酶在食品分析中的應(yīng)用(2)-展示頁
2025-01-17 07:36本頁面
【正文】 原與待測抗原二者競爭與抗體結(jié)合；經(jīng)過洗滌分離 ， 最后結(jié)合于固相的抗體與待測抗原含量呈負(fù)相關(guān) 。 洗滌后 ， 加入酶標(biāo)抗球蛋白抗體 (酶標(biāo)抗抗體 )和底物進(jìn)行測定 。 間接法 ? 此法是測定抗體最常用的方法 。溫育后洗滌 ， 加入酶標(biāo)抗體和底物進(jìn)行測定 。 （ 常用硫酸 ） 必需 酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板 DNM9602A酶標(biāo)分析儀 酶標(biāo)板 ELISA的基本類型 ? 隨著 ELISA在生物檢測分析領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用 ，根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件 ， 逐漸演變出了幾種不同類型的檢測方法： （ 5）捕獲法測 IgM抗體； （ 6） ABSELISA法； （ 7） PCR酶聯(lián)免疫測定法； （ 8）斑點免疫酶結(jié)合試驗。 測定的對象可以是抗體也可以是抗原 。 ? （ 2） 通過酶與底物產(chǎn)生 顏色反應(yīng) ， 用于定量測定 。 ? ELISA自上世紀(jì) 70年代出現(xiàn)開始 ， 就因其高度的準(zhǔn)確性 、 特異性 、 適用范圍寬 、 檢測速度快以及費用低等優(yōu)點 ， 在臨床和生物疾病診斷與控制等領(lǐng)域中倍受重視 ， 成為檢驗中最為廣泛應(yīng)用的方法之一 。 如酶聯(lián)免疫法 、 酶電極法等 。 ? 3） 測定食品中酶的活性作為食品的指標(biāo) ， 如過氧化物酶的測定 、 蜂蜜中酶的測定 。 ? 2） 催化待測物生成新的產(chǎn)物 ， 而這種產(chǎn)物更容易被定量分析 。 1. 酶法分析的特點及應(yīng)用類型 ? 酶的特性 ? 酶法檢測的特點 催化效率高 專一性 靈敏性強 快速 特異性、準(zhǔn)確 不需要物理分離，干擾少 酶在食品分析中的應(yīng)用類型 ? 1） 去除樣品中的雜質(zhì) 。 ? 到了 20世紀(jì) 50年代前已有 60種物質(zhì)能借助于酶法分析 。 ? 然而 ， 酶法分析真正的發(fā)展應(yīng)歸于它在臨床實驗室中的廣泛應(yīng)用 。第 10章 酶在食品分析中的應(yīng)用 主要內(nèi)容： 1 酶法分析的特點及應(yīng)用類型 2 酶聯(lián)免疫測定（ ELISA） 3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ PCR） 4 酶生物傳感器 5 酶抑制率法 酶法分析的發(fā)展 ? 酶在定量分析中的應(yīng)用可以追溯到 19世紀(jì)中期 。當(dāng)時 ， 曾采用麥芽提取物作為過氧化物酶源 ，以愈創(chuàng)木酚作為共底物或指示劑測定過氧化氫 。 酶法分析的發(fā)展 ? 如早在 1914年臨床上就開始采用脲酶測定尿中的尿素 ， 但是在臨床實驗室中酶分析的真正突破要推遲到 1958年 ， 當(dāng)時轉(zhuǎn)氨酶分析發(fā)展成為診斷肝病和心臟病的一個有效手段 。 近年來 ， 酶法分析發(fā)展迅速 ， 廣泛應(yīng)用于臨床檢驗 、 食品 、 環(huán)境等生物及其它樣品的檢測 。 如測定果糖 、 多糖等 。 如：淀粉的測定 。 ? 4） 利用酶催化反應(yīng)所產(chǎn)生的一些信息 。 2 酶聯(lián)免疫測定（ ELISA） ? 酶聯(lián)免疫測定 （ enzymelinked immunosorbent assay ， ELISA） 是繼放射免疫測定技術(shù)之后發(fā)展起來的一項新的免疫學(xué)技術(shù) 。 ELISA的 基本原理 ? （ 1） 利用抗原與抗體的特異反應(yīng)將 待測物與酶連接 （ 或建立關(guān)聯(lián) ） 。 ? 它將 酶促反應(yīng)的高效率 和 免疫反應(yīng)的高度專一性 有機(jī)地結(jié)合起來 ， 可對生物體內(nèi)各種微量有機(jī)物的含量進(jìn)行測定 。 重點 ELISA試劑盒的組成 ? 完整的 ELISA試劑盒包含以下各組分： （ 1） 包被抗原或抗體的固相載體 （ 免疫吸附劑 ） ； （
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