【正文】 采用凝膠電泳技術(shù)可將不同個(gè)體的Hp分為三 型，即HP1HP21和HP22 。 Hp*2基因是由兩條Hp*1DNA鏈組合而成，其結(jié)合(ji233。每個(gè)人的表型可用簡(jiǎn)單的 電泳法加以檢驗(yàn)。保證鐵再用于合成代謝。,第二節(jié) 結(jié)合(ji233。,第十七頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。ng)抗原抗體的特異性反應(yīng)識(shí)別特異性 蛋白,第十三頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,在法醫(yī)學(xué)鑒定中應(yīng)用的血清型多數(shù)屬于電泳性質(zhì)上的多態(tài)性，需要(xūy224。,第一節(jié) 概 述,一、血清型的概念 人類(lèi)某些(mǒu xiē)血清蛋白具有遺傳多態(tài)性， 表型有個(gè)體差異，稱(chēng)為血清型 （serum types）,第二頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。i)的縮寫(xiě) 名稱(chēng)加表示等位基因的數(shù)字或字母， 如Hp1－1,第六頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,有些血清型在分型之前，樣品需經(jīng)神經(jīng)(sh233。,第二階段為電轉(zhuǎn)移。個(gè)體差異的實(shí)質(zhì)(sh237。,結(jié)合珠蛋白是一種血漿糖蛋白，分子量約 為90.000。而α1又發(fā)現(xiàn)有α1F及α1S兩種遺傳變異體 。)珠蛋白含量下降，甚至缺如，主 要見(jiàn)于各種血管內(nèi)溶血性疾病，如陣發(fā)性 睡眠性血紅蛋白尿癥和吞豆病 中毒性肝炎、肝硬化等肝臟疾患、急慢性炎 癥、結(jié)核、腫瘤時(shí)結(jié)合珠蛋白含量會(huì)升高。既 往的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，珠蛋白基因的多態(tài)性 對(duì)瘧疾的發(fā)生和人體內(nèi)紅細(xì)胞溶解有著重 要的意義,第三十四頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。 胎兒及新生兒血中測(cè)不出Hp，不能稱(chēng)為 Hp0型，這一點(diǎn)在涉及(sh232。,七、Hp型的分型原理及方法 電泳前先使待測(cè)樣品與血紅蛋白形成 Hp－Hb復(fù)合物。)蛋白,維生素D結(jié)合蛋白(DPB)，又稱(chēng)為型特異(t232。)側(cè)的雙帶，泳動(dòng)速度快于Gc2－2型 Gc2－1為雜合子，其表現(xiàn)型為上述兩種譜帶的綜合,第五十六頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。nɡ)的抗原成分由于所帶電荷、分子量及分子構(gòu)型的差異，在電場(chǎng)作用下的泳動(dòng)速度不同(b249。例如(l236。 因此用免疫電泳技術(shù)檢測(cè)多種混合物時(shí)，至少要用3種 不同的濃度，2種或2種以上的抗體(免疫不同動(dòng)物而得) ，而且要及時(shí)觀察(guānch225。,電泳過(guò)程示意圖 A:為電泳前3層凝膠排列順序，3層膠中均有快離子，慢離子 B:顯示電泳開(kāi)始后，蛋白質(zhì)樣品(y224。ng)，蛋白質(zhì)樣品根據(jù)它自身的等電點(diǎn)分 別向兩極移動(dòng)，最后也達(dá)到平衡。,第四節(jié) 血清(xu232。,在ORM2上有顯性等位基因： ORM2*M 通常產(chǎn)生純合表現(xiàn)型ORM2M 同一個(gè)體血清中ORM1蛋白的含量(h225。,IgG(γ鏈）、IgA（α鏈）、IgM（μ鏈）、 IgD（δ鏈）、 IgE（ε鏈）,人類(lèi)Ig 根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子 結(jié)構(gòu)(ji233。,除了G1m（3）、 G1m（17） 位于(w232。ng)、各種惡性腫瘤時(shí)血漿中的含量減少。,二、轉(zhuǎn)鐵蛋白的遺傳多態(tài)性 定位于３號(hào)染色體長(zhǎng)臂上，由常染色體單 基因座的共顯性基因控制。i m233。ORM1均具有(j249。HP22 由兩條hp2α鏈和兩條hpβ。這與轉(zhuǎn)鐵蛋白 分子上兩個(gè)糖類(lèi)物質(zhì)鏈上的四個(gè)唾液酸殘 基有關(guān),第一百一十三頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。)活性的發(fā)揮所必 不可少的，如血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞 色素、過(guò)氧化物酶等。,第六節(jié) 轉(zhuǎn)鐵蛋白型,轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tf）：,是血液中一種主要的糖蛋白, 負(fù)責(zé)將肝組織(是鐵貯藏的主要場(chǎng)所)的鐵向其它組織的細(xì)胞(x236。 