《高等植物基因工程》ppt課件-全文預覽
【正文】 5S t GUS 35S P tet 顯色反應 tetR tet 結合蛋白 NLS 核定位信號序列 GR 激素受體蛋白 VP16 轉錄激活因子 GUS b葡糖醛酸糖苷酶報告基因 四環(huán)素 地塞米松 4. 外源基因的類固醇誘導系統(tǒng) PG1090 E9 t hER 雌激素誘導型的外源基因表達系統(tǒng) lexA VP16 nos t hpt MCS lexA 細菌 lexA 基因的 DNA 結合區(qū) VP16 病毒轉錄激活因子編碼區(qū) MCS 外源基因多克隆位點 hER 人雌激素受體編碼區(qū) hpt 潮霉素抗性基因 雌激素 PNOS lexA O 35S P 3A t XVE轉錄激活因子表達盒 潮霉素標記基因表達盒 外源基因表達盒 lexA O LexA蛋白結合位點 4. 外源基因的類固醇誘導系統(tǒng) 蛻皮激素誘導型的外源基因表達系統(tǒng) 35S P nos t HEcR LBD GR DBD GRact VP16 GUS 35S P nos t GRE 融合轉錄因子 顯色反應 蛻皮激素 GRact 激素受體轉錄激活區(qū) GR DBD 激素受體 DNA結合區(qū) HEcR LBD 昆蟲激 素受體的配體結合區(qū) 五、利用植物轉基因技術研究基因的表達調控 第十七章 高等植物基因工程 利用報告基因展示高等植物基因表達與調控的信息譜 利用病毒載體探查植物基因重排 利用轉座元件克隆植物基因 利用 TDNA構建植物遺傳突變株 利用報告基因展示高等植物基因表達與調控的信息譜 T P b葡糖醛酸糖苷酶報告基因 GUS 應答調控元件 轉錄調控因子 鹵代葡萄糖醛苷酸 Xgluc 藍色化合物 熒光素酶報告基因 GFP 發(fā)射熒光 昆蟲熒光素 利用病毒載體探查植物基因重排 植物基因組 報告基因 ori Apr 病毒載體 利用轉座元件克隆植物基因 植物基因組 Ac 克隆 以 Ac序列為探針雜交篩選 利用 TDNA構建植物遺傳突變株 植物突變株基因組 LB 酶切 連接 克隆 RB NTPII pBR322 卸下克隆的植物基因片段 重組克隆 DNA 植物突變基因的 DNA片段 雜交野生型植物基因組 基因序列分析 經(jīng)歷突變的野生型全長基因 六、利用轉基因植物生產(chǎn)功能蛋白和工業(yè)原料 第十七章 高等植物基因工程 利用植物生物反應器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 利用植物生物反應器生產(chǎn)食品或飼料添加劑 利用植物生物反應器生產(chǎn)工業(yè)原料 六、利用轉基因植物生產(chǎn)功能蛋白和工業(yè)原料 第十七章 高等植物基因工程 轉基因植物作為生物反應器的優(yōu)勢如下： 植物易于生長 ， 農田管理成本相對低廉 ， 操作技術要求也不高 絕大多數(shù)植物的表達產(chǎn)物對人和牲畜無毒副作用 ， 安全可靠 植物具有完整的真核表達修飾系統(tǒng) ， 利用轉基因植物生產(chǎn)的重組蛋白藥物和疫苗在分子結構和生物活性上 ， 與人體來源的蛋白質相似 利用植物生物反應器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 借助于根瘤農桿菌介導的轉化系統(tǒng) ， 將小鼠抗體的輕鏈和重鏈編碼基因分別置于兩種煙草植物體內表達 ， 然后兩種重組植物品系進行雜交 ， 產(chǎn)生的子代植物能同時合成小鼠的輕鏈和重鏈兩種多肽 。 標準的高等植物原生質體制備和再生程序是：將植物嫩葉 、 幼芽或愈傷組織切成碎片 ， 浸入含有纖維素酶的緩沖液中保溫；懸浮物離心除細胞碎片；將原生體懸浮液滴在無菌濾紙片上 ， 并置于含有普通植物細胞 （ 即所謂的 滋養(yǎng)細胞 ） 的固體再生培養(yǎng)基的表面 ， 使原生質體與 滋養(yǎng)細胞 不直接接觸 ， 但可吸收由 滋養(yǎng)細胞 分泌擴散出來的植物生長因子及其它化合物；培養(yǎng) 23周后 ， 將濾紙上的植物細胞蔟轉移至含有高濃度分裂素和低濃度生長素的固體培養(yǎng)基上繼續(xù)培育 24周 ， 濾紙片上便長出嫩芽；將嫩芽置入含有低濃度生長素而無分裂素的固體培養(yǎng)基上 ，使其根部發(fā)育；大約 3周后再將之移植在土壤中 ， 長成整株植物 。 花粉管導入法的特點是直接 、 簡便 。 （ 3）融合法 將外源 DNA與特殊的疏水性高分子化合物混合 ， 在水中這些疏水性化合物分子形成球狀的 脂質體 ， 后者與植物細胞原生質體融合 ， 篩選融合子 ， 再生植物細胞壁 。 A、 B兩條鏈必須同處于一個植物細胞中 ， 方能形成有感染力的病毒 。 在大約 300種特征清楚的植物病毒中 ， 單鏈 RNA病毒約占 91%， 雙鏈 RNA病毒 、 雙鏈 DNA病毒 、 單鏈 DNA病毒各占 3%。248。 三、 高等植物的基因轉移系統(tǒng) 第十七章 高等植物基因工程 Ti 質粒介導的整合轉化程序 植物病毒介導的轉染程序 植物細胞的直接轉化程序 植物原生質體的再生程序 Ti 質粒介導的整合轉化程序 幾乎所有的雙子葉植物尤其是豆科類植物的根部常常會形成根瘤 ， 這是由于植物根部被一種革蘭氏陰性土壤桿菌農桿根瘤菌 （） 感染所致 ， 其致瘤特性是由該菌細胞內的野生型 質粒 Ti（ Tumorinducing） 介導的。 染色體的多倍體性 很多高等植物擁有比人類更大的基因組，并以多倍體的形式存在。 生長素與分裂素之比高 ， 則根部發(fā)育；生長素 與分裂素之比低，則莖部發(fā)育。 整株植物的再生性 植物損傷后，會在傷口長出一塊軟組織，稱為
法律信息相關推薦
鄂ICP備17016276號-1