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酶在食品分析中的應(yīng)用(2)-展示頁

2025-01-17 07:36本頁面

　　

【正文】原與待測(cè)抗原二者競(jìng)爭(zhēng)與抗體結(jié)合；經(jīng)過洗滌分離，最后結(jié)合于固相的抗體與待測(cè)抗原含量呈負(fù)相關(guān) 。洗滌后，加入酶標(biāo)抗球蛋白抗體 (酶標(biāo)抗抗體 )和底物進(jìn)行測(cè)定。間接法 ? 此法是測(cè)定抗體最常用的方法。溫育后洗滌，加入酶標(biāo)抗體和底物進(jìn)行測(cè)定。（常用硫酸）必需酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板 DNM9602A酶標(biāo)分析儀酶標(biāo)板 ELISA的基本類型 ? 隨著 ELISA在生物檢測(cè)分析領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件，逐漸演變出了幾種不同類型的檢測(cè)方法：（ 5）捕獲法測(cè) IgM抗體；（ 6） ABSELISA法；（ 7） PCR酶聯(lián)免疫測(cè)定法；（ 8）斑點(diǎn)免疫酶結(jié)合試驗(yàn)。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。 ? （ 2）通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng) ，用于定量測(cè)定。 ? ELISA自上世紀(jì) 70年代出現(xiàn)開始，就因其高度的準(zhǔn)確性、特異性、適用范圍寬、檢測(cè)速度快以及費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn) ，在臨床和生物疾病診斷與控制等領(lǐng)域中倍受重視，成為檢驗(yàn)中最為廣泛應(yīng)用的方法之一。如酶聯(lián)免疫法、酶電極法等。 ? 3）測(cè)定食品中酶的活性作為食品的指標(biāo) ，如過氧化物酶的測(cè)定、蜂蜜中酶的測(cè)定。 ? 2）催化待測(cè)物生成新的產(chǎn)物，而這種產(chǎn)物更容易被定量分析。 1. 酶法分析的特點(diǎn)及應(yīng)用類型 ? 酶的特性 ? 酶法檢測(cè)的特點(diǎn) 催化效率高專一性靈敏性強(qiáng) 快速特異性、準(zhǔn)確不需要物理分離，干擾少酶在食品分析中的應(yīng)用類型 ? 1）去除樣品中的雜質(zhì) 。 ? 到了 20世紀(jì) 50年代前已有 60種物質(zhì)能借助于酶法分析。 ? 然而，酶法分析真正的發(fā)展應(yīng)歸于它在臨床實(shí)驗(yàn)室中的廣泛應(yīng)用。第 10章酶在食品分析中的應(yīng)用主要內(nèi)容： 1 酶法分析的特點(diǎn)及應(yīng)用類型 2 酶聯(lián)免疫測(cè)定（ ELISA） 3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ PCR） 4 酶生物傳感器 5 酶抑制率法酶法分析的發(fā)展 ? 酶在定量分析中的應(yīng)用可以追溯到 19世紀(jì)中期。當(dāng)時(shí) ，曾采用麥芽提取物作為過氧化物酶源，以愈創(chuàng)木酚作為共底物或指示劑測(cè)定過氧化氫。酶法分析的發(fā)展 ? 如早在 1914年臨床上就開始采用脲酶測(cè)定尿中的尿素，但是在臨床實(shí)驗(yàn)室中酶分析的真正突破要推遲到 1958年，當(dāng)時(shí)轉(zhuǎn)氨酶分析發(fā)展成為診斷肝病和心臟病的一個(gè)有效手段。近年來，酶法分析發(fā)展迅速，廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn) 、食品、環(huán)境等生物及其它樣品的檢測(cè) 。如測(cè)定果糖、多糖等。如：淀粉的測(cè)定。 ? 4）利用酶催化反應(yīng)所產(chǎn)生的一些信息。 2 酶聯(lián)免疫測(cè)定（ ELISA） ? 酶聯(lián)免疫測(cè)定（ enzymelinked immunosorbent assay ， ELISA）是繼放射免疫測(cè)定技術(shù)之后發(fā)展起來的一項(xiàng)新的免疫學(xué)技術(shù) 。 ELISA的基本原理 ? （ 1）利用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接（或建立關(guān)聯(lián) ）。 ? 它將酶促反應(yīng)的高效率和免疫反應(yīng)的高度專一性有機(jī)地結(jié)合起來，可對(duì)生物體內(nèi)各種微量有機(jī)物的含量進(jìn)行測(cè)定。重點(diǎn) ELISA試劑盒的組成 ? 完整的 ELISA試劑盒包含以下各組分：（ 1）包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（

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