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20xx年醫(yī)學(xué)專題—第八篇-血清型-預(yù)覽頁(yè)

 

【正文】 聚焦電泳原理: 所有的氨基酸均為兩性(liǎngx236。 所以,將pH調(diào)到等電點(diǎn)的大小,則大部份 的蛋白質(zhì)將會(huì)沉淀,可以應(yīng)用在電泳,達(dá)到分離 蛋白質(zhì)混合物的目的,這種方法稱為等電聚焦電 泳,第十頁(yè),共一百一十七頁(yè)。 因?yàn)樘堑鞍滋莻?cè)鏈的電荷會(huì)影響蛋白電泳遷移率,第十二頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,典型的印跡實(shí)驗(yàn)包括三個(gè)步驟: ①蛋白質(zhì)的電泳分離 ②將電泳后凝膠上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移(zhuǎny237。,第十五頁(yè),共一百一十七頁(yè)。uyǎn) 不可見(jiàn)(只有在染色后才顯出電泳區(qū) 帶)。nli,第三階段為酶免疫定位。,幾乎任何蛋白質(zhì)都可用于免疫印跡。例如,不 能標(biāo)記的蛋白質(zhì)或不溶于溫和抽提緩沖液 的蛋白質(zhì)等,第十九頁(yè),共一百一十七頁(yè)。)是人類基因組編碼DNA的差異,第二十頁(yè),共一百一十七頁(yè)。h233。受控于Hp座位 上的一對(duì)等位基因Hp1和Hp2,呈共顯性遺傳。ng),等電點(diǎn)為4.1-4.2,電泳 屬于α2-球蛋白組分。ngch233。,第二十四頁(yè),共一百一十七頁(yè)。ng)的Hb釋出,Hp與游 離Hb結(jié)合成復(fù)合物而被肝細(xì)胞攝取、清 除。nɡ)的四聚體,各型之間只有α鏈不同,而β鏈都相同。,HP11 由兩條hp1α和兩條hpβ鏈組 成;HP22 由兩條hp2α鏈和兩條hpβ 鏈組成(zǔ ch233。HP的遺傳為常染色體不 完全顯性,分別由HP1和HP2兩個(gè)基因控 制。ng d224。,血清結(jié)合(ji233。,第三十頁(yè),共一百一十七頁(yè)。h233。nɡ)可將Hp*1基因分為Hp*1F和Hp*1S(F即fast S即slow)。nhu225。nɡ xu232。每個(gè)人的表 型可用簡(jiǎn)單的電泳法加以檢驗(yàn) HP的遺傳為常染色體不完全顯性,分別由 HP1和HP2兩個(gè)基因(jīyīn)控制。)向負(fù)極呈逐漸遞 減趨勢(shì),第三十七頁(yè),共一百一十七頁(yè)。這些個(gè) 體并無(wú)溶血性疾病,第三十九頁(yè),共一百一十七頁(yè)。)胎兒及嬰幼兒的親 權(quán)鑒定時(shí)要注意,第四十頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,Hp-1M型 又稱為修飾表現(xiàn)型2-1,是HP21與 HP22 之間的過(guò)渡型 Hp-1M型的泳譜特點(diǎn)是快泳動(dòng)帶成分比 例增多,而2-2區(qū)的線條非常(fēich225。,HpJ-1型 此型的特點(diǎn)是1-1區(qū)的電泳(di224。 高加索人以Hp2-1占優(yōu)勢(shì),其次為 HP22。nb225。 Hp亞型則需先純化樣品中地 Hp,再使 Hp組分中的α肽鏈變性,還原后方能采 用普通電泳或等電聚焦技術(shù)進(jìn)行分型,第四十七頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,第四十九頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,第三節(jié) 維生素D結(jié)合(ji233。) 性成分(Gc) 一、生化性質(zhì)和生物學(xué)功能 由肝臟合成,分子量為52000-58000,等電點(diǎn)為4.8-5.1,穩(wěn)定性最高60oC,第五十一頁(yè),共一百一十七頁(yè)。tǒng)。nb225。 Gc2-2為靠近負(fù)極側(cè)的單一譜帶; Gc1-1為靠近正極(zh232。 出現(xiàn)在Gc1S正極(zh232。 t243。xu233。,原理 先將待檢標(biāo)本在瓊脂凝膠中進(jìn)行電泳,不同(b249。nɡ)而被分成不同(b249。根據(jù)沉淀弧的數(shù)量、位置和形態(tài),可分析樣品中所含抗原成分及其性質(zhì)。,操作步驟 1. 取潔凈載玻片,澆注融化的瓊脂凝膠,凝固后打孔挖槽。 5. 觀察沉淀線的數(shù)目、形狀和位置。)血漿蛋白免疫電泳。,第六十六頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,第六十七頁(yè),共一百一十七頁(yè)。如沉淀弧數(shù)目不總是與混 合物中應(yīng)有的成分相符。,第六十九頁(yè),共一百一十七頁(yè)。y242。