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酶在食品分析中的應(yīng)用(2)-文庫(kù)吧資料

2025-01-14 07:36本頁(yè)面

　　

【正文】方面。其原理是將捕捉抗體包被到凹形金屬片的內(nèi)面，可以從前增菌液中吸附被檢的沙門氏菌，對(duì)于該系統(tǒng)來說，需要做的只是加樣。沙門氏菌的 ELISA檢測(cè) ? 例如對(duì) 沙門氏菌最低檢測(cè)量可達(dá) 500CFU/g，僅需 22h，比常規(guī)方法縮短了 3～ 4 d，與金黃色葡萄球菌、大腸桿菌無交叉反應(yīng) 。為了有效地控制其傳播，就必須有快速和可靠的檢測(cè)方法。 ? 從目前來看，盡管 ELISA檢測(cè)限度還不能完全達(dá)到國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家技術(shù)法規(guī)和限量標(biāo)準(zhǔn)的要求，而且抗體制備不易和不能同時(shí)完成多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)等缺點(diǎn) ，但是由于該技術(shù)具有樣本前處理簡(jiǎn)單，純化步驟少，大量樣本分析時(shí)間短，適合于做成試劑盒現(xiàn)場(chǎng)篩選等優(yōu)點(diǎn) ，使其可在蔬菜產(chǎn)區(qū) 、蔬菜批發(fā)市場(chǎng)和海關(guān)配備，工商人員可隨身攜帶或建立固定的農(nóng)藥殘留速測(cè)點(diǎn) ，隨時(shí)把殘毒超標(biāo)的蔬菜、水果杜絕在食用之前。迄今為止，應(yīng)用酶聯(lián)免疫測(cè)定檢測(cè)食品中的殘留農(nóng)藥主要為除草劑、殺蟲劑和殺菌劑。 ? FDA檢測(cè)蘑菇罐頭葡萄球菌腸毒素使用的 TECRA試劑盒在檢測(cè)過程中會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的非特異反應(yīng) ，因此，這種試劑盒是不可靠的，其所得出的檢測(cè)結(jié)果也是不可靠的。 ? 檢測(cè)數(shù)量： 96孔（包括標(biāo)準(zhǔn) ） ? 檢測(cè)時(shí)間： 20分鐘金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測(cè) ? 蘑菇罐頭約占我國(guó)罐頭出口量的 30％，中國(guó)蘑菇罐頭一度占據(jù)美國(guó)市場(chǎng) 2/3份額， 1989年以來 FDA以我國(guó)蘑菇罐頭食品含有金黃色葡萄球菌腸毒素并導(dǎo)致消費(fèi)者傷害為由，對(duì)中國(guó)蘑菇罐頭采取 ” 自動(dòng)扣留措施 ” 。另外該方法也正在被廣泛地應(yīng)用于各種藻類和貝類毒素的檢測(cè) 。 ? 自 1977年抗黃曲霉素 B1的單克隆問世至今，幾乎所有重要真菌毒素如伏馬毒素、赭曲毒素、玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯酮、展青霉素等的 ELISA 檢測(cè)方法均已建立。其中毒性最大、致癌能力最強(qiáng) 的是黃曲霉毒素。（ 2）常用的酶及底物酶底物顯色反應(yīng) 測(cè)定波長(zhǎng) 辣根過氧化物酶鄰苯二胺四甲替聯(lián)苯胺氨基水楊酸鄰聯(lián)苯甲胺 2,2‘連胺基 2(3乙基并噻唑啉磺酸 6)銨鹽橘紅色黃色棕色蘭色藍(lán)綠色 492 460 449 425 642 堿性磷酸酯酶 4硝基酚磷酸鹽 (PNP) 萘酚 ASMx磷酸鹽 +重氮鹽黃色紅色 400 500 葡萄糖氧化酶 ABTS+HRP+葡萄糖葡萄糖 +甲硫酚嗪 +噻唑蘭黃色藍(lán)色 405 420 β Ｄ－半乳糖苷酶甲基傘酮基半乳糖苷 (4MuG) 硝基酚半乳糖苷 (ONPG) 熒光黃色 360,450 420 為什么辣根過氧化物酶可應(yīng)用于 elisa？為什么辣根過氧化物酶可應(yīng)用于 elisa？ ?（ 1）成本低 ?（ 2）熱穩(wěn)定性好 ?（ 3）顯色反應(yīng)類型多 ELISA技術(shù)在食品分析中的應(yīng)用 ? 近年來， ELISA因其操作程序的規(guī)范化、簡(jiǎn)單化和檢測(cè)的高靈敏性，在農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重要有機(jī)物污染、生物毒素、食品添加劑和人畜共患疾病病原體的快速檢測(cè)和分析等食品安全性檢測(cè)領(lǐng)域正逐步推廣應(yīng)用。 ? 酶標(biāo)記抗體的制備主要有戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法兩種方法。（ 1）酶標(biāo)記的抗體或抗原的制備 ? 酶標(biāo)記的抗體或抗原是 ELISA中最關(guān)鍵的試劑。以測(cè)定抗原為例 , 將抗原吸附于固相載體；加入待測(cè)抗原和一定量特異性抗體，使固相抗

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