酶在食品分析中的應用 (2)-全文預覽
【正文】 定量測定 。 目前 ， 該技術可以檢測 6種家畜熟肉制品 。 其次是對摻入異種肉的檢測 ， 利用多克隆抗體對血清白蛋白的酶聯(lián)免疫測定法 ， 對鮮肉進行摻假檢測 。 在加熱過程中一些成分的含量會降低 ， 而一些產(chǎn)物的濃度會提高 。 其原理是將捕捉抗體包被到凹形金屬片的內(nèi)面 ， 可以從前增菌液中吸附被檢的沙門氏菌 ， 對于該系統(tǒng)來說 ， 需要做的只是加樣 。 為了有效地控制其傳播 ， 就必須有快速和可靠的檢測方法 。 迄今為止 ，應用酶聯(lián)免疫測定檢測食品中的殘留農(nóng)藥主要為除草劑 、 殺蟲劑和殺菌劑 。 ? 檢測數(shù)量： 96孔 （ 包括標準 ） ? 檢測時間： 20分鐘 金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測 ? 蘑菇罐頭約占我國罐頭出口量的 30％ ， 中國蘑菇罐頭一度占據(jù)美國市場 2/3份額 ， 1989年以來 FDA以我國蘑菇罐頭食品含有金黃色葡萄球菌腸毒素并導致消費者傷害為由 ， 對中國蘑菇罐頭采取 ” 自動扣留措施 ” 。 ? 自 1977年抗黃曲霉素 B1的單克隆問世至今 ， 幾乎所有重要真菌毒素如伏馬毒素 、 赭曲毒素 、玉米赤霉烯酮 、 脫氧雪腐鐮刀菌烯酮 、 展青霉素等的 ELISA 檢測方法均已建立 。 （ 2）常用的酶及底物 酶 底 物 顯色反應 測定波長 辣根過氧化物酶 鄰苯二胺 四甲替聯(lián)苯胺 氨基水楊酸 鄰聯(lián)苯甲胺 2,2‘連胺基 2(3乙基 并噻唑啉磺酸 6)銨鹽 橘紅色 黃色 棕色 蘭色 藍綠色 492 460 449 425 642 堿性磷酸酯酶 4硝基酚磷酸鹽 (PNP) 萘酚 ASMx磷酸鹽 +重氮鹽 黃色 紅色 400 500 葡萄糖氧化酶 ABTS+HRP+葡萄糖 葡萄糖 +甲硫酚嗪 +噻唑蘭 黃色 藍色 405 420 β Ｄ－半乳糖苷酶 甲基傘酮基半乳糖苷 (4MuG) 硝基酚半乳糖苷 (ONPG) 熒光 黃色 360,450 420 為什么辣根過氧化物酶可應用于 elisa？ 為什么辣根過氧化物酶可應用于 elisa？ ?（ 1） 成本低 ?（ 2） 熱穩(wěn)定性好 ?（ 3） 顯色反應類型多 ELISA技術在食品分析中的應用 ? 近年來 ， ELISA因其操作程序的規(guī)范化 、 簡單化和檢測的高靈敏性 ， 在農(nóng)藥殘留 、 獸藥殘留 、重要有機物污染 、 生物毒素 、 食品添加劑和人畜共患疾病病原體的快速檢測和分析等食品安全性檢測領域正逐步推廣應用 。 （ 1）酶標記的抗體或抗原的制備 ? 酶標記的抗體或抗原是 ELISA中最關鍵的試劑 。 洗滌后 ， 加入酶標抗球蛋白抗體 (酶標抗抗體 )和底物進行測定 。溫育后洗滌 ， 加入酶標抗體和底物進行測定 。 測定的對象可以是抗體也可以是抗原 。 ? ELISA自上世紀 70年代出現(xiàn)開始 ， 就因其高度的準確性 、 特異性 、 適用范圍寬 、 檢測速度快以及費用低等優(yōu)點 ， 在臨床和生物疾病診斷與控制等領域中倍受重視 ， 成為檢驗中最為廣泛應用的方法之一 。 ? 3） 測定食品中酶的活性作為食品的指標 ， 如過氧化物酶的測定 、 蜂蜜中酶的測定 。 1. 酶法分析的特點及應用類型 ? 酶的特性 ? 酶法檢測的特點 催化效率高 專一性 靈敏性強 快速 特異性、準確 不需要物理分離，干擾少 酶在食品分析中的應用類型 ? 1） 去除樣品中的雜質(zhì) 。 ? 然而 ， 酶法分析真正的發(fā)展應歸于它在臨床實驗室中的廣泛應用 。當時 ， 曾采用麥芽提取物作為過氧化物酶源 ，
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