酶在食品分析中的應用(2)-wenkub
2023-01-23 07:36:21 本頁面
【正文】 抗體或抗原的免疫活性 。 （ 2）間接法 ELISA 競爭法 ? 此法可用于抗原和半抗原的定量測定 ， 也可用于測定抗體 。 （ 1）雙抗體夾心法 乙肝表面抗原。 重點 ELISA試劑盒的組成 ? 完整的 ELISA試劑盒包含以下各組分： （ 1） 包被抗原或抗體的固相載體 （ 免疫吸附劑 ） ； （ 2） 酶標記的抗原或抗體 （ 標記物 ） ； （ 3） 酶作用的底物 （ 顯色劑 ） ； （ 4） 陰性和陽性對照品 （ 定性測定 ） ， 參考標準品和控制血清 （ 定量測定 ） ； （ 5） 結合物及標本的稀釋液； （ 6） 洗滌液； （ 含吐溫 20磷酸鹽緩沖液 ） （ 7） 酶反應終止液 。 ELISA的 基本原理 ? （ 1） 利用抗原與抗體的特異反應將 待測物與酶連接 （ 或建立關聯(lián) ） 。 ? 4） 利用酶催化反應所產(chǎn)生的一些信息 。 如測定果糖 、 多糖等 。 酶法分析的發(fā)展 ? 如早在 1914年臨床上就開始采用脲酶測定尿中的尿素 ， 但是在臨床實驗室中酶分析的真正突破要推遲到 1958年 ， 當時轉氨酶分析發(fā)展成為診斷肝病和心臟病的一個有效手段 。第 10章 酶在食品分析中的應用 主要內容： 1 酶法分析的特點及應用類型 2 酶聯(lián)免疫測定（ ELISA） 3 聚合酶鏈式反應（ PCR） 4 酶生物傳感器 5 酶抑制率法 酶法分析的發(fā)展 ? 酶在定量分析中的應用可以追溯到 19世紀中期 。 ? 到了 20世紀 50年代前已有 60種物質能借助于酶法分析 。 ? 2） 催化待測物生成新的產(chǎn)物 ， 而這種產(chǎn)物更容易被定量分析 。 如酶聯(lián)免疫法 、 酶電極法等 。 ? （ 2） 通過酶與底物產(chǎn)生 顏色反應 ， 用于定量測定 。 （ 常用硫酸 ） 必需 酶標儀和酶標板 DNM9602A酶標分析儀 酶標板 ELISA的基本類型 ? 隨著 ELISA在生物檢測分析領域的廣泛應用 ，根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件 ， 逐漸演變出了幾種不同類型的檢測方法： （ 5）捕獲法測 IgM抗體； （ 6） ABSELISA法； （ 7） PCR酶聯(lián)免疫測定法； （ 8）斑點免疫酶結合試驗。 間接法 ? 此法是測定抗體最常用的方法 。 以測定抗原為例 , 將抗原吸附于固相載體；加入待測抗原和一定量特異性抗體 ， 使固相抗原與待測抗原二者競爭與抗體結合；經(jīng)過洗滌分離 ， 最后結合于固相的抗體與待測抗原含量呈負相關 。 ? 酶標記抗體的制備主要有 戊二醛交聯(lián)法 和 過碘酸鹽氧化法 兩種方法 。 其中毒性最大 、 致癌能力最強 的是 黃曲霉毒素 。 另外該方法也正在被廣泛地應用于各種藻類和貝類毒素的檢測 。 ? FDA檢測蘑菇罐頭葡萄球菌腸毒素使用的 TECRA試劑盒在檢測過程中會產(chǎn)生強烈的非特異反應 ， 因此 ， 這種試劑盒是不可靠的 ， 其所得出的檢測結果也是不可靠的 。 ? 從目前來看 ， 盡管 ELISA檢測限度還不能完全達到國外發(fā)達國家技術法規(guī)和限量標準的要求 ，而且抗體制備不易和不能同時完成多種農藥殘留檢測等缺點 ， 但是由于該技術具有樣本前處理簡單 ， 純化步驟少 ， 大量樣本分析時間短 ，適合于做成試劑盒現(xiàn)場篩選 等優(yōu)點 ， 使其可在蔬菜產(chǎn)區(qū) 、 蔬菜批發(fā)市場和海關配備 ， 工商人員可隨身攜帶或建立固定的農藥殘留速測點 ，隨時把殘毒超標的蔬
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1