,二、聚丙烯酰胺凝膠電泳法,第七十一頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,圖1 聚丙烯酰胺凝膠不連續(xù)圓盤(pán)電泳示意圖 (A為正面,B為剖面) 1樣品(y224。 C:顯示蛋白質(zhì)樣品(y224。)膠的制備,濃縮(n243。ngd249。,將兩性電解質(zhì)(eg:pH39,pH57)同蛋白質(zhì) 樣品一起加入到已經(jīng)灌好的凝膠中,在電 場(chǎng)下,兩性電解質(zhì)首先達(dá)到它的等電點(diǎn)而 平衡(p237。,電泳(di224。nd236。ng)等電聚焦電泳可以檢出Gc亞型,是目 前國(guó)際公認(rèn)的分型法。,五、Gc在法科學(xué)中的應(yīng)用 Gc在血痕中可以保留較長(zhǎng)的時(shí)間,加之 該基因座遺傳多態(tài)性程度高,20世紀(jì)80 年代,許多國(guó)家和地區(qū)將其用于親權(quán)鑒定 和個(gè)體識(shí)別檢案中 測(cè)定生物(shēngw249。nz224。nli224。,在感染及腫瘤發(fā)生時(shí),患者血清中ORM含 量顯著贈(zèng)高。,二、遺傳及等位基因命名 基因定位于人類第9號(hào)染色體長(zhǎng)臂上, ORM1與ORM2兩個(gè)基因座緊密(jǐnm236。ng)比 ORM2蛋白約高3倍,在等電聚焦電泳 譜上,染色深者為ORM1,染色淺的為 ORM2,第八十五頁(yè),共一百一十七頁(yè)。ngqiě)均以 ORM1*F1最常見(jiàn) 東南亞地區(qū)人群中常檢出ORM2*H19變異 型,其頻率僅次于ORM2*M,第八十七頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,第五節(jié) 免疫球蛋白同種(t243。,氨基(ānjī)端,羧基端,第九十一頁(yè),共一百一十七頁(yè)。u)和抗原特異性的不同,分為 五類:,第九十三頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,二、Gm型與Km型的命名 位于IgG IgG2 、IgG IgA、 IgE 及κ輕鏈上的同種(t243。 ǒu)關(guān)系,第九十六頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,Km型的遺傳 Km系統(tǒng)(x236。)IgG 1Fd段外,其余Gm因 子位于IgG重鏈Fc段,Km位于 κ輕鏈上,第九十九頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,五、Gm型與Km型的測(cè)定 (一)紅細(xì)胞凝結(jié)抑制試驗(yàn) 1.用抗D-Gm/Km血清致敏紅細(xì)胞 2.證實(shí)紅細(xì)胞已被致敏 3.紅細(xì)胞凝結(jié)抑制試驗(yàn) 4.結(jié)果評(píng)價(jià)(p237。x237。,一、生化性質(zhì)與生物學(xué)功能 由肝臟合成,血清中的含量為20003000mg/l,肝臟疾病(j237。,鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白屬β球蛋白。,第一百零五頁(yè),共一百一十七頁(yè)。游離鐵有毒 性,它與Tf結(jié)合后不僅毒性降低而且還將 鐵運(yùn)送到需鐵部位,第一百零七頁(yè),共一百一十七頁(yè)。 攜帶Fe3+的Tf與受體結(jié)合后經(jīng)內(nèi)吞作用 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),供細(xì)胞內(nèi)合成利用。nfěn)凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳可將轉(zhuǎn) 鐵蛋白分為三個(gè)主要變異型,由正極到負(fù) 極分別是TfB、TfC、TfD,第一百零九頁(yè),共一百一十七頁(yè)。,三、轉(zhuǎn)鐵蛋白的分型 (一)等電聚焦技術(shù)分型 1、血痕(xu232。qīng)中轉(zhuǎn)鐵蛋白的含量約為維 生素D結(jié)合蛋白的3-4倍,因而,當(dāng)維 生素D結(jié)合蛋白分型失敗時(shí),轉(zhuǎn)鐵蛋白分 型往往能夠得出正確的分型結(jié)果,第一百一十二頁(yè),共一百一十七頁(yè)。 d224。) 該酶可導(dǎo)致肺氣腫、新生兒肝炎、肝癌等 疾病。,二、 α1-AT的分型方法 (一)酸性凝膠電泳 (二)等電聚焦(j249。ng)總結(jié),第八章 血清型。B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群中細(xì)胞型別差異也。ORM血清免疫固定可顯示ORM表現(xiàn)型的。
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