【正文】 ⑵ ⑶ ⑷ ⑸ ⑹ ⑺ 思考：⑴為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？⑵在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？⑶在作第二次以及其后的劃線操作是赤什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？10．系列稀釋操作步驟：⑴ ⑵ ⑶ 11．涂布平板操作步驟：⑴ ⑵ ⑶ ⑷ 【疑難點(diǎn)撥】1．生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)是指生物攝取、利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程。3．無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。【典例解析】例1．關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是 解析：不同的微生物，所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對(duì)微生物的具體情況分析。如二氧化碳，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHC O3，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無(wú)機(jī)鹽；而NaCl則只能提供無(wú)機(jī)鹽。C是正確的，因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。（3）若除去成分②，加入（CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。（7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是 。右表中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源三類，缺乏碳源和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。該培養(yǎng)基若加入（CH2O），培養(yǎng)基中就有了碳源，但除去成分②，卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源，這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。甲、乙、丙都能在Ⅲ種正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株，想篩選出表中細(xì)菌菌株類型。（3）蘑菇的代謝類型為 在生態(tài)系統(tǒng)的成分中屬于 。（2）若從自然界分離得到的樣品中含有谷氨酸棒狀桿菌、圓褐固氮菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌等，現(xiàn)欲篩選出金黃色葡萄球菌，則簡(jiǎn)便的方案是_________________________。13. （共22分）（1） （每空2分，共10分）自養(yǎng)型 有機(jī)碳化合物（或碳源） 生長(zhǎng)因子 氮源（NH4HCO3）競(jìng)爭(zhēng)（2）（4分）配制普遍培養(yǎng)基后加入高濃度食鹽（3）對(duì)數(shù)期 誘導(dǎo)酶（各2分）既保證微生物代謝的需要，又不浪費(fèi)物質(zhì)和能量（4分）14．谷氨酸是生物體內(nèi)一種重要的有機(jī)小分子，谷氨酸鈉是它的鈉鹽，是味精等調(diào)味品的主要成分。（3）我國(guó)微生物發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸常用的菌種有北京棒狀桿菌、谷氨酸棒狀桿菌和黃色短桿菌等，下列生物中與這些菌種在結(jié)構(gòu)上存在明顯區(qū)別的有_____________。（5）谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中，需要添加氨水，它不僅是細(xì)菌生長(zhǎng)所需的_____________，而且起到調(diào)節(jié)培養(yǎng)液_____________的作用，所以應(yīng)該分次加入。（6分）課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)【導(dǎo)學(xué)誘思】1．尿素只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。思考：怎樣找耐高溫的酶呢？4．實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是：人為提供有利于 生長(zhǎng)的條件（包括 等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。這是因?yàn)? 。11．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有： 、 、 和 ，具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。思考：應(yīng)標(biāo)記哪些內(nèi)容？怎樣操作更有利于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行？15．對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選，只是分離純化菌種的第一步，要對(duì)分離的菌種進(jìn)行一步的鑒定，還需要借助 的方法。加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分離效果。3．為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量（單位：株/Kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧型細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn)，放線菌數(shù)約為477萬(wàn)。在這些條件下，才能測(cè)定出細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律。答案：A例2．在微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定中，種內(nèi)斗爭(zhēng)最顯著最激烈的時(shí)期是A．調(diào)整期 B．對(duì)數(shù)期 C．穩(wěn)定期 D．衰亡期解析：種內(nèi)斗爭(zhēng)是一種生態(tài)因素。由此可知，在穩(wěn)定期的種內(nèi)斗爭(zhēng)最激烈。⑴青霉素發(fā)酵產(chǎn)生青霉素。解析：青霉菌屬于真菌，其代謝類型應(yīng)為異養(yǎng)需氧型，而青霉素作為它的代謝產(chǎn)物，并不是它生長(zhǎng)、繁殖所必需的，所以青霉素應(yīng)屬于次級(jí)代謝產(chǎn)物。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析以下敘述，不正確的是 （D）A．鏈霉素能阻止結(jié)核菌的生長(zhǎng) B．鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)霍亂菌更有效C．鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)傷寒菌更有效 D．鏈霉素可以用于治療傷寒病人、味精、胰島素、酸奶的常用菌種分別是A．酵母菌、枯草桿菌、大腸桿菌、乳酸菌 B．