【正文】 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強抽血時）在病人輸液時采集標本，必須從未輸液的一側肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 . 標本運輸 室溫 運輸 . 標本拒收標準 溶血 、 受污染，或者含有凝塊的樣品。 LISS液 ，再加凝聚胺液 2滴，混合均勻。 2滴，輕輕轉動試管混合并同時觀察結果。 如果主側管和次側管內紅細胞凝集散開，則為凝集胺引起的非特異性，表示配血結果相合，可以輸用。 ，可影響配血結果的判斷。 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編，全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版） .南京：東南大學出版社， 1997， 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 16 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 交叉配血（微柱凝膠法） ： 在臨床用血前將患者血清和血細胞分別與獻血員血細胞和血清進行交叉配血試驗，以排除各種因素引起的輸血反應（如凝集或溶血），保證用血安全。 交叉配血就是將 患者血清和血細胞分別與獻血員血細胞和血清進行主次測交叉配 試驗，以排除各種因素引起的輸血反應（如凝集或溶血），保證用血安全。 血標本容器要清潔干燥并事先貼好標簽，加血標本前要認真核對、無誤后再將血液注入。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 17 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 非急診病人輸血前，應事先采取血標本作血型鑒定，填寫在輸血申請單上，以便核對。 。 ： 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ05 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 交叉配血 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 18 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 40uL加樣槍取 40uL受血者血清加入主側管； 40uL加樣槍取 40uL獻血員血清加入次側管 10分鐘； 5分鐘 ，記錄。大多數(shù)傳統(tǒng)測試法仍然依賴于對液體環(huán)境下凝集反應的解釋，由于缺乏客觀性的反應終點，反應結果的判讀準確性因人而易。 11 注意事項 變質的或受到細菌等物污染的樣品，試劑可能會帶來錯誤的陰或陽性結果； 因為儲運不當?shù)脑?，有時會發(fā)現(xiàn)微管的頂部存 在 小水珠或 氣 泡，在使用類似的凝膠卡前先離心，消除這類問題，如果無法消除，請棄之不用； 如果發(fā)現(xiàn) DiaMed卡封口損壞，或者 管內膠量不足或干裂 ，請不要 使用 ； 用 非達亞美 2號 稀釋液來配制紅血球懸液可能會導致不良結果 ， 所用的紅血球的懸液濃度 與 建議使用的濃度 應相 符 。目的在于避免血清里的抗體提前被抗人球試劑中和，從而造成假陰性結果。 抗體篩查就是利用 3瓶抗體篩選細胞與待檢（患者）血清反應，如果待檢（患者）血清中存在抗體，則應該可以和這 3瓶抗體篩選細胞中至少 1瓶顯示反應。 ，加血標本前要認真核對、無誤后再將血液注入 。 ，應事先采取血標本作血型鑒定，填寫在輸血申請單上，以便核對。 6. 試劑 試劑名稱： DiaMed凝膠卡、 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標準抗體篩查細胞（ %） 、達亞美 2號稀釋液（ Dil2） 試劑生產廠家： DiaMed（ 瑞士達亞美 ） 試劑說明 ： 每張 DiaMed凝膠卡由 6個微孔管 (兩人份 )組成 DiaMedID Micro Typing System 離心機： IDCentrifuge 12 SⅡ 孵育器： IDIncubator 37 SⅠ 生產廠家： DiaMed（ 瑞士達亞美 ） 8. 操作步驟 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標準抗體篩查細胞（ %） ， 2 號稀釋液室溫平衡。