【正文】 3.4.4 植物單細胞培養(yǎng) 3.4.5 植物細胞培養(yǎng)的意義 3.4.6 植物細胞的生物反應器大規(guī)模培養(yǎng)（自學） 3.4.7 植物細胞兩相培養(yǎng)技術（自學） 3.4.8 植物細胞的生物反應器固定化培養(yǎng)（自學） 3.4.9 植物細胞培養(yǎng)存在的問題與發(fā)展趨勢,第五十六頁，共一百一十四頁。 （3）培養(yǎng)物接種、取樣、無菌化等操作技術的優(yōu)化。 3. 可應用性范圍 目前有許多植物還未培養(yǎng)成功，許多有意義的雜交親本或組合 還不能培養(yǎng)成功，或不能有效(yǒuxi224。)反應器,第五十四頁，共一百一十四頁。)反應器（培養(yǎng)青篙毛狀根生產青篙素）,1 生物反應器 2 中心筒 3 不銹鋼篩網 4 空氣出口 5 時間繼電器 6 霧化頭 7 培養(yǎng)液 8 空氣入口(r249。每年青蒿素的產量(chǎnli224。)反應器的植物組織與器官培養(yǎng)技術及其應用。根、芽、體細胞胚以及冠癭組織等的培養(yǎng)研究都有一定發(fā)展。與適用于微生物、植物細胞培養(yǎng)的生物反應器不同，適合植物組織或器官培養(yǎng)的生物反應器系統(tǒng)具有其特殊性，如需考慮植物組織或器官的附著，以及有固定塊狀培養(yǎng)物帶來的營養(yǎng)吸收、氣體傳遞等問題。nzh237。 歐洲多個國家聯合攻關的尤利卡計劃中，把人工種子的研制作為生物技術研究的重點項目。,5. 人工種子的研究現狀及應用(y236。如海藻酸鈉、明膠、樹膠、瓊脂糖、淀粉及動物膠等。,第四十七頁，共一百一十四頁。 q249。,第四十五頁，共一百一十四頁。 （3）選擇合理的包埋技術。,4. 人工(r233。ng)的橋梁； （4）可保存珍貴品種。,2. 人工(r233。ngōng)種子,1.定義 人工種子（artificial seed)是指通過植物組織培養(yǎng)的方法獲得的具有正常發(fā)育能力的材料，外面還被有特定物質，在適宜條件下可以(kěyǐ)發(fā)芽成苗的植物幼體。)由此形成完整植株的不同。相信在今后的幾十年內，組織培養(yǎng)在我國將會有更大的發(fā)展，在農業(yè)、制藥業(yè)、加工業(yè)等方面將會發(fā)揮更大的作用，創(chuàng)造出更大的經濟效益。,第三十八頁，共一百一十四頁。這些化合物許多都是高等植物的次生代謝物,有些化合物還不能大規(guī)模地人工合成,而靠植物產生這些化合物產量有限。據報導,冷凍保存的胡蘿卜胚狀體,在保存了1 年之后仍有再生成植株的能力。 (3) 當需要的時候,可把所貯存的材料用作核心原種迅速繁殖出大量植株。另一方面,如用苗圃或田間(ti225。,5. 種質資源(zīyu225。接受基因的受體細胞要產生再生植株，就需要通過組織培養(yǎng)的方法才能(c225。,4.在遺傳、生理生化和病理等研究(y225。我國在水稻、小麥、煙草、柏樹、橡膠、辣椒等植物的單倍體育種的工作上,處于領先地位。),單倍體育種:通過花藥培養(yǎng),從小孢子獲得單倍體植株,染色體加倍后獲得正常二倍體植株,這是一條育種的新途徑。 目前已在廣西荔蒲芋、永福羅漢果、桉樹、馬鈴薯、甘薯、百合、蘭花、大蒜、石竹、柑桔、草莓等植物品種上得到成功推廣。如防治無方,不僅會影響作物的品質及產量,嚴重的只能拔除病株,造成很大經濟損失。,第三十三頁，共一百一十四頁。我國近年來已獲成功推廣的有甘蔗、葡萄、羅漢果、蘭花、銀杏、水稻、甘蔗、菠蘿、香蕉、草莓、月季、菊花、無籽西瓜、櫟樹(l236。)繁殖技術,對那些繁殖系數低或很難用種子繁殖的名特珍品種的繁殖實用意義更大,甚至是無可取代。ngy242。,第三十一頁，共一百一十四頁。)燒杯保濕，4d后晝覆夜敞，2周后可除掉玻璃(bō l237。n zāi)苗,番杏無菌苗,第三十頁，共一百一十四頁。,第二十九頁，共一百一十四頁。nl225。,（5）繼代培養(yǎng)：將愈傷組織在無菌條件下從試管中取出，用無菌水洗凈，以鑷子和解剖刀剔除附著在愈傷塊上的培養(yǎng)基，并用無菌水反復沖洗數次，直至愈傷塊上無殘留培養(yǎng)基為止。愈傷組織的形成標志著接種外植體的生長狀態(tài)已脫離分化狀態(tài)，開始重新恢復分生能力。再在超凈工作臺（圖示）內用70%乙醇浸泡23min，在無菌濾紙上吸干或酒精燈焰燒干，再用0.1%升汞浸泡10min, 無菌水沖洗34次, 用無菌手術刀輕輕刮去果實被腐蝕的部分(b249。以上各培養(yǎng)基加0.7%瓊脂，PH5.8。(3）生根培養(yǎng)基：3/4MS+NAA0.1+1.5%蔗糖。),以番杏的組織培養(yǎng)為例介紹組織器官培養(yǎng)技術： 番杏別名洋菠菜，屬番杏科番杏屬的多年生草本植物。 激素組合：通常高濃度的生長素和低濃度的激動素有利于愈傷組織的誘導和增殖。,（2）愈傷組織(zǔzhī)的生長及分化,第二十四頁，共一百一十四頁。n)了形態(tài)和生理功能上的分化，直至出現(chūxi224。,第二十二頁，共一百一十四頁。ng)下細胞內蛋白質及核酸的合成代謝迅速加強的過程。,2. 愈傷組織(zǔzhī)誘導,（1) 愈傷組織形成特點 由外植體或單個細胞(x236。