【正文】 神經(jīng)信號傳輸物質(zhì) ， 中樞神經(jīng)系統(tǒng)中多巴胺的缺乏乃是引起本病各種癥狀、體征的主要原因。 2 第 1 章 文獻綜述 8氯甲基 5甲基 2， 3， 4， 5環(huán)己烯 [1， 4]氧氮雜環(huán)簡介 8氯甲基 5甲基 2， 3， 4， 5環(huán)己烯 [1， 4]氧氮雜 環(huán) 的化學分子式 C11H14NOCl，其質(zhì)量摩爾分數(shù) 為 ，為淺黃色固體，是一種新型化合物，也是一種重要的醫(yī)藥中間體，此化合物可以用于合成 A2A 受體拮抗劑，有助于帕金森病的治療，而且此化合物還有一些未知的性質(zhì)和用途有待于發(fā)現(xiàn)研究，因此它具有著重大的意義。 左旋多巴的不良反應主要有消化道反應 、直立性低血壓、神經(jīng)精神癥狀、運動波動和運動障礙。此外 ， 多 3 巴胺受體激動劑在體內(nèi)不進行氧化代謝 ， 不產(chǎn)生自由基或誘導氧化的反應應激。但須指出的是 ,左旋多巴對年老體弱患者仍然是最好的初始治療藥物 ， 因其具有最佳的即刻作用效果 [8]。另有研究表明 ， 通過多巴胺重吸收阻滯劑 ， 如 br2asofensine[13]和 4 BTS742398[14]， 間接刺激多巴胺受體 ， 在 12 甲基 242 苯基 21 ,2 ,3 ,62 四氫吡啶 (MPTP)誘導的帕金森病靈長類動物模型中產(chǎn)生抗帕金森作用 ， 但不產(chǎn)生異動癥。與左旋多巴合用時效果更明顯 ， 可改善 50 %～ 70 %的患者的癥狀波動。本品在中樞和外周均有作用 ， 可有效延長左旋多巴血漿半衰期 ， 但并不升高左旋多巴峰濃度。臨床劑量范圍 400～ 1 600 mg但它們是一些具有微弱拮抗作用的非特異性 NMDA 受體拮抗劑 ，臨床應用效果不佳 ， 且不良反應多。 在早期 ， 用黃嘌呤衍生物治療帕金森病的試驗失敗了 ， 但后來的研究表明 ， 使用更低劑量的該類藥物可以改善帕金森病。 應用高度敏感性 ELISA 法 ， Mogi 等 [22]發(fā)現(xiàn)在帕金森病患者大腦的黑質(zhì)中 BDNF 和NGF 濃度明顯降低 ， 并指出 BDNF 缺乏可能與黑質(zhì)紋狀體多巴胺神經(jīng)元退行性變性的發(fā)病機制有關(guān)。 基因治療 隨著分子克隆與基因重組技術(shù)的發(fā)展 ， 從分子水平開展疾病基因治療主要有 3 種途徑 :轉(zhuǎn)基因治療、反義 RNA 和反基因技術(shù)。 腺苷 A2A 受體是 4種已經(jīng)克隆出來的腺苷受體之一，也是 7個跨膜成分之一，為 G 蛋白偶聯(lián)受體，經(jīng)自放射測定，配體結(jié)合和經(jīng)腺苷受體激動劑刺激 cAMP 等研究發(fā)現(xiàn)它主要位于紋狀體、伏隔核和嗅球。由 DA失神經(jīng)支配引起的前腦啡表達增高也能被非選擇性腺苷受體拮抗劑咖啡因所阻止 [25]。 A2A受體刺激紋狀體突觸體釋放 Ach是以蛋白激酶 A 和 C 介導的方式。由此可見， A2A 受體拮抗劑的作用是通過增加控制紋狀體 Gpe 神經(jīng)元的內(nèi)源性負反饋，從而代償 DA 介導對這些細胞的調(diào)節(jié)的缺乏。因此，多巴胺神經(jīng)支配總的作用是引起兩個傳出通路活動的失平衡，這也在編碼神經(jīng)肽的基因表達中得到了反映。優(yōu)化這些化合物，改進其效力 ， 選擇性、和動力學特性而得到一些關(guān)鍵衍生物。 稀堿液處理能誘發(fā)不由自主的肌肉運動，有時 ， 在極端的情況下會出現(xiàn)張力 ， 這是令人非常痛苦的 ， 有些則是身體不同的部位發(fā)生肌肉痙攣 ， 使其處于更虛弱的潛在疾病狀態(tài)。 10 KW 60021 NN NNO M eO M eOO 最近 ， 抗瘧化合物 mefloquine 2是一種潛在的和合理的選擇性拮抗，這個 A2A受體如下 ，我們努力優(yōu)化這種化合物，并找到相關(guān)系列的化合物作為臨床藥物 ，如下： NH ONHC F 3C F 3 雖然我們可以準備衍生物 ， 我們迄今所發(fā)現(xiàn)的這些平行特性的優(yōu)化是一個相當大的挑戰(zhàn)。 第四步反應 OB o cNOH . H C lNH C l / d i o x a n e 4 5 選取三升三口燒瓶，將第三步的產(chǎn)物（ 4） ，用 1000ml 無水二氯甲烷溶解，然后加入二氧六環(huán) 500ml，使其反應 小時，可發(fā)現(xiàn)混合液伴隨著白色沉淀物的形成，點板確認反應完全后將反應液然旋干，然后用甲基叔丁基醚潤洗三次，將溶液過濾，收集白色固體即得到產(chǎn)物 。 18 第 3 章 實驗結(jié)果與討論 實驗收率 收率 =反應物質(zhì)量摩爾分數(shù)反應物質(zhì)量產(chǎn)物質(zhì)量摩爾分數(shù)產(chǎn)物質(zhì)量? 