【正文】 處理病人樣品，樣本貯存時間及條 件由被測組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣品。 （ 2）沒有已知的干擾物。 準(zhǔn)確度 —— 方法學(xué)比對 方法學(xué)比對的基本原則 。 ?實驗過程 用待評價方法對回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測定，通常對樣本進(jìn)行 23 次重復(fù)分析，取其均值進(jìn)行計算。 、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。對于可報告范圍高限還應(yīng)計算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差。至少選用三個 高濃度樣本，稀釋倍數(shù)應(yīng)為方法性能標(biāo)明的最大稀釋倍數(shù)、并適 當(dāng)增加或減小稀釋比例。 可報告范圍 樣本要求 最好選擇與測定樣本具有相同基質(zhì)的樣本。 ? 如可能應(yīng)標(biāo)出測定項目的醫(yī)學(xué)決定水平及在此水平處的臨床允許誤差。 線性范圍 結(jié)果報告 線性范圍報告的具體格式不要求，但至少應(yīng)包括以下幾方面： ? 進(jìn)行線性評價的實驗室或生產(chǎn)廠家名稱。這些處理過程包括稀釋、加入添加物或透析、熱處理等，無論進(jìn)行何種處理均應(yīng)以保持基質(zhì)恒定為基本原則。 ? 如果高 /低濃度血清的值未知，可將每種血清編碼，用編碼代表每個血清的相對濃度。 ? 無論是建立或驗證線性范圍，所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個預(yù) 期測定范圍并包括與臨床有關(guān)的重要評價濃度，如最小測定濃度 或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學(xué)決定水平、最大測定濃度或線 性范圍的高限等。進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物檢測時，理想的樣本為分析 物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清。 線性范圍 線性范圍評估的基本原則 ?實驗操作人員應(yīng)熟悉方法原理與操作 ， 能對樣本進(jìn)行正確處理 ， 確保儀器工作狀態(tài)正常 ， 采用適當(dāng)?shù)男?zhǔn)品對儀器進(jìn)行校準(zhǔn) 。 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)記錄：將測定結(jié)果記錄于表格中。 檢測限 檢測限的評估和數(shù)據(jù)處理方法 實驗材料和基本要求 空白樣本的制備：空白樣本應(yīng)不含被測物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測定 常規(guī)樣本相同。如空白樣本難以得到，可采用 5%牛血清或人血清 白蛋白溶液。如果檢測系統(tǒng)對于低于零 的結(jié)果報告為零，應(yīng)記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。 ?儀器的各項性能指標(biāo) （ 如精密度 ） 應(yīng)與標(biāo)稱值相符 ， 不存在明顯的攜帶污染等 。 ? 建立一種定量測定方法的線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇 711個濃度水平。 線性范圍 制備方法 ? 不同濃度水平的樣本可通過將高濃度樣本與低濃度樣本進(jìn)行倍比稀釋得到，注意在進(jìn)行液體吸取時應(yīng)選擇精密度與準(zhǔn)確性好的移液裝置。對于等濃度間隔樣本，可用連續(xù)整數(shù)（如 5）代表連續(xù)樣本。在評價報告中應(yīng)對所使用的稀釋液、添加物、溶劑等的材料來源加以注明。 ? 被評價的方法或試劑名稱，批號。 可報告范圍 可報告范圍評估的基本原則 。 制備方法 低值樣本：將待測樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析 物濃度水平較低）或 5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋，產(chǎn) 生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為 5個濃度水 平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的 10%。 可報告范圍 實驗過程 在一次運行中將低值樣本重復(fù)測定 10次，高值稀釋樣本重復(fù)測定 3次 。 結(jié)果報告 可報告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的 CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取 CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報告范圍低限。 準(zhǔn)確度 —— 回收實驗 ?