【正文】 。 菌種或樣本運(yùn)輸 安全：為保障人體健康和公共衛(wèi)生安全，在運(yùn)輸可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本時，須按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》的要求進(jìn)行包裝、運(yùn)輸、操作、保藏和管理。在這些條例中，明確規(guī)定 目前對于 微生物實驗室相 關(guān)病原微生物 的操作應(yīng)遵從衛(wèi)生部有關(guān)規(guī)定 ，它們 的 危害程度分類 、 實驗活動所 需生物安全實驗室級別 以及運(yùn)輸包裝分類參見下表 。 1 實驗室生物安全手冊 北京市平谷區(qū)結(jié)核 病預(yù)防控制中心 實驗室 2020 年 2 目錄 第一章 微生物實驗室概況 實驗室簡介 …………………………………………………………………………… 2 實驗室平面圖 ………………………………………………………………………… 2 危害評估 ……………………………………………………………………………… 3 第二章 結(jié)核病實驗室生物安全概述 痰涂片鏡檢實驗室基本要求 ………………………………………………………… 4 結(jié)核分 枝桿菌培養(yǎng)實驗時基本要求 ………………………………………………… 5 結(jié)核分枝桿菌抗結(jié)核藥物敏感試驗實驗室基本要求 ……………………………… 5 第三章 管理體系與組織結(jié)構(gòu)，職責(zé)與責(zé)任 實驗室負(fù)責(zé)人職責(zé) …………………………………………………………………… 6 實驗室技術(shù)人員職責(zé) ………………………………………………………………… 7 實驗室輔助人員的職責(zé) ……………………………………………………………… 7 對實驗室工作區(qū)域負(fù)責(zé) ……………………………………………………………… 7 個人責(zé)任 … …………………………………………………………………………… 8 加班工作人員職責(zé) …………………………………………………………………… 9 負(fù)責(zé)維護(hù)、修理的工作人員 ………………………………………………………… 9 訪問者及進(jìn)修人員 …………………………………………………………………… 10 其他規(guī)定 ……………………………………………………………………………… 10 清潔工 ………………………………………………………………………… ..10 兒童 ………………………………………………… ………………………… .10 寵物 ………………………………………………………………………… .… .10 第四章 實驗室人員培訓(xùn)、考核 實驗室人員培訓(xùn)、考核 ………………………………………………………………… ..11 第五章 職業(yè)健康和健康監(jiān)測 計劃生育和懷孕 ……………………………………………………………………… 12 實驗室人員健康監(jiān)測 ………………………………………………………………… 12 實驗室人員的免疫預(yù)防 ……………………………………………………………… 13 發(fā)生事故后的人員 管理 ……………………………………………………………… 13 第六章 實驗室管理制度、技術(shù)規(guī)范與操作規(guī)程 實驗室的運(yùn)行制度 …………………………………………………………………… 14 實驗室環(huán)境條件 ……………………………………………………………… ..14 管理要求 ………………………………………………………………… .…… .14 實驗室儀器設(shè)備的使用規(guī)范 ………………………………………………………… 14 個人防護(hù)用品使用規(guī)范 ……………………………………………………………… 15 實驗室消毒規(guī)程 ……………………………………………………………………… 15 實驗室廢棄物安全處理程序 ………………………………………………………… 18 3 尖銳器具安全操作規(guī)程 ……………………………………………………………… 19 緊急情況和事故報告程序 …………………………………………………………… 19 第七章 實驗室一般的安全注意事項 使用吸管和移液器 …………………………………………………………………… 24 防止感染性物質(zhì)擴(kuò)散 ………………………………………………………………… 24 生物安全柜的使用 …………………………………………………………………… 25 避免吸入感染性物質(zhì)，避免皮膚和眼部接觸感染性物質(zhì) ………………………… 25 避免傳染性物質(zhì)的意外侵入 ………………………………………………………… 26 