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ06 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 抗體篩查試驗 （微柱凝膠法） 生效日期： 20210211 第 22 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 10. 臨床意義 ： 在交叉配血試驗前或輸血前，提前進行抗體篩選和鑒定檢測，可發(fā)現(xiàn)具有臨床意義的不規(guī)則抗體，提醒臨床醫(yī)生需提前備血，以防緊急用血時找不到相容的獻血員； 抗篩可以縮短交叉配血時間，快速獲得相容的供血 通過抗體篩選 /鑒定試驗，可以提高不相容性檢出率（ %）。大多數(shù)傳統(tǒng)測試法仍然依賴于對液體環(huán)境下凝集反應的解釋，由于缺乏客觀性的反應終點，反應結果的判讀準確性因人而易。 12. 注意事項 變質的或受到細菌等物污染的樣品，試劑可能會帶來錯誤的陰或陽性結果； 因為儲運不當?shù)脑?，有時會發(fā)現(xiàn)微管的頂部存 在 小水珠或 氣 泡，在使用類似的凝膠卡前先離心，消除這類問題，如果無法消除，請棄之不用； 如果發(fā)現(xiàn) DiaMed卡封口損壞，或者 管內膠量不足或干裂，請不要 使用 ； 使用 非達亞美 2 號 稀釋液來配制紅血球懸液可能會導致不良結果 ， 所用的紅血球的懸液濃度 與 建議使用的濃度 應相 符 。目的在于避免血清里的抗體提前被抗人球試劑中和，從而造成假陰性結果。 試劑 B血清，效價 128， 28℃避光保存，有效期為一年，在效期內使用 . Ⅱ Ⅱ名稱：人 ABO血型反定型紅細胞試劑 Ⅱ生產廠家：上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司 Ⅱ組成： A B及 O型試劑紅細胞鹽水懸液。110管的稀釋度分別為 1： 1， 1： 2， 1： 4， 1： 8， 1： 16， 1： 32， 1： 64， 1： 128， 1： 256，1： 512。 ：于另外 10支試管中每管加入 2%O紅細胞懸液 。 ，說明有前帶現(xiàn)象發(fā)生。 ，可能產生的誤差越大。 3 職責 輸血科工作人員需按本制度常規(guī)進行室內質控操作。 ：詳見“抗血清效價測定 SOP” 。 D血清質控 ：效價，陰性質控，陽性質控，有效期，外觀 ：來源：本實驗室檢測出的 O型 Rh陽性紅細胞和 O型 Rh陰性紅細胞：制備：洗滌兩種紅細胞并制備成 40%的紅細胞懸液；保存： 28℃儲存。 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ08 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 室內質量控制 生效日期： 20210211 第 27 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 質控品： IgG 類抗體陽性質控品：標化后的 IgG 抗 D 與 O 型 RhD 陽性紅細胞； IgG類抗體陰性質控品： AB型血清（經確認無不規(guī)則抗體）與 O型 RhD陽性紅細胞。 IgM類抗體質控 :3個 ABO血型互不相同的 EDTA抗凝血全血標本，其中一個作為受者，另外 2個作為供者，進行交叉配血試驗。符合以上視為在空，否則為失控。 ：每日開始試驗前，按 ABO、 RH 血型鑒定 SOP常規(guī)操作。 作：每次開始試驗前，按微柱凝膠法交叉配血 SOP常規(guī)操作。 （微柱凝膠法） 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXK CZ08 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 室內質量控制 生效日期： 20210211 第 28 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 質控品 :衛(wèi)生部室間質評活動中選擇 1 個含有已知類型不規(guī)則抗體的血清標本及一個不含有不規(guī)則抗體的血清標本。 