【正文】 3.4.4 植物單細(xì)胞培養(yǎng) 3.4.5 植物細(xì)胞培養(yǎng)的意義 3.4.6 植物細(xì)胞的生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)（自學(xué)） 3.4.7 植物細(xì)胞兩相培養(yǎng)技術(shù)（自學(xué)） 3.4.8 植物細(xì)胞的生物反應(yīng)器固定化培養(yǎng)（自學(xué)） 3.4.9 植物細(xì)胞培養(yǎng)存在的問題與發(fā)展趨勢,第五十六頁，共一百一十四頁。 （3）培養(yǎng)物接種、取樣、無菌化等操作技術(shù)的優(yōu)化。 3. 可應(yīng)用性范圍 目前有許多植物還未培養(yǎng)成功，許多有意義的雜交親本或組合 還不能培養(yǎng)成功，或不能有效(yǒuxi224。)反應(yīng)器,第五十四頁，共一百一十四頁。)反應(yīng)器（培養(yǎng)青篙毛狀根生產(chǎn)青篙素）,1 生物反應(yīng)器 2 中心筒 3 不銹鋼篩網(wǎng) 4 空氣出口 5 時間繼電器 6 霧化頭 7 培養(yǎng)液 8 空氣入口(r249。每年青蒿素的產(chǎn)量(chǎnli224。)反應(yīng)器的植物組織與器官培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用。根、芽、體細(xì)胞胚以及冠癭組織等的培養(yǎng)研究都有一定發(fā)展。與適用于微生物、植物細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器不同，適合植物組織或器官培養(yǎng)的生物反應(yīng)器系統(tǒng)具有其特殊性，如需考慮植物組織或器官的附著，以及有固定塊狀培養(yǎng)物帶來的營養(yǎng)吸收、氣體傳遞等問題。nzh237。 歐洲多個國家聯(lián)合攻關(guān)的尤利卡計劃中，把人工種子的研制作為生物技術(shù)研究的重點項目。,5. 人工種子的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用(y236。如海藻酸鈉、明膠、樹膠、瓊脂糖、淀粉及動物膠等。,第四十七頁，共一百一十四頁。 q249。,第四十五頁，共一百一十四頁。 （3）選擇合理的包埋技術(shù)。,4. 人工(r233。ng)的橋梁； （4）可保存珍貴品種。,2. 人工(r233。ngōng)種子,1.定義 人工種子（artificial seed)是指通過植物組織培養(yǎng)的方法獲得的具有正常發(fā)育能力的材料，外面還被有特定物質(zhì)，在適宜條件下可以(kěyǐ)發(fā)芽成苗的植物幼體。)由此形成完整植株的不同。相信在今后的幾十年內(nèi)，組織培養(yǎng)在我國將會有更大的發(fā)展，在農(nóng)業(yè)、制藥業(yè)、加工業(yè)等方面將會發(fā)揮更大的作用，創(chuàng)造出更大的經(jīng)濟效益。,第三十八頁，共一百一十四頁。這些化合物許多都是高等植物的次生代謝物,有些化合物還不能大規(guī)模地人工合成,而靠植物產(chǎn)生這些化合物產(chǎn)量有限。據(jù)報導(dǎo),冷凍保存的胡蘿卜胚狀體,在保存了1 年之后仍有再生成植株的能力。 (3) 當(dāng)需要的時候,可把所貯存的材料用作核心原種迅速繁殖出大量植株。另一方面,如用苗圃或田間(ti225。,5. 種質(zhì)資源(zīyu225。接受基因的受體細(xì)胞要產(chǎn)生再生植株，就需要通過組織培養(yǎng)的方法才能(c225。,4.在遺傳、生理生化和病理等研究(y225。我國在水稻、小麥、煙草、柏樹、橡膠、辣椒等植物的單倍體育種的工作上,處于領(lǐng)先地位。),單倍體育種:通過花藥培養(yǎng),從小孢子獲得單倍體植株,染色體加倍后獲得正常二倍體植株,這是一條育種的新途徑。 