表 各步反應收率 step of the reaction yield 對于第六步反應，我們開始時根據(jù)所提供的文獻用第五步的產(chǎn)物 500mg 溶解于氯仿中，加入碳酸鈉，通入氯氣，使其在油浴溫度 60 度反應，但通過這次小試反應不成功，反應物有點雜， Cl 并不是單個上在甲基上，而是由兩個 Cl 原子發(fā)生取代，不是所要的化合物。適合高附加值的產(chǎn)品。第五步反應中加入稍微堿性的碳酸鉀，使其與鹽酸鹽反應，硫酸二甲酯上的甲基取代上面的 氨 氮的氫，可能由于反應過程中有些許水產(chǎn)生，對反應有一些影響，也因為在第四步反應后沒有進行過柱純化，反應物的純度不高，由 LCMS 圖 得 其 純度為 %，這 也造成了 產(chǎn)率偏低。 26 圖 產(chǎn)物（ 4）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (4) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 21 個氫原子，與所要化合物的化學分子式相同，是期望產(chǎn)物。 32 結(jié) 論 本反應以 5甲基 2氨基苯酚為原料，通過甲 Boc 酸酐來保護氨基，然后通過親核取代成環(huán)，隨后形成鹽酸鹽，然后經(jīng)過氧化，還原，氯代最終形成所要化合物，在實驗的過程中也遇到了一些問題，例如反應路線不通，產(chǎn)率較低，純度不高， 如往甲基上上氯這個路線， 我們通 過探索先讓甲基氧化成醛，醛再還原為羥基，最后進行氯代，使得甲基上成功上氯，使路線得以暢通，而且實驗過程中通過對實驗試劑的改變，以及試劑摩爾比的變動使得每步反應的產(chǎn)率較好，如第六步反應過程中對甲醇和水的比例的提高使產(chǎn)率從 30%上升到 50%以上，從而節(jié)省了大量的資源，通過對每步反應的產(chǎn)物進行核磁分析，證明所得產(chǎn)物均為所期待產(chǎn)物，而且對有些產(chǎn)物進行了 LCMS 分析，所得純度較好，如產(chǎn)物（ 5）的純度為 %，產(chǎn)物（ 6）純度為 100%，產(chǎn)物（ 7）純度為 %，產(chǎn)物（ 8）的純度為 100%，這也為以后的反應 的純度提供了保障，通過對這類新型醫(yī)藥中間體的研究也為腺苷 A2A 拮抗 劑的研究給予很大的幫助，也可能會成為新型治療帕金森病藥物，有著巨大的發(fā)展前景，也為帕金森病患者帶來福音。 23 圖 產(chǎn)物（ 8）的 液相色譜 質(zhì)譜 圖 Figure LCMS figure 0f the product (8) 此圖為第 七步 產(chǎn)物 （ 8）的 譜圖，產(chǎn)物純度為 100%，產(chǎn)物很理想 核磁圖譜分析 24 圖 產(chǎn)物（ 2）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (2) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 14 個氫原子，與所要化合物的化學分子式相同，是期望產(chǎn)物。 表 3. 2 不同溶劑對反應產(chǎn)率的影響 Table 3. 2Different solvents on the influence of the reaction yield 序列 溶劑 收率（ %） 1 二氧六環(huán) 0 2 無水四氫呋喃 0 3 水 10 4 甲醇：水 =10:1 30 5 甲醇：水 =16:1 50 20 由第六步反應我們可以知道反應液的摩爾比以及幾倍當量都對產(chǎn)率有著很大的影響，我們在實驗過程中要善于探索，尋求最佳方案。 IBX 是鄰碘苯甲酸的衍生物。 分析方法 核磁檢測：取產(chǎn)品 3~5mg 于 5ml 核磁管中，（ 5）號產(chǎn)品用溶劑 DMSO（ %標準溶液） 溶解，其余的產(chǎn)品用溶劑 CDCl3（ %標準溶液） 溶解，用 400MZ 氫譜核磁共振儀檢測。取樣送核磁檢測。 通過這些發(fā)現(xiàn) ,拮抗劑已經(jīng)表現(xiàn)出良好的耐受性，口服拮抗劑受體。這種待遇不盡理想 ， 藥物遭受飄忽不定的藥物動力學、導致出現(xiàn)一些相關(guān)的問題 ， 通過對藥物進行預測 ， 我們發(fā)現(xiàn)如果太少藥物被吸收進入大腦 ， 不夠一定級別的多巴胺達成 ， 這導致過早的重現(xiàn)帕金森癥狀 ， 被稱為一個 “關(guān)閉事件 ”。這認為是可以會發(fā)生的 ,至少在部分 ,可以增加多巴胺神經(jīng)元的敏感性和紋狀體多巴胺的耗竭水平。這一通路活動增強還伴隨有這些神經(jīng)元編碼前腦非肽的基因表達增強 [2]。