【正文】 ..................... 2 左旋多巴 ......................................................................................................................... 2 多巴胺受體激動(dòng)劑 (DARA) ........................................................................................... 2 單胺氧化酶 2B(MAO2B)抑制劑 ................................................................................... 4 兒茶酚 2 氧位 2 甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑 (COMT) ............................................................... 4 谷氨酸受體拮抗劑 ......................................................................................................... 5 抗膽堿制劑 ..................................................................................................................... 5 腺苷 A2A 拮抗劑 ............................................................................................................. 5 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 (neurotrophic factors ,NTFs) ................................................................... 5 基因治療 ......................................................................................................................... 6 腺苷 A2A 受體拮抗劑治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究近況 ................................................... 6 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 ............................................................................................................. 6 腺苷 A2A 受體對(duì)紋狀體神經(jīng)元的影響 ......................................................................... 7 腺苷 A2A 受體拮抗劑 ..................................................................................................... 9 第 2章 實(shí)驗(yàn)部分 .................................................................................................................. 11 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 .............................................................................................................. 11 實(shí)驗(yàn)步驟 .......................................................................................................................... 13 第一步反應(yīng) ................................................................................................................... 13 第二步反應(yīng) ................................................................................................................... 14 第三步反應(yīng) ................................................................................................................... 14 第四步 反應(yīng) ................................................................................................................... 15 第五步反應(yīng) ................................................................................................................... 15 第六步反應(yīng) ................................................................................................................... 15 第七步反應(yīng) ................................................................................................................... 16 第八步反應(yīng) ................................................................................................................... 16 分析方法 .......................................................................................................................... 13 第 3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 .................................................................................................... 11 實(shí)驗(yàn)收率 .......................................................................................................................... 