【正文】 統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是 。思考：怎樣找耐高溫的酶呢？4．實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是：人為提供有利于 生長的條件（包括 等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。3．PCR（ ）是一種在體外將 。（6分）課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)【導(dǎo)學(xué)誘思】1．尿素只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。（7）如圖所示連續(xù)培養(yǎng)的方法，以一定的速度不斷添加新的培養(yǎng)基，同時(shí)又以同樣的速度放出舊的培養(yǎng)基，此工藝流程可以大大提高生產(chǎn)效率，試闡述其原因_______________________。（5）谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)過程中，需要添加氨水，它不僅是細(xì)菌生長所需的_____________，而且起到調(diào)節(jié)培養(yǎng)液_____________的作用，所以應(yīng)該分次加入?？梢耘袛喙劝彼岚魻顥U菌的新陳代謝類型是_____________型。（3）我國微生物發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸常用的菌種有北京棒狀桿菌、谷氨酸棒狀桿菌和黃色短桿菌等，下列生物中與這些菌種在結(jié)構(gòu)上存在明顯區(qū)別的有_____________。（1）谷氨酸的R基為—CH2—CH2－COOH，其結(jié)構(gòu)式為_____________。13. （共22分）（1） （每空2分，共10分）自養(yǎng)型 有機(jī)碳化合物（或碳源） 生長因子 氮源（NH4HCO3）競爭（2）（4分）配制普遍培養(yǎng)基后加入高濃度食鹽（3）對數(shù)期 誘導(dǎo)酶（各2分）既保證微生物代謝的需要，又不浪費(fèi)物質(zhì)和能量（4分）14．谷氨酸是生物體內(nèi)一種重要的有機(jī)小分子，谷氨酸鈉是它的鈉鹽，是味精等調(diào)味品的主要成分。在大規(guī)模生產(chǎn)中，需要將選育的工程菌菌種經(jīng)過多次擴(kuò)大培養(yǎng)，再進(jìn)行接種，擴(kuò)大培養(yǎng)選用_________期的細(xì)菌，并通入無菌空氣；若把大腸桿菌接種到葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基中，只有葡萄糖全被消耗后才合成半乳糖苷酶來利用乳糖。（2）若從自然界分離得到的樣品中含有谷氨酸棒狀桿菌、圓褐固氮菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌等，現(xiàn)欲篩選出金黃色葡萄球菌，則簡便的方案是_________________________。成分含量NH4HCO3KH2PO4CaSO4FeCl2維生素少許H2O1000mL請據(jù)表中內(nèi)容回答：（1）該配方若用于培養(yǎng)微生物，則該生物的同化作用類型是___________________；若用該配方來培養(yǎng)圓褐固氮菌，則應(yīng)加入___________和_____________，并可以除去的成分是_____________。（3）蘑菇的代謝類型為 在生態(tài)系統(tǒng)的成分中屬于 。請回答下列問題：（1）按化學(xué)成分分類，該培養(yǎng)基為 培養(yǎng)基，按物理性質(zhì)分類該培養(yǎng)基為 培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株，想篩選出表中細(xì)菌菌株類型。下列有關(guān)微生物營養(yǎng)的說法正確的是A．乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B．微生物生長中不可缺少的一些微量的無機(jī)物稱為生長因子 C．培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對微生物的增殖越有利 D．生長因子一般是酶或核酸的組成成分，微生物本身合成這些生長因子的能力往往不足。甲、乙、丙都能在Ⅲ種正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。答案：⑴自養(yǎng)型微生物 ⑵含碳有機(jī)物 金黃色葡萄球菌 ⑶固氮微生物 ⑷3 ⑸調(diào)整pH ⑹依微生物的生長需要確定 ⑺瓊脂（或凝固劑）【課堂演練】一、選擇題 ﹙﹚1．有可能作為異養(yǎng)微生物碳源的是A．牛肉膏 B．含碳有機(jī)物 C．石油 D．含碳無機(jī)物2．根瘤菌能利用的營養(yǎng)物質(zhì)的組別是A．NH3，（CH2O），NaCl B．N2，（CH2O），CaCl2C．銨鹽，CO2，NaCl D．NO2，CO2，CaCl23．配制培養(yǎng)基的敘述中正確的是A．制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂 B．加入青霉素可得到放線菌C．培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源 D．發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基4．自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是A．碳源 B．氮源 C．無機(jī)鹽 D．特殊營養(yǎng)物質(zhì)5．下表是有關(guān)4種生物的能源、碳源、氮源和代謝類型的概述。該培養(yǎng)基若加入（CH2O），培養(yǎng)基中就有了碳源，但除去成分②，卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源，這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。該培養(yǎng)基中沒有碳源，說明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的，即可培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物了。