目前已在廣西荔蒲芋、永福羅漢果、桉樹、馬鈴薯、甘薯、百合、蘭花、大蒜、石竹、柑桔、草莓等植物品種上得到成功推廣。如防治無方,不僅會影響作物的品質(zhì)及產(chǎn)量,嚴(yán)重的只能拔除病株,造成很大經(jīng)濟損失。,第三十三頁，共一百一十四頁。我國近年來已獲成功推廣的有甘蔗、葡萄、羅漢果、蘭花、銀杏、水稻、甘蔗、菠蘿、香蕉、草莓、月季、菊花、無籽西瓜、櫟樹(l236。)繁殖技術(shù),對那些繁殖系數(shù)低或很難用種子繁殖的名特珍品種的繁殖實用意義更大,甚至是無可取代。ngy242。,第三十一頁，共一百一十四頁。)燒杯保濕，4d后晝覆夜敞，2周后可除掉玻璃(bō l237。n zāi)苗,番杏無菌苗,第三十頁，共一百一十四頁。,第二十九頁，共一百一十四頁。nl225。,（5）繼代培養(yǎng)：將愈傷組織在無菌條件下從試管中取出，用無菌水洗凈，以鑷子和解剖刀剔除附著在愈傷塊上的培養(yǎng)基，并用無菌水反復(fù)沖洗數(shù)次，直至愈傷塊上無殘留培養(yǎng)基為止。愈傷組織的形成標(biāo)志著接種外植體的生長狀態(tài)已脫離分化狀態(tài)，開始重新恢復(fù)分生能力。再在超凈工作臺（圖示）內(nèi)用70%乙醇浸泡23min，在無菌濾紙上吸干或酒精燈焰燒干，再用0.1%升汞浸泡10min, 無菌水沖洗34次, 用無菌手術(shù)刀輕輕刮去果實被腐蝕的部分(b249。以上各培養(yǎng)基加0.7%瓊脂，PH5.8。(3）生根培養(yǎng)基：3/4MS+NAA0.1+1.5%蔗糖。),以番杏的組織培養(yǎng)為例介紹組織器官培養(yǎng)技術(shù)： 番杏別名洋菠菜，屬番杏科番杏屬的多年生草本植物。 激素組合：通常高濃度的生長素和低濃度的激動素有利于愈傷組織的誘導(dǎo)和增殖。,（2）愈傷組織(zǔzhī)的生長及分化,第二十四頁，共一百一十四頁。n)了形態(tài)和生理功能上的分化，直至出現(xiàn)(chūxi224。,第二十二頁，共一百一十四頁。ng)下細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)及核酸的合成代謝迅速加強的過程。,2. 愈傷組織(zǔzhī)誘導(dǎo),（1) 愈傷組織形成特點 由外植體或單個細(xì)胞(x236。guān)培養(yǎng),1.定義 植物組織器官培養(yǎng)就是在植物細(xì)胞全能性理論指導(dǎo)下，在組織以及器官水平上開展研究的，其目的(m249。,這是哪個(nǎ ge)階段？,這是哪個(nǎ ge)階段？,植物(zh237。 一般移植前，先將培養(yǎng)容器打開，于室內(nèi)自然光照下放3天，然后取出小苗，用自來水把根系上的營養(yǎng)基沖洗干凈，再栽入已準(zhǔn)備好的基質(zhì)中，基質(zhì)使用前最好消毒。1個月后即可獲得健壯根系。i le)擴大繁殖系數(shù)，需要繼代培養(yǎng)。ng)和培養(yǎng),接種： 在無菌壞境下，將切好的外植體立即接在培養(yǎng)基上，每瓶接種4－10個。然后切成0.2－0.5厘米厚的小片，這就是外植體。b232。 再將材料移入漂白粉的飽和液或0.01％升汞水中消毒10分鐘。iyǎng)材料的消毒,先將材料用流水沖洗干凈，最后(zu236。ngd249。o)的采集,組織培養(yǎng)所用的材料非常廣泛，可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉，有時也利用花粉粒和花藥，其中根尖不易滅菌，一般很少采用。ngch233。ng)（圖解）： （1）培養(yǎng)材料的采集 （2）培養(yǎng)材料的消毒 （3）制備外植體 （4) 接種和培養(yǎng) （5）組培苗的練苗和移栽,第十二頁，共一百一十四頁。,3.3.4 植物(zh237。,通過胚狀體途徑產(chǎn)生再生植株有3個顯著優(yōu)點： （1）在一個培養(yǎng)物上所能產(chǎn)生的胚狀體數(shù)目往往比不定(b249。 （2）胚胎發(fā)生方式：在愈傷組織表面或內(nèi)部形成很多胚狀體，它們類似于合子胚，具有雙極性結(jié)構(gòu)。,第九頁，共一百一十四頁。,第八頁，共一百一十四頁。通常用1—10mm大小的外植體來加速植物的無性系繁殖。ng)各類組織和器官的過程。,胚胎培養(yǎng)(embryo culture):包括原胚和成熟胚培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、胚珠和子房(未授粉或已授粉的)培養(yǎng)，可用于研究胚胎發(fā)生以及影響胚生長的因素；用試管受精或幼胚培養(yǎng)可獲得種間或?qū)匍g遠(yuǎn)緣雜種，因此它也是研究生殖生理的有用方法；胚乳培養(yǎng)是研究胚乳的功能、胚乳與胚的關(guān)系，以及獲得三倍體植株的一個手段。iyǎng)過程中由外植體組織增生的細(xì)胞產(chǎn)生的具有分生能力的一團不規(guī)則的疏散排列的薄壁細(xì)胞。ngy224。 根據(jù)培養(yǎng)的功能性的不同，組織培養(yǎng)可分為：再生體系(tǐx236。其理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。,3.3.1 植物組織培養(yǎng)的定義(d236。,3.3 植物(zh237。第3章 植物(zh237。)技術(shù)研究所,第一頁，共一百一十四頁。)和形態(tài)建成 3.3.4 植物組織培養(yǎng)的基本步驟 3.3.5 植物組織器官培養(yǎng) 3.3.6 植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用 3.3.7 人工種子 3.3.8 植物組織與器官的生物反應(yīng)器培養(yǎng) 3.3.9 植物組織與器官培養(yǎng)存在的問題,第二頁，共一百一十四頁。zhě)長成新的完整植株的一種實驗技術(shù)。 根據(jù)培養(yǎng)方法的不同，組織培養(yǎng)可分為：微室培養(yǎng)、平板培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、固體培養(yǎng)等。,3.3.2 重要(zh242。 愈傷組織(callus)：在離體培養(yǎng)(p233。,第六頁，共一百一十四頁。ngch233。 fen)的培養(yǎng)。 胚狀體（embryoid)：在離體培養(yǎng)過程中產(chǎn)生一種形似胚（具有明顯的根端和芽端），功能與胚相同的結(jié)構(gòu)。ishēng)目的要經(jīng)過兩個步驟： (1) 培養(yǎng)的植物細(xì)胞或組織的脫分化，形成愈傷組織； (2) 有新形成的愈傷組織形成一些分生細(xì)胞團，隨后又由其分化成不同的器官原基（如根原基、葉原基等）。nɡ)的方式： （1）器官發(fā)生方式：其中芽和根在愈傷組織的不同部位分別獨立形成，具有單極性結(jié)構(gòu)。)胚狀體,第十頁，共一百一十四頁。,第十一頁，共一百一十四頁。ch233。bāo)和集合體懸浮培養(yǎng),球形,形成(x237。ili224。 在快速繁殖中，最常用的培養(yǎng)材料是莖尖，通常切塊在0.5厘米左右，如果為培養(yǎng)無病毒苗而采用的培養(yǎng)材料通常僅取莖尖的分生組織部分，其長度(ch225。,（2）培養(yǎng)(p233。 在無菌壞境中將材料放入70％酒精中浸泡30－60秒。,（3）制備(zh236。n)則不需剝皮。,（4) 接種(jiēzh242。 增殖： 外植體的增殖是組培的關(guān)鍵階段，在新梢等形成后為了(w232。 根的誘導(dǎo)： 繼代培養(yǎng)形成的不定芽和側(cè)芽等一般沒有根，必須轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)。 zāi),試管苗從無菌以及光照、溫度、濕度穩(wěn)定