18 LCMS 圖譜分析 .............................................................................................................. 20 核磁圖譜分析 .................................................................................................................. 23 結(jié) 論 ........................................................................................................................................... 32 致 謝 ............................................................................................................. 錯(cuò)誤 !未定義書(shū)簽。 我們通過(guò)核磁檢測(cè)驗(yàn)證所得每步產(chǎn)物為期待產(chǎn)物，并對(duì)一些產(chǎn)物進(jìn)行 LCMS 檢測(cè)，所得產(chǎn)物的純度都達(dá)到 89%以上。s disease use an overview of the status and progress of Parkinson39。s disease。隨著老齡化社會(huì)的到來(lái)， PD 患病人數(shù)有增加趨勢(shì)。隨著時(shí)間的延長(zhǎng) ， 病情呈進(jìn)行性加重 ， 嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量 ， 給社會(huì)和家庭帶來(lái)了嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)。隨著對(duì) PD 發(fā)病機(jī)制的不斷探索 ， 越來(lái)越多的藥物應(yīng)用于 PD 不同發(fā)病階段的臨床治療。選擇性腺苷 A2A 拮抗劑的研究 ,也顯示長(zhǎng)期給藥可以加強(qiáng)左旋多巴作用 ， 而不會(huì)有異動(dòng)癥。 外源性多巴胺不能透過(guò)血腦屏障(BBB) ， 應(yīng)用其前體物左旋多巴能通過(guò) BBB 進(jìn)入腦內(nèi) ， 經(jīng)多巴脫羧酶脫羧轉(zhuǎn)變成多巴胺 ，從而起到補(bǔ)充腦內(nèi)多巴胺的作用。因此 ， 腦外多巴胺脫羧酶抑制劑與左旋多巴合并應(yīng)用可阻止外周多巴胺的形成 ， 從而減少左旋多巴的用量 ， 加強(qiáng)其療效并減少其外周不良反應(yīng)。近期開(kāi)發(fā)的依替左旋多巴 (etilevodopa) [3]即左旋多巴乙酯 ， 在腸道中很快水解成左旋多巴 ， 而在胃中則不被水解。最近的研究發(fā)現(xiàn)多巴胺在腦內(nèi)降解時(shí)可產(chǎn)生大量的氧自由基 ， 對(duì)神經(jīng)元有損傷作用 [4]。半合成的麥角類衍生物 [2 ,5]溴隱亭 (bromocriptine)、麥角乙脲 (lisuride)等 ， 主要作于D2受體 ， 培高利特 (pergolide)即協(xié)良行 ， 直接作用于 D1和 D2受體 ， 其療效維持時(shí)間較長(zhǎng) ，部分對(duì)溴隱亭失去反應(yīng)的患者在改用培高利特后仍有效，阿樸嗎啡類如阿樸嗎啡(apo2morphine)， 20 世紀(jì) 50 年代開(kāi)始用于抗帕金森病，其作用時(shí)間短，多采用皮下注射 ，也可肌內(nèi)注射、口服和經(jīng)皮給藥 ， 由于阿樸嗎啡常誘發(fā)給藥部位的皮膚損害 ， 在美國(guó)已停用。 新的多巴胺激動(dòng)劑在輔助左旋多巴治療晚期帕金森患者 ， 療效等同或更 優(yōu)于第一代激動(dòng)劑 ， 且不良反應(yīng)更小 [7]。研究結(jié)果表明受體激動(dòng)劑單獨(dú)用于早期治療要優(yōu)于安慰劑 ， 帕金森病統(tǒng)一量表 (UPDRS)和日常生活功能量表 (ADL)評(píng)分都顯著 改善 ， 同時(shí)與左旋多巴相比 ， 可以減少運(yùn)動(dòng)并發(fā)癥 ， 原因是受體激動(dòng)劑作用時(shí)間較左旋多巴長(zhǎng) ， 可以長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)刺激多巴胺受體 [10]。 帕金森病患者具有突觸后多巴胺受體 ， 完全受體激動(dòng)劑會(huì)導(dǎo)致受體迅速脫敏 ， 而部分受體激動(dòng)劑不會(huì)產(chǎn)生這種不良作用 ， 能使突觸后受體更持久地處于激活狀態(tài)。多巴胺在腦內(nèi)通過(guò) MAO2B 氧化降解 ， 并在其代謝過(guò)程中產(chǎn)生大量氧自由基損傷神經(jīng)元。本品口服吸收好 ,較易透過(guò)血腦屏障。 拉扎貝胺 (lazabemide)、 mefegiline、雷沙吉蘭 (rasagiline)和 safinamide[17]等系正在臨床研究階段的新的 MAO2B 抑制劑。目前常用的有托卡朋 (tolcapone)和恩他卡朋 (entacapone)。d 1 耐受性很好 ， 在紅細(xì)胞內(nèi)迅速產(chǎn)生可逆性的 COMT抑制作用 ,其抑制作用和劑量有關(guān)。恩他卡朋 ， 商品名 Comtan， 為芬蘭的 Orion公司開(kāi)發(fā) ， 于 1999 年 10 月獲得 FDA 批準(zhǔn)。d 1。選擇性拮抗 NMDA 受體的藥物不但能減少運(yùn)動(dòng)并發(fā)癥 ,還能改善帕金森癥狀。 抗膽堿制劑 該類藥物能對(duì)抗失衡后過(guò)多的乙酰酰膽堿的作用 ， 也抑制突觸間隙中多巴胺的再攝取 ， 糾正乙酰膽堿和多巴胺的不平衡。它們與多巴胺 D2 受體同位于紋狀體內(nèi)蒼白球刺狀輸出神經(jīng)元上 ， 兩種受體有相互拮抗的作用。 Kanda 等 [21]在 MPTP 處理中發(fā)現(xiàn)聯(lián)合使用 KW26002 與左旋多巴或選擇性 D1， PD2多巴胺激動(dòng)劑可以提高抗帕金森作用 ,但不會(huì)增加異動(dòng)癥。對(duì)中樞多巴胺能神經(jīng)元有選擇 6 性保護(hù)作用 ， 能促進(jìn) 黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的生存與再生。在 MPTP 和 62OHDA 損傷的藥物模型中 ， BDNF 和 GDNF 證實(shí)可以促進(jìn)多巴胺能神經(jīng)元生存 ， 在早期嚙齒類動(dòng)物研究中 ， 低劑量的 BDNF 不能減緩黑質(zhì)多巴胺減少 ，但在后來(lái)的更高劑量的研究中發(fā)現(xiàn)確實(shí)能起到改善作用。此外 ， 由于 NTFs本身不能通過(guò)血腦屏障 ， 因此 ， 在考慮用神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子治療帕金森病或其他 CNS 神經(jīng)退化性疾病的可能性時(shí) ， 必須解決給藥途徑的問(wèn)題。針對(duì)帕金森病的治療基因包括 3 類 ， 一是表達(dá)多巴胺合成的酶基因 ， 二是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因 ， 三是 BCL22 基 因。 腺苷 A2A 受體 拮抗 劑治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究近況 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 目前，治療帕金森?。?PD）最有效和最常用的藥 物是左旋多巴（ Ldopa），通常與外周芳香氨基酸脫