分離血清 ……………………………………………………………………………… 26 離心機(jī)的使用 ………………………………………………………………………… 26 混勻器、攪拌器的使用 ……………………………………………………………… 27 研磨器的使用 ……………………… ………………………………………………… 27 冰箱和速凍器的使用和保養(yǎng) ……………………………………………………… ..28 開啟裝有凍干傳染性物質(zhì)的安瓶 ………………………………………………… ..28 關(guān)于血液、體液、組織和排泄物的特殊預(yù)防措施 ……………………………… ..29 玻璃和“銳器” …………………………………………………………………… ..29 用于顯微鏡技術(shù)的薄膜和圖片 …………………………………………………… ..29 消毒 ……………………………………………… ………………………………… ..29 第八章 病原微生物采集、包裝、運(yùn)輸、接收制度 安全指南 ……………………………………………………………………………… 30 標(biāo)本采集的原則 ……………………………………………………………………… 30 標(biāo)本的選擇與采集 …………………………………………………………………… 31 標(biāo)本的接收和拒收標(biāo)準(zhǔn) ……………………………………………………………… 32 標(biāo)本容器 ……………………………………………………………………………… 33 接收標(biāo)本 …………………… ………………………………………………………… 33 打開包裝 ……………………………………………………………………………… 33 第九章 菌種（株）的管理 菌（毒）種及樣本的保管、使用和銷毀制度 ……………………………………… 34 實驗室菌（毒）種使用管理方法 …………………………………………………… 35 結(jié)核菌培養(yǎng)物、菌種包裝與運(yùn)輸 …………………………………………………… 35 結(jié)核分枝桿菌與其它致病性分支桿菌銷毀要求 …………………………………… 36 第十章 實驗室安全管理 實驗 室用電安全 …………………………………………………………………… ..37 實驗室進(jìn)食、飲水和禁煙政策 …………………………………………………… ..37 禁止吸煙 …………………………………………………………………………… ..37 第十一章 重要的電話號碼 電話號碼 ………………………………………………………………………………… ..38 4 前言 《微生物 實驗室 生物 安全 手冊》 介紹 了微生物 實驗室的相 關(guān)生物安全觀念和制度，總結(jié)和補(bǔ)充了一些重要的生物安全指導(dǎo)原則和管理規(guī)程，較具體地規(guī)定了生物安全要求和職責(zé)， 并始終強(qiáng)調(diào)實驗室管理層和個人責(zé)任對實驗室生物安全的重要作用。 表 1. 細(xì)菌分類名錄 序號 病原菌名稱 實驗活動所需生物安全實驗室級別 危害程度分類 運(yùn)輸包裝分類 e 學(xué)名 中文 名 大量活菌操作 a 動物感染實驗 b 樣本檢測 c 非感染性材料的實驗 d A/B UN 編號 6. Mycobacterium bovis 牛型分枝桿菌 第二類 BSL3 ABSL3 BSL2 BSL1 A UN 2814 7. Mycobacterium tuberculosis 結(jié)核分枝桿菌 第二類 BSL3 ABSL3 BSL2 BSL1 A UN 2814 7 第二章 結(jié)核病實驗室生物安全 概述 實驗室環(huán)境安全：根據(jù)我國《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《實驗室生物安全通用要求》、《人間傳染的病原微生物名錄》和 《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法》 的規(guī)定，結(jié)核分枝桿菌大量活菌操作須在符合生物安全三級（ Laboratory Biosafety Level 3， BSL3）的環(huán)境中進(jìn)行；樣本檢測（包括涂片、顯微鏡觀察、樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性試驗、生化鑒定、免疫學(xué)實驗、PCR 核酸提取等初步檢測活動）可以在符合生物安全二級（ Laboratory Biosafety Level 2， BSL2）的環(huán)境中進(jìn)行。 廢棄物處理安全：為了防止疾病傳播，保護(hù)環(huán)境，保障人體健康，醫(yī)療廢棄物的處理應(yīng)該嚴(yán)格按照《中華人民共和國傳染病防治法》和《中華人民共和國固體廢物污染環(huán)境防治法》以及《醫(yī)療廢物管理條例》的相關(guān)規(guī)定妥善處理。 