酶在食品分析中的應(yīng)用 (2)-全文預(yù)覽
【正文】 定量測(cè)定 。 目前 ， 該技術(shù)可以檢測(cè) 6種家畜熟肉制品 。 其次是對(duì)摻入異種肉的檢測(cè) ， 利用多克隆抗體對(duì)血清白蛋白的酶聯(lián)免疫測(cè)定法 ， 對(duì)鮮肉進(jìn)行摻假檢測(cè) 。 在加熱過(guò)程中一些成分的含量會(huì)降低 ， 而一些產(chǎn)物的濃度會(huì)提高 。 其原理是將捕捉抗體包被到凹形金屬片的內(nèi)面 ， 可以從前增菌液中吸附被檢的沙門氏菌 ， 對(duì)于該系統(tǒng)來(lái)說(shuō) ， 需要做的只是加樣 。 為了有效地控制其傳播 ， 就必須有快速和可靠的檢測(cè)方法 。 迄今為止 ，應(yīng)用酶聯(lián)免疫測(cè)定檢測(cè)食品中的殘留農(nóng)藥主要為除草劑 、 殺蟲劑和殺菌劑 。 ? 檢測(cè)數(shù)量： 96孔 （ 包括標(biāo)準(zhǔn) ） ? 檢測(cè)時(shí)間： 20分鐘 金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測(cè) ? 蘑菇罐頭約占我國(guó)罐頭出口量的 30％ ， 中國(guó)蘑菇罐頭一度占據(jù)美國(guó)市場(chǎng) 2/3份額 ， 1989年以來(lái) FDA以我國(guó)蘑菇罐頭食品含有金黃色葡萄球菌腸毒素并導(dǎo)致消費(fèi)者傷害為由 ， 對(duì)中國(guó)蘑菇罐頭采取 ” 自動(dòng)扣留措施 ” 。 ? 自 1977年抗黃曲霉素 B1的單克隆問(wèn)世至今 ， 幾乎所有重要真菌毒素如伏馬毒素 、 赭曲毒素 、玉米赤霉烯酮 、 脫氧雪腐鐮刀菌烯酮 、 展青霉素等的 ELISA 檢測(cè)方法均已建立 。 （ 2）常用的酶及底物 酶 底 物 顯色反應(yīng) 測(cè)定波長(zhǎng) 辣根過(guò)氧化物酶 鄰苯二胺 四甲替聯(lián)苯胺 氨基水楊酸 鄰聯(lián)苯甲胺 2,2‘連胺基 2(3乙基 并噻唑啉磺酸 6)銨鹽 橘紅色 黃色 棕色 蘭色 藍(lán)綠色 492 460 449 425 642 堿性磷酸酯酶 4硝基酚磷酸鹽 (PNP) 萘酚 ASMx磷酸鹽 +重氮鹽 黃色 紅色 400 500 葡萄糖氧化酶 ABTS+HRP+葡萄糖 葡萄糖 +甲硫酚嗪 +噻唑蘭 黃色 藍(lán)色 405 420 β Ｄ－半乳糖苷酶 甲基傘酮基半乳糖苷 (4MuG) 硝基酚半乳糖苷 (ONPG) 熒光 黃色 360,450 420 為什么辣根過(guò)氧化物酶可應(yīng)用于 elisa？ 為什么辣根過(guò)氧化物酶可應(yīng)用于 elisa？ ?（ 1） 成本低 ?（ 2） 熱穩(wěn)定性好 ?（ 3） 顯色反應(yīng)類型多 ELISA技術(shù)在食品分析中的應(yīng)用 ? 近年來(lái) ， ELISA因其操作程序的規(guī)范化 、 簡(jiǎn)單化和檢測(cè)的高靈敏性 ， 在農(nóng)藥殘留 、 獸藥殘留 、重要有機(jī)物污染 、 生物毒素 、 食品添加劑和人畜共患疾病病原體的快速檢測(cè)和分析等食品安全性檢測(cè)領(lǐng)域正逐步推廣應(yīng)用 。 （ 1）酶標(biāo)記的抗體或抗原的制備 ? 酶標(biāo)記的抗體或抗原是 ELISA中最關(guān)鍵的試劑 。 洗滌后 ， 加入酶標(biāo)抗球蛋白抗體 (酶標(biāo)抗抗體 )和底物進(jìn)行測(cè)定 。溫育后洗滌 ， 加入酶標(biāo)抗體和底物進(jìn)行測(cè)定 。 測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原 。 ? ELISA自上世紀(jì) 70年代出現(xiàn)開始 ， 就因其高度的準(zhǔn)確性 、 特異性 、 適用范圍寬 、 檢測(cè)速度快以及費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn) ， 在臨床和生物疾病診斷與控制等領(lǐng)域中倍受重視 ， 成為檢驗(yàn)中最為廣泛應(yīng)用的方法之一 。 ? 3） 測(cè)定食品中酶的活性作為食品的指標(biāo) ， 如過(guò)氧化物酶的測(cè)定 、 蜂蜜中酶的測(cè)定 。 1. 酶法分析的特點(diǎn)及應(yīng)用類型 ? 酶的特性 ? 酶法檢測(cè)的特點(diǎn) 催化效率高 專一性 靈敏性強(qiáng) 快速 特異性、準(zhǔn)確 不需要物理分離，干擾少 酶在食品分析中的應(yīng)用類型 ? 1） 去除樣品中的雜質(zhì) 。 ? 然而 ， 酶法分析真正的發(fā)展應(yīng)歸于它在臨床實(shí)驗(yàn)室中的廣泛應(yīng)用 。當(dāng)時(shí) ， 曾采用麥芽提取物作為過(guò)氧化物酶源 ，
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