《基因工程原理》ppt課件-預(yù)覽頁
【正文】 模擬或在常溫常壓下生成酶反應(yīng)的產(chǎn)品以及利用重組 DNA技術(shù)定向改變酶 ,進(jìn)行酶的修飾 ,或酶的全人工合成 。 16 ?發(fā)酵工程 (fermentation engineering) ◆ 又稱微生物工程 ,微生物發(fā)酵工程 。 最重要的技術(shù)準(zhǔn)備是 限制性酶的分離純化 、 DNA連接酶的分離 、 大腸桿菌轉(zhuǎn)化技術(shù)的突破 。 20 第一個(gè)重組體構(gòu)建 21 SV40病毒是猿猴病毒 ， 是一種直徑為450197。 22 SV40病毒 23 ◆ 當(dāng)獲得二聚體 SV40DNA后 ， Berg等就證明了環(huán)狀 DNA被內(nèi)切酶切成線性 DNA后能夠重新環(huán)化 ， 并且能夠同另外的分子重組 。 25 Boyer and Cohen 26 ◆ 質(zhì)粒 pSC101的獲得 ● In 1972, Cohen constructed a new plasmid beginning with DNA isolated from E. coli. Cohen named the plasmid pSC101 (“SC for Stanley Cohen).The new plasmid had three important features: (1) it had only a single recognition site where EcoRI would cut the molecule, thus identifying the spot where the plasmid would open。 thus, bacteria having the plasmid could resist the effects of tetracycline, whereas bacteria lacking the plasmid would be killed by the tetracycline. Cohen在重組 DNA技術(shù)中杰出貢獻(xiàn) 27 pSC101質(zhì)粒 DNA 28 ◆ 質(zhì)粒 pSC101對(duì)大腸桿菌的轉(zhuǎn)化技術(shù)突破 ● Another key characteristic of Cohen39。 33 他們用 EcoRⅠ 處理過的和沒有處理過的 質(zhì)粒 pSC101和R65DNA分別轉(zhuǎn)化 C600,得到下表的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ∶ 表：環(huán)狀和線狀質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)化 質(zhì)粒 DNA 每 μg DNA轉(zhuǎn)化子 四環(huán)素 卡那霉素 氯霉素 pSC101(未切割 ) 3 105 (EcoRⅠ 切割 ) 104 R65(未切割 ) 104 104 R65 (EcoRⅠ 切割 ) ＜ 5 1 102 4 101 34 ◆ 他們從用 EcoRⅠ 處理的 R65的卡那霉素抗性平板上選擇了一個(gè)克隆 ， 并檢查了它的抗性 ， 發(fā)現(xiàn)該克隆同時(shí)具有磺胺的抗性 ，但沒有氯霉素 、 四環(huán)素的抗性 。 這一結(jié)果也提示 ， 如果能夠在體外重組成功 ， 并能將重組體引入細(xì)胞內(nèi) ， 同樣具有生物學(xué)功能 。 39 基因操作 的基本過程和特點(diǎn) ?基因操作的基本過程 涉及的過程可用分 /合成 、切 、 連 、 轉(zhuǎn) 、 選 、 鑒六個(gè)字表示 。 43 基因工程的基礎(chǔ)與應(yīng)用
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