右表中的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機(jī)鹽、氮源三類，缺乏碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。當(dāng)然這只適用于合成培養(yǎng)基，如果是一個(gè)天然培養(yǎng)基就不能從培養(yǎng)基的成分上區(qū)分它是培養(yǎng)何種微生物的。（7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是 。（5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行的是 。（3）若除去成分②，加入（CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。（2）若不慎將過量NaCl加入培養(yǎng)基中。C是正確的，因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。答案：D例2．下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是 解析：滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。如二氧化碳，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHC O3，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽；而NaCl則只能提供無機(jī)鹽。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時(shí)是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同時(shí)是能源，如葡萄糖；有的碳源同時(shí)是氮源，也是能源，如蛋白胨?！镜淅馕觥坷?．關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是 解析：不同的微生物，所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對微生物的具體情況分析。5．為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。3．無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。在人及動物，營養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類；在植物，營養(yǎng)物質(zhì)包括礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類；在微生物，則有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。9．平板劃線的操作步驟如下：⑴ ⑵ ⑶ ⑷ ⑸ ⑹ ⑺ 思考：⑴為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？⑵在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？⑶在作第二次以及其后的劃線操作是赤什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？10．系列稀釋操作步驟：⑴ ⑵ ⑶ 11．涂布平板操作步驟：⑴ ⑵ ⑶ ⑷ 【疑難點(diǎn)撥】1．生物的營養(yǎng)營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。平板劃線法是指 。思考： ⑴培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50左右，才能用來倒平板。常用的滅菌方法有 、 、 ，此外，實(shí)驗(yàn)室里還用 或 進(jìn)行消毒。思考：為什么大多數(shù)培養(yǎng)基都需要含有四類營養(yǎng)物質(zhì)？3．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 。培養(yǎng)基可以分為 和 。學(xué)生通過本專題的學(xué)習(xí)，應(yīng)當(dāng)掌握培養(yǎng)基、消毒滅菌等有關(guān)微生物培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識，應(yīng)當(dāng)掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)，并可以運(yùn)用相關(guān)技術(shù)解決生產(chǎn)生活中有關(guān)微生物計(jì)數(shù)、微生物分離與培養(yǎng)等實(shí)際問題。課題2和課題3要求分離某種特定的微生物，難度較大，探究性也更強(qiáng)。專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用【學(xué)習(xí)導(dǎo)航】本專題包含三個(gè)方面的內(nèi)容：；；課題3分解纖維素的微生物的分離。課題1介紹了最基本的微生物技術(shù)，是開展其他兩個(gè)課題的基礎(chǔ)。此外，本專題中所強(qiáng)調(diào)的無菌操作技術(shù)，將有助于“專題3植物組織培養(yǎng)技術(shù)”的順利完成。課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)【導(dǎo)學(xué)誘思】1．培養(yǎng)基的配制原則是 。2．培養(yǎng)基一般都含有 、 、 、 四類營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對 、 以及 的要求。4．避免雜菌污染的方法主要包括以下四個(gè)內(nèi)容： 5．消毒是指 滅菌是指 思考：消毒與滅菌的相同點(diǎn)與區(qū)別分別是什么？6．實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法是 ，此外，人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用 、 等。7．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是⑴ ，⑵ ，⑶ ，⑷ ，⑸ 。你用什么方法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？⑵為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？⑶平