須大于 15分鐘 標(biāo)本采集要求 采血時，一定要認(rèn)真核對病室、床號和病人姓名，無誤后再抽血。 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ09 版本 /修訂號 ： B/0 主題內(nèi)容 血型鑒定 （微柱凝膠法 DiMed） 生效日期： 20210211 第 30 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 采血時要防止溶血及多量組織液混入 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強(qiáng)抽血時）在病人輸液時采集標(biāo)本，必須從未輸液的一側(cè)肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 6 試劑 試劑名稱： DiaMed凝膠卡、 （ %）、達(dá)亞美 2號稀釋液（ Dil2） 試劑生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 試劑說明 ： 每張 DiaMed凝膠卡由 6個微孔管組成 （ ABDCtrlAB） DiaMedID Micro Typing System 離心機(jī)： IDCentrifuge 12 SⅡ 孵育器： IDIncubator 37 SⅠ 生產(chǎn)廠家： DiaMed（ 瑞士達(dá)亞美 ） 8. 操作步驟 （ %）， 2號稀釋液室溫平衡。 判讀結(jié)果。質(zhì)控管應(yīng)為（ ）陰性 10. 臨床意義 ： ABO、 Rh血型鑒定不合出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)。用 3740℃ 生理鹽水洗滌紅細(xì)胞可去除紅細(xì)胞表面附著的導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。 ：適用于目前輸血科所有血型檢測標(biāo)本。 ABO輸血不相容存在潛在的嚴(yán)重后果，因此必須對輸血接受者和獻(xiàn)血者進(jìn)行可靠測試，以確認(rèn)是否存在 A和 B抗 原、紅細(xì)胞 ABO定型的結(jié)果通過使用已知的 A1 和 B 試劑紅細(xì)胞進(jìn)行反定型（血清）檢測加以確認(rèn)。若存在對應(yīng)于抗原的抗體，則包含抗原的正常人紅細(xì)胞將會 凝集 。 血標(biāo)本容器要清潔干燥并事先貼好標(biāo)簽，加 血標(biāo)本前要認(rèn)真核對、無誤后再將血液注入。 . 標(biāo)本儲存 待測標(biāo)本在 28℃ 下的保存時間為 72 小時 ，已檢測標(biāo)本 28℃ 冰箱保存 7天。 試劑說明 ： 每張 ORTho BioVueABORH 正反定型血型定型試劑卡有 6 個微柱組成，每一柱中含有緩沖液，其成分為牛血清蛋白、大分子增強(qiáng)劑以及 %（ W/V） 疊氮鈉和 乙二胺四乙酸（ EDTA） . 離心機(jī)： ORTho BioVue System Heat Block32 孵育器： ORTho BioVue System Centrifuge 生產(chǎn)廠家： ORThoClinical Diagnostics,Inc 8. 操作步驟 在凹板的凹槽（或試管）中分別加 1ml生理鹽水備用；取血型卡放置到室溫，將有條形碼的一邊面向?qū)嶒?yàn)者，并在此面空白處標(biāo)記病人標(biāo)本編號。在反定型實(shí)驗(yàn)中無論是否發(fā)生凝集，存在溶血均視為陽性結(jié)果。 溶血會導(dǎo)致玻璃珠上方呈淺粉色至紅色。 2+反應(yīng) 發(fā)生凝集的紅細(xì)胞分布于整個柱體。聚集帶的上方有少量紅細(xì)胞 0陰性 所有紅細(xì)胞穿過玻璃珠的縫隙，在柱的底部形成一個平整的紅細(xì)胞聚集帶。 12. 超出范圍結(jié)果處理 紅細(xì)胞自凝：冷凝集素增高是最為常見的原因。 14 參考文獻(xiàn) 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第三版） 黃德明 《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)新技術(shù)與操作規(guī)程全書》 DiaMed 血型配血微量定型系統(tǒng)（ DiaMedID Micro Typing System）操作技術(shù)手冊。 血標(biāo)本標(biāo)簽填寫必須與申請單上的病人姓名、科別、床號、編號完全一致。急診搶救輸血，未能事先采血檢測血型，則要求注明急診字樣由專人核對、貼標(biāo)簽、采取血標(biāo)本送檢。 5 試劑