guān)培養(yǎng),1.定義 植物組織器官培養(yǎng)就是在植物細胞全能性理論指導下，在組織以及器官水平上開展研究的，其目的(m249。,這是哪個(nǎ ge)階段？,這是哪個(nǎ ge)階段？,植物(zh237。 一般移植前，先將培養(yǎng)容器打開，于室內自然光照下放3天，然后取出小苗，用自來水把根系上的營養(yǎng)基沖洗干凈，再栽入已準備好的基質中，基質使用前最好消毒。1個月后即可獲得健壯根系。i le)擴大繁殖系數，需要繼代培養(yǎng)。ng)和培養(yǎng),接種： 在無菌壞境下，將切好的外植體立即接在培養(yǎng)基上，每瓶接種4－10個。然后切成0.2－0.5厘米厚的小片，這就是外植體。b232。 再將材料移入漂白粉的飽和液或0.01％升汞水中消毒10分鐘。iyǎng)材料的消毒,先將材料用流水沖洗干凈，最后(zu236。ngd249。o)的采集,組織培養(yǎng)所用的材料非常廣泛，可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉，有時也利用花粉粒和花藥，其中根尖不易滅菌，一般很少采用。ngch233。ng)（圖解）： （1）培養(yǎng)材料的采集 （2）培養(yǎng)材料的消毒 （3）制備外植體 （4) 接種和培養(yǎng) （5）組培苗的練苗和移栽,第十二頁，共一百一十四頁。,3.3.4 植物(zh237。,通過胚狀體途徑產生再生植株有3個顯著優(yōu)點： （1）在一個培養(yǎng)物上所能產生的胚狀體數目往往比不定(b249。 （2）胚胎發(fā)生方式：在愈傷組織表面或內部形成很多胚狀體，它們類似于合子胚，具有雙極性結構。,第九頁，共一百一十四頁。,第八頁，共一百一十四頁。通常用1—10mm大小的外植體來加速植物的無性系繁殖。ng)各類組織和器官的過程。,胚胎培養(yǎng)(embryo culture):包括原胚和成熟胚培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、胚珠和子房(未授粉或已授粉的)培養(yǎng)，可用于研究胚胎發(fā)生以及影響胚生長的因素；用試管受精或幼胚培養(yǎng)可獲得種間或屬間遠緣雜種，因此它也是研究生殖生理的有用方法；胚乳培養(yǎng)是研究胚乳的功能、胚乳與胚的關系，以及獲得三倍體植株的一個手段。iyǎng)過程中由外植體組織增生的細胞產生的具有分生能力的一團不規(guī)則的疏散排列的薄壁細胞。ngy224。 根據培養(yǎng)的功能性的不同，組織培養(yǎng)可分為：再生體系(tǐx236。其理論基礎是細胞的全能性。,3.3.1 植物組織培養(yǎng)的定義(d236。,3.3 植物(zh237。第3章 植物(zh237。)技術研究所,第一頁，共一百一十四頁。)和形態(tài)建成 3.3.4 植物組織培養(yǎng)的基本步驟 3.3.5 植物組織器官培養(yǎng) 3.3.6 植物組織培養(yǎng)的應用 3.3.7 人工種子 3.3.8 植物組織與器官的生物反應器培養(yǎng) 3.3.9 植物組織與器官培養(yǎng)存在的問題,第二頁，共一百一十四頁。zhě)長成新的完整植株的一種實驗技術。 根據培養(yǎng)方法的不同，組織培養(yǎng)可分為：微室培養(yǎng)、平板培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、固體培養(yǎng)等。,3.3.2 重要(zh242。 愈傷組織(callus)：在離體培養(yǎng)(p233。,第六頁，共一百一十四頁。ngch233。 fen)的培養(yǎng)。 胚狀體（embryoid)：在離體培養(yǎng)過程中產生一種形似胚（具有明顯的根端和芽端），功能與胚相同的結構。ishēng)目的要經過兩個步驟： (1) 培養(yǎng)的植物細胞或組織的脫分化，形成愈傷組織； (2) 有新形成的愈傷組織形成一些分生細胞團，隨后又由其分化成不同的器官原基（如根原基、葉原基等）。nɡ)的方式： （1）器官發(fā)生方式：其中芽和根在愈傷組織的不同部位分別獨立形成，具有單極性結構。)胚狀體,第十頁，共一百一十四頁。,第十一頁，共一百一十四頁。ch233。bāo)和集合體懸浮培養(yǎng),球形,形成(x237。ili224。 在快速繁殖中，最常用的培養(yǎng)材料是莖尖，通常切塊在0.5厘米左右，如果為培養(yǎng)無病毒苗而采用的培養(yǎng)材料通常僅取莖尖的分生組織部分，其長度(ch225。,（2）培養(yǎng)(p233。 在無菌壞境中將材料放入70％酒精中浸泡30－60秒。,（3）制備(zh236。n)則不需剝皮。,（4) 接種(jiēzh242。 增殖： 外植體的增殖是組培的關鍵階段，在新梢等形成后為了(w232。 根的誘導： 繼代培養(yǎng)形成的不定芽和側芽等一般沒有根，必須轉到生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)。 zāi),試管苗從無菌以及光照、溫度、濕度穩(wěn)定