【正文】 目錄 制劑的質(zhì)量控制 3 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 3 分析方法 4 性狀 4 鑒別 4 檢查 4 含量測(cè)定 10 分析方法的驗(yàn)證 11 分析方法學(xué)驗(yàn)證用樣品 11 有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證 11 吡啶3磺酸方法學(xué)驗(yàn)證 21 含量測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證 28 溶出度測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證 32 微生物限度檢查方法學(xué)驗(yàn)證 44 批檢驗(yàn)報(bào)告 44 雜質(zhì) 45 雜質(zhì)情況分析 45 雜質(zhì)制定依據(jù) 46 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù) 46 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 46 5060 / 59 制劑的質(zhì)量控制 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)項(xiàng)目方法放行標(biāo)準(zhǔn)限度貨架期標(biāo)準(zhǔn)限度性狀感觀本品為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色本品為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色鑒別HPLC法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)供試品溶液中沃諾拉贊峰保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液中沃諾拉贊峰保留時(shí)間一致供試品溶液中沃諾拉贊峰保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液中沃諾拉贊峰保留時(shí)間一致有關(guān)物質(zhì)HPLC法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)雜質(zhì)Ⅰ：%、雜質(zhì)Ⅱ：%、雜質(zhì)Ⅲ：%、雜質(zhì)Ⅳ：%、雜質(zhì)Ⅴ：%、雜質(zhì)Ⅵ：%、其他單雜：%、其他總雜：%雜質(zhì)Ⅰ：%、雜質(zhì)Ⅱ：%、雜質(zhì)Ⅲ：%、雜質(zhì)Ⅳ：%、雜質(zhì)Ⅴ：%、雜質(zhì)Ⅵ：%、其他單雜：%、其他總雜：%吡啶3磺酸HPLC法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)%%含量均勻度含量均勻度檢查法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄X E）應(yīng)符合規(guī)定應(yīng)符合規(guī)定溶出度溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅹ C第二法）≥90%≥85%微生物限度微生物限度檢查法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅺ J）細(xì)菌數(shù)不得過(guò)1000cfu/g；霉菌和酵母菌數(shù)不得過(guò)100cfu/g；大腸埃希菌不得檢出/g細(xì)菌數(shù)不得過(guò)1000cfu/g；霉菌和酵母菌數(shù)不得過(guò)100cfu/g；大腸埃希菌不得檢出/g含量HPLC法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄V D)含（C17H16