結(jié)核分枝桿菌抗結(jié)核藥物敏感性試驗實驗室基本要求 結(jié)核分枝桿菌藥物敏感性試驗要求在生物安全二級及以上環(huán)境中進(jìn)行。 為了監(jiān)督這些政策的實施，并討論有關(guān)健康與安全的問題，成立了一個健康 與安全委員會，委員會由 實驗室主任、實驗室安全員組成 ， 以監(jiān)督實驗室中具體 的活動。 實驗室 輔助人員 的職責(zé) 實驗室輔助人員 包括：專職消毒人員、廢棄物管理人員、洗刷人員、保潔人員、負(fù)責(zé)維護(hù)、修理的人員等 1. 嚴(yán)格遵守實驗室生物安全管理制度，接受必要的培訓(xùn)、考核、體檢和預(yù)防接種； 2. 對操作過程關(guān)鍵步驟進(jìn)行記錄； 3. 按規(guī)程進(jìn)行常規(guī)消毒和意外事件緊急處理； 4. 發(fā)現(xiàn)生物安全隱患或發(fā)生事故及時向有關(guān)上級報告，參與責(zé)任范圍內(nèi)安全事故的緊急處置。 ★ 有足夠的經(jīng)過培訓(xùn)的工作人員，能確保每天的工作安全無誤。 11 ★ 在處理各種可能發(fā)生的緊急情況時有足夠的應(yīng)急措施。 個人責(zé)任 你必須與實驗室主任和實驗室安全員通力合作，以確保工作環(huán)境健康和安全。 ★ 你對自己所從事的工作完全了解，并能夠正確的操作以盡可能地保證安全。你必須了解自己將要進(jìn)行的工作的程序以及注意事項，并且在 所有實驗室工作人員都同意知情的情況下進(jìn)行。 ★ 要有必要的控制措施，保證工作有條不紊地進(jìn)行，緊急事件的處理要得當(dāng)。你必須提醒其他實驗室的工作人員，由于你的工作可能造成對他們的危險。 加班工作 人員職責(zé) 如果你在非常規(guī)工作時間內(nèi)工作， 例如每天晚上 7 點之后工作，你必須通知 微生物 實驗室安全員或?qū)嶒炇抑魅?，?北京市 平谷區(qū) 結(jié)核 病預(yù)防控制中心 辦公室 。 負(fù)責(zé)維護(hù)、修理的工作人員 當(dāng)工作人員進(jìn)行維護(hù)、修理工作的時候，一定要保證這些區(qū)域內(nèi)是安全的， 同時填寫好 “處于污染環(huán)境 ”的告示，并且要 得到該區(qū)域負(fù)責(zé)人的同意，這些都保 證了人們能夠提前知道有維修人員在工作。 13 訪問者及進(jìn)修人員 實驗室要負(fù)責(zé)訪問者及進(jìn)修人員的健康與安全。 在有實驗室工作人員陪同的情況下，訪問者才能被允許進(jìn)入實驗室，同時他們也必須穿防護(hù)服，適當(dāng)系緊，除了特殊需要的情況下，不準(zhǔn)觸摸任何物品。 如果在進(jìn)行訪問的過程中，發(fā)生了意 外事故或危險，必須馬上報告實驗室安全員和實驗室主任。 寵 物 北京市平谷區(qū)結(jié)核 病預(yù)防控制中心規(guī)定，在實驗室內(nèi)， 不允許 攜帶寵物進(jìn)入。 由實驗室主任組織培訓(xùn)，生物安全管理員整理并歸檔培 訓(xùn)記錄。 國家有關(guān)傳染病防治、生物安全的法律、法規(guī)、條例； 衛(wèi)生部、中心和本實驗室工作規(guī)章制度； 實驗室基本操作標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范； 實驗室生物安全和個人防護(hù)； 實驗室清潔及消毒方法。 計劃生育和懷孕 不論對男性 工作者，還是對女性工作者來說，化學(xué)物質(zhì)、放射源和微生物感染都可能影響生殖器官。 某些因素可能會影響精子的數(shù)量。 健康監(jiān)護(hù)部門（質(zhì)控科）應(yīng)定期了解實驗室人員健康狀況，發(fā)現(xiàn)異常情況及時安排體檢、就醫(yī)，體檢及就醫(yī)情況記入健康監(jiān)護(hù)檔案。 實驗室主任 /負(fù)責(zé)人應(yīng)制定年度免疫接種計劃，報主管領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)后由實驗室組織實施。 發(fā)生實驗室意外事件或生物安全事故后應(yīng)根據(jù)需要進(jìn)行必要的應(yīng)急免疫接種或預(yù)防性服藥，并記入健康 監(jiān)護(hù)檔案。臨時調(diào)離崗位的人員在重新上崗前必須進(jìn)行體檢，體檢結(jié)果達(dá)到崗位健康要求后，由實驗室主任批準(zhǔn)其上崗，永久性調(diào)離崗位的需收回上崗證。 無關(guān)人員嚴(yán)禁進(jìn)入實驗室內(nèi)，以避免實驗室污染。 嚴(yán)禁在實驗室內(nèi)飲食和吸煙，冰箱內(nèi)不得存放食物或其它與實驗無關(guān)的物品。 實驗室儀器設(shè)備的 使用規(guī)范 儀器設(shè)備擺放 ： 應(yīng)放置在防塵