酵母菌、大腸桿菌、青霉菌、乳酸菌 C．酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌、大腸桿菌、乳酸菌 D．黃色短桿菌、酵母菌、大腸桿菌、乳酸菌4．下列操作不屬于微生物的分離步驟的是A． 稀釋 B．劃線或涂布 C．接斜面 D．培養(yǎng)5．影響微生物生長(zhǎng)的主要環(huán)境因素是A．陽(yáng)光、溫度、水分 B．溫度、水分、PH C．水分、PH、氧 D．溫度、PH、氧A．氨基酸、核苷酸、多糖、色素 B. 多糖、脂類、維生素、抗生素、氨基酸C．核苷酸、多糖、維生素、毒素、抗生素 D．核苷酸、維生素、多糖、脂類、氨基酸7．微生物代謝的人工控制是指 ，氧氣通入量 、B、C三項(xiàng)8．在微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定中，不可能發(fā)生的是 9．與調(diào)整期長(zhǎng)短有關(guān)的因素中，可縮短調(diào)整期的一組是①用與菌種相同的培養(yǎng)基 ②營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基 ③穩(wěn)定期獲得的菌種 ④對(duì)數(shù)期獲得的菌種 ⑤接種時(shí)間提前 ⑥接種量加大 ⑦接種量減小 ⑧接種種類加大A、①③⑤⑦ B、②③⑤⑦ C、①④⑥ D、②④⑤⑥⑧10．微生物群體生長(zhǎng)善的測(cè)定方法可以是①測(cè)定樣品的細(xì)胞數(shù)目 ②測(cè)定次級(jí)代謝產(chǎn)物的總產(chǎn)量③測(cè)定培養(yǎng)基中細(xì)菌的體積 ④測(cè)定樣品的細(xì)胞重量⑤測(cè)定初級(jí)代謝產(chǎn)物的總產(chǎn)量A.②④ B.①④ C.①③⑤ D.②③④二、非選擇題11．下圖示酵母菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)模式和生長(zhǎng)曲線圖，據(jù)圖回答：(1)從細(xì)胞核的構(gòu)造看，酵母菌屬于 生物，如果發(fā)現(xiàn)一種酵母菌細(xì)胞核中17條染色體，該酵母菌是 倍體。A. 氧氣量 B. 葡萄糖量 C. 酒精量 D. pH值(6)欲收獲酵母菌或其代謝產(chǎn)物，應(yīng)選擇曲線中的 段。②用N表示總菌數(shù)，N0表示初始菌數(shù)，t表示增殖世代數(shù)，乳酸菌數(shù)量增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)表達(dá)式為N=N02t(假設(shè)生長(zhǎng)條件理想穩(wěn)定)。④培養(yǎng)基中不斷產(chǎn)生的乳酸來(lái)自乳酸菌的 作用。③在三支試管中各滴1滴碘液，并搖勻。 。結(jié)果：這種培養(yǎng)液阻止了細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖。答案：1—5 CDCCD 6—10 DDCCB11．(1)真核；單 (2)芽體 (3)A (4)兼性厭氧型 (5)D (6)EF (7)分解者12．(1)分裂生殖(或無(wú)性生殖) 原核(或單細(xì)胞) ②1024000 ③如下圖(會(huì)繪曲線呈下降趨勢(shì)給分) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少④無(wú)氧呼吸(或乳酸發(fā)酵)⑤25℃時(shí)有利于酶的催化功能(或25oC 時(shí)酶的催化效率高)(2)[1]按此實(shí)驗(yàn)步驟不能得出以上實(shí)驗(yàn)結(jié)論[2]①試管上沒有做標(biāo)記，應(yīng)用字母(或數(shù)字)標(biāo)記，如三支試管分別標(biāo)A、B、C②步驟①、②中加入試管中的兩種溶液應(yīng)有量的描述，如步驟①應(yīng)補(bǔ)充3％的可溶性淀粉溶液2mL．③實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組未遵循單一變量原則，兩組中存在酸堿度和溫度兩個(gè)變量，應(yīng)只有溫度一個(gè)變量。課題3 分解纖維素的微生物的分離【導(dǎo)學(xué)誘思】1．纖維素是 類物質(zhì)， 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。5．在土壤中取樣的方法有：① ；② 。分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程通過(guò)選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。3．兩種剛果紅染色法的比較剛果紅在篩選纖維素分解菌上的應(yīng)用已經(jīng)有超過(guò)20年的歷史，在本課題中我們給出了兩種方法。方法二的另一缺點(diǎn)是：有些微生物具有降解色素的能力，它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。在培養(yǎng)過(guò)程中，由于微生物的代謝產(chǎn)熱和機(jī)械磨擦生熱，會(huì)使培養(yǎng)基的溫度升高，高到一定程度，就會(huì)使酶的結(jié)構(gòu)和核酸的結(jié)構(gòu)遭到破壞，培養(yǎng)會(huì)因此而受到影響。答案：B例2．溫度對(duì)發(fā)酵過(guò)程的影響，不正確的是A．溫度過(guò)高，發(fā)酵周期縮短，產(chǎn)量降低 B．溫度不影響生物合成的途徑C．溫度能影響菌種對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收 D．菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成所需的最適溫度不一定相同解析：解答此題需要從以下幾方面入手分析：第一，發(fā)酵過(guò)程需要適宜的溫度，如果溫度過(guò)高，酶很快失活，菌體衰老，發(fā)酵周期就會(huì)縮短，產(chǎn)量也會(huì)降低；第二，溫度能影響生物合成的途徑，這是因?yàn)樯锖铣蛇^(guò)程需要酶，酶的活性與溫度高低有關(guān)；第三，菌種吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)一部分是通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸來(lái)完成的，需呼吸作用提供能量，這與溫度有關(guān)；第四，菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成需體內(nèi)旺盛的代謝作基礎(chǔ)，而用于生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物生成的酶不同，因此所需的最適宜的溫度也不一定相同。⑵“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的 ，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是 。⑹實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行 處理后，才能倒掉。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：培養(yǎng)液使細(xì)菌的增殖停止。(1)實(shí)驗(yàn)原理：圓褐固氮菌是自生固氮菌，能在無(wú)氮培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)繁殖而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌的生長(zhǎng)繁殖，而會(huì)抑制