因此 ，通過增加（ GABA 介導）抑制性傳入（從返回側(cè)枝）使得 A2A 受體具有降低中型棘型傳出神經(jīng)元活性的作用。另一觀點認為煙堿型受體拮抗劑的治療作用是對 M1受體介導的促進紋狀體 Gpe 神經(jīng)元點燃的抑制以及 M4受體介導的紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元點燃的抑制。 Ach 受體功能只有當全部抑制了 DA 功能后才能被觀察到 [6]。 腺苷 A2A 受體 拮抗 劑治療帕金森病的實驗研究近況 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀 目前，治療帕金森?。?PD）最有效和最常用的藥 物是左旋多巴（ Ldopa），通常與外周芳香氨基酸脫羧酶抑制劑合用如卡比多巴和芐絲肼。此外 ， 由于 NTFs本身不能通過血腦屏障 ， 因此 ， 在考慮用神經(jīng)營養(yǎng)因子治療帕金森病或其他 CNS 神經(jīng)退化性疾病的可能性時 ， 必須解決給藥途徑的問題。對中樞多巴胺能神經(jīng)元有選擇 6 性保護作用 ， 能促進 黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的生存與再生。它們與多巴胺 D2 受體同位于紋狀體內(nèi)蒼白球刺狀輸出神經(jīng)元上 ， 兩種受體有相互拮抗的作用。選擇性拮抗 NMDA 受體的藥物不但能減少運動并發(fā)癥 ,還能改善帕金森癥狀。恩他卡朋 ， 商品名 Comtan， 為芬蘭的 Orion公司開發(fā) ， 于 1999 年 10 月獲得 FDA 批準。目前常用的有托卡朋 (tolcapone)和恩他卡朋 (entacapone)。本品口服吸收好 ,較易透過血腦屏障。 帕金森病患者具有突觸后多巴胺受體 ， 完全受體激動劑會導致受體迅速脫敏 ， 而部分受體激動劑不會產(chǎn)生這種不良作用 ， 能使突觸后受體更持久地處于激活狀態(tài)。 新的多巴胺激動劑在輔助左旋多巴治療晚期帕金森患者 ， 療效等同或更 優(yōu)于第一代激動劑 ， 且不良反應更小 [7]。最近的研究發(fā)現(xiàn)多巴胺在腦內(nèi)降解時可產(chǎn)生大量的氧自由基 ， 對神經(jīng)元有損傷作用 [4]。因此 ， 腦外多巴胺脫羧酶抑制劑與左旋多巴合并應用可阻止外周多巴胺的形成 ， 從而減少左旋多巴的用量 ， 加強其療效并減少其外周不良反應。選擇性腺苷 A2A 拮抗劑的研究 ,也顯示長期給藥可以加強左旋多巴作用 ， 而不會有異動癥。隨著時間的延長 ， 病情呈進行性加重 ， 嚴重影響病人的生活質(zhì)量 ， 給社會和家庭帶來了嚴重的負擔。s disease。 我們通過核磁檢測驗證所得每步產(chǎn)物為期待產(chǎn)物，并對一些產(chǎn)物進行 LCMS 檢測，所得產(chǎn)物的純度都達到 89%以上。我們以 5甲基 2氨基苯酚為原料，經(jīng)過加 Boc 酸酐保護氨基，以及親核取代成環(huán)，氧化，還原，氯化等一系列的反應生成最終化合物， 而 該化合物將做為中間體來合成 這類 腺苷 A2A 受體拮抗劑。s disease, and find the way of the synthesis of a new type of drug intermediates. We use 5 methyl 2 Aminophenol as raw materials, by adding protection of amino Boc anhydride after nucleophilic substitution cyclization, oxidation, reduction, chloride and a series of reaction to generate the final pound, the pound will be used as intermediates to the synthesis of this type of adenosine A2A receptor antagonist. Through the NMR testing,we verify the each step of product is what we are looking forward to, and through some products LCMS detection, the purity of the products are more than 89%. Keywords: Parkinson39。 PD 臨床主要癥狀是靜態(tài)性震顫、僵硬、行動遲緩、走路困難等。因此腺苷 A2A 拮抗劑可產(chǎn)生與多巴胺 D2 受體相似的作用，認為可以用于帕金森病的治療。腦外多巴胺脫羧酶抑制劑如