由于各群體調(diào)查Gm因子的種類(lèi)及個(gè)數(shù)不 同，因而(yīn 233。nb225。 ORM具有免疫調(diào)節(jié)功能，可能(kěn233。電泳 結(jié)束后用抗－Gc血清免疫固定，再行蛋白 質(zhì)染色后觀察結(jié)果。Tris甘氨 酸緩沖液作為電極液，于3mA下電泳2h， 普通蛋白染色，Gc位于白蛋白與轉(zhuǎn)鐵蛋白 之間。ngzhu224。ng)鋪平 （2）加樣應(yīng)一次加滿，并防止樣品溢出孔外 （3）電泳過(guò)程中注意防止發(fā)熱，以免影響電泳結(jié)果,第六十八頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。 3. 電泳條件以電壓4~6V/cm或電流2~3mA/cm為宜，電泳1.5~2h。1953年Grabar首先應(yīng)用 該方法進(jìn)行抗原抗體分析。,現(xiàn)已知的等位基因?yàn)椋?Gc*Gc*1F、Gc*1S 均為共顯性等位基因,第五十五頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。ngd249。,六、Hp型的群體遺傳學(xué)調(diào)查結(jié)果 亞洲(y224。nɡ)，這樣可以檢出6種表現(xiàn) 型，分別是Hp1S－1S、 Hp1S－1F、 Hp1F－1F、 Hp2－1F、 Hp2－1S、 Hp2－2,第三十八頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,Hp*2基因(jīyīn)第四、第六外顯子中的第52位，第53位與第111位，第112位密碼子也具有Hp*1F和Hp*1S的差別 因此， Hp*2基因可分為Hp*2FF， Hp*2FS， Hp*2SS三個(gè)等位基因,第三十三頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。i)較多，HP2基 因者結(jié)合血紅蛋白較少，如11型平均結(jié)合 血紅蛋白為118g血紅蛋白/L，12型為 93g血紅蛋白/L，22僅為75g血紅蛋白 /L。,第二十五頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,一、Hp的生化性質(zhì)與生物學(xué)功能 由肝臟合成(h233。sh249?？乖鹊鞍讟悠方?jīng) SDS處理后帶陰電荷，在聚丙烯酰酰凝 膠中從陰極向陽(yáng)極泳動(dòng)，分子量越小， 泳動(dòng)速度就越快。 若氨基酸在某一pH值下其凈電荷為0，且在電場(chǎng) 中不移動(dòng)時(shí)，稱(chēng)此pH值為它的pI值（等電 點(diǎn)）。,血清蛋白的電泳多態(tài)性遺傳標(biāo)記 是指不同個(gè)體血清蛋白的電泳特性的差 異。,這類(lèi)血清型的命名多以抗原所在(suǒz224。如維生素D結(jié)合蛋白普通電泳分 為三種表現(xiàn)型，而等電聚焦技術(shù)分為六種,第九頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,第十四頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,第十八頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。由三種表現(xiàn)型Hp11,Hp21，Hp22。li224。h243。 t243。ngd249。)， 即一類(lèi)細(xì)胞產(chǎn)生Hp2－2，另一類(lèi)細(xì)胞產(chǎn) 生Hp2－1,第四十三頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,第四十八頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。,對(duì)不同表現(xiàn)型的DNA序列分析表明， Gc1F、 Gc1S、 Gc2蛋白(d224。,免疫電泳(immunoelectrophoresis, IEP)是將 區(qū)帶電泳和雙相瓊脂擴(kuò)散相結(jié)合的一種免 疫化學(xué)分析(hu224。nlǐ)圖解,第六十二頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。n)，可鑒定混合抗原中各 組分。 PAGE分辨率很高。,Gc的聚丙烯酰胺凝膠圓盤(pán)電泳條件：凝膠 濃度(n243。,采用(cǎiy242。 ORM的肽鏈結(jié)構(gòu)中富含脯氨酸，具有較高 的穩(wěn)定性和耐熱性,第八十二頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。)的改變，血清電泳后用抗－ ORM血清免疫固定可顯示ORM表現(xiàn)型的 電泳譜型,第八十九頁(yè)，共一百一十七頁(yè)。 其中Gm Gm17表現(xiàn)出對(duì)偶(du236。,六、法醫(yī)學(xué)意義 Gm、Km系統(tǒng)個(gè)人識(shí)別率及非父排除率均 高于已知的紅細(xì)胞血型(