實驗樣本的基本要求和制備方法 1 選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的 34份。 ?數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告 1 計算回收率：回收率 1 = 2可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差不大于 CLIA 88允許總誤差的 1/2 準(zhǔn)確度 —— 回收實驗 注意事項： 1 加入體積：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的 10%以內(nèi)；并 且保證在加樣過程中的取樣準(zhǔn)確度。 ，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì)控程序。 （ 3）同實驗樣品方法具有相同單位。 2 樣品應(yīng)來自于許多病人，并且此病人的疾病對于被測組成的影 響應(yīng)該是知道的，不要使用含有干擾此方法的組分或條件 (如溶血 ) 樣品。 準(zhǔn)確度 —— 方法學(xué)比對 實驗過程 1 每天選擇 8個臨床病人樣本，按 1到 8的順序編號。只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下， 當(dāng)天的實驗室數(shù)據(jù)才有效。 (漿 )庫；當(dāng)實 驗室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)， 如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品。不要為了得到較小的精密度，都選用較 高值的樣品，甚至超出測量范圍。此外，再根據(jù)檢驗項目的性質(zhì) 在線性區(qū)間內(nèi)選擇另一個值。 使用不同批號試劑和多次校準(zhǔn)都會增加檢驗結(jié)果的變異程度。要保存所有的質(zhì)控 數(shù)據(jù)和失控處理記錄。在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度評估實驗時，一次只能有一個離群值，當(dāng)離群值超過 1個時，應(yīng) 懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。評估結(jié)束時共 有 40對，即 80個測試結(jié)果。所用時間不得少于 20個工作日，這樣所測到的精密度 能更好地反映出該臨床實驗室定量測量方法在一段時間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。從 10個批次中每一樣品 8次差異算出批內(nèi)精密度。在剔除后應(yīng)再增加檢驗次數(shù)，以保證至少有 40批次，80個數(shù)據(jù)進(jìn)行計算。 精密度 精密度 精密度的報告形式 精密度的結(jié)果受眾多因素影響，在報告測量精密度時，應(yīng)同時說明下列各點： ? 批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其 95%置信區(qū)間； ? 批內(nèi)變異系數(shù) 。 ? 檢驗批次數(shù) 。 ? 如適用，使用儀器的種類和型號。 （三）在實施評價實驗前，操作者必須熟悉儀器設(shè)備及測量程序并對精密度及準(zhǔn)確度進(jìn)行評價，在進(jìn)行實驗設(shè)計時要避免遺留效應(yīng)影響分析結(jié)果，確保分析系統(tǒng)保持穩(wěn)定。 基于此，有兩種評估干擾物質(zhì)的基本方法，每一種方法都有它的優(yōu)點及內(nèi)在局限性，當(dāng)兩種方法同時使用時，可提供相互補充的信息。使用適當(dāng)純度的分析物將樣本池中分析物的濃度調(diào)整到醫(yī)學(xué)決定水平，但要避免引入其它的干擾物質(zhì)。 （ 3）每個標(biāo)本所需要的重復(fù)測量次數(shù)： 雙側(cè)檢驗的實驗重復(fù)次數(shù)為：，單側(cè)檢驗用 Z1α 代替 Z1α /2。 （ 5）分析物實驗濃度：分析物實驗濃度應(yīng)選擇兩個濃度水平。能定期（包括：每日、每周、每月、每季度 …… ）對所用儀器進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)，按儀器說明書所要求定期更換易損零配件，每年請國家計量院對儀器濾光片進(jìn)行校驗，使儀器處在正常的工作狀態(tài)，確保儀器有較好的測定精密度及減少樣本、試劑攜帶污染等。試劑應(yīng)存放在說明書規(guī)定的條件下。 穩(wěn)定性 實驗項目： 測定新配制的試劑工作液和穩(wěn)定期末試劑工作液兩組平均值之間的一致性。 （ 2）質(zhì)控品：選擇易得到的、有可靠來源，穩(wěn)定性好的定值或非定值質(zhì)控物、此質(zhì)控物至少要有兩個濃度水平。 Description of the contents Description of the contents Description of the contents 參考值（參考區(qū)間） 定義 ：根據(jù)設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)篩選出進(jìn)行實驗的個體（確定一個人的健康狀況通常是非常重要的）。主