5 相關文件 《臨床輸血質量管理》《輸血相容性檢測室內質量控制管理》 6 記錄 室內質控記錄表 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ09 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 血型鑒定 （微柱凝膠法 DiMed） 生效日期： 20210211 第 29 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 血型鑒定（微柱凝膠法 DiMed） ： 為了進一步提高 ABO和 RH血型鑒定的檢測 水平，以最大程度保障臨床輸血的安全性。紅細胞上有 A抗原的 A型血清中有抗 B，紅細胞上有 B抗原的 B型血清中有抗 A，紅細胞上有 A和 B抗原的AB型血清中無抗 A和抗 B，紅細胞上無 A和 B抗原的 O型血清中有抗 A和抗 B。 5 標本 ：新抽取的抗凝血 ： 抗凝劑： EDTA（濃度 15g/L）或枸櫞酸鈉（濃度 32g/L）抗凝 采血量：至少不低于 5ml的靜脈血（加入試管后注意 與 抗凝劑混勻） 離心要求：轉速必須大于 3500轉 /分，時間必須大于 15分鐘 標本采集要求 采血時，一定要認真核對病室、床號和病人姓名，無誤后再抽血。 成都市第二 人民醫(yī)院檢驗科 血庫 SOP 文件編號： CDEYLABXKCZ09 版本 /修訂號 ： B/0 主題內容 血型鑒定 （微柱凝膠法 DiMed） 生效日期： 20210211 第 30 頁 共 48 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 采血時要防止溶血及多量組織液混入 （多發(fā)生在靜脈穿刺不順利勉強抽血時）在病人輸液時采集標本，必須從未輸液的一側肢體抽取，絕不允許在輸液管接頭處采集。 6 試劑 試劑名稱： DiaMed凝膠卡、 （ %）、達亞美 2號稀釋液（ Dil2） 試劑生產廠家： DiaMed（ 瑞士達亞美 ） 試劑說明 ： 每張 DiaMed凝膠卡由 6個微孔管組成 （ ABDCtrlAB） DiaMedID Micro Typing System 離心機： IDCentrifuge 12 SⅡ 孵育器： IDIncubator 37 SⅠ 生產廠家： DiaMed（ 瑞士達亞美 ） 8. 操作步驟 （ %）， 2號稀釋液室溫平衡。 判讀結果。質控管應為（ ）陰性 10. 臨床意義 ： ABO、 Rh血型鑒定不合出現(xiàn)溶血性輸血反應。用 3740℃ 生理鹽水洗滌紅細胞可去除紅細胞表面附著的導致紅細胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。 ：適用于目前輸血科所有血型檢測標本。 ABO輸血不相容存在潛在的嚴重后果，因此必須對輸血接受者和獻血者進行可靠測試，以確認是否存在 A和 B抗 原、紅細胞 ABO定型的結果通過使用已知的 A1 和 B 試劑紅細胞進行反定型（血清）檢測加以確認。若存在對應于抗原的抗體，則包含抗原的正常人紅細胞將會 凝集 。 血標本容器要清潔干燥并事先貼好標簽，加 血標本前要認真核對、無誤后再將血液注入。 . 標本儲存 待測標本在 28℃ 下的保存時間為 72 小時 ，已檢測標本 28℃ 冰箱保存 7天。 試劑說明 ： 每張 ORTho BioVueABORH 正反定型血型定型試劑卡有 6 個微柱組成，每一柱中含有緩沖液，其成分為牛血清蛋白、大分子增強劑以及 %（ W/V） 疊氮鈉和 乙二胺四乙酸（ EDTA） . 離心機： ORTho BioVue System Heat Block32 孵育器： ORTho BioVue System Centrifuge 生產廠家： ORThoClinical Diagnostics,Inc 8. 操作步驟 在凹板的凹槽（或試管）中分別加 1ml生理鹽水備用；取血型卡放置到室溫，將有條形碼的一邊面向實驗者，并在此面空白處標記病人標本編號。在反定型實驗中無論是否發(fā)生凝集，存在溶血均視為陽性結果。 溶血會導致玻璃珠上方呈淺粉色至紅色。 2+反應 發(fā)生凝集的紅細胞分布于整個柱體。聚集帶的上方有少量紅細胞 0陰性 所有紅細胞穿過玻璃珠的縫隙，在柱的底部形成一個平整的紅細胞聚集帶。 12. 超出范圍結果處理 紅細胞自凝：冷凝集素增高是最為常見的原因。 14 參考文獻 《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第三版） 黃德明 《現(xiàn)代醫(yī)學檢驗新技術與操作規(guī)程全書》 DiaMed 血型配血微量定型系統(tǒng)（ DiaMedID Micro Typing System）操作技術手冊。 血標本標簽填寫必須與申請單上的病人姓名、科別、床號、編號完全一致。急診搶救輸血，未能事先采血檢測血型，則要求注明急診字樣由專人核對、貼標簽、采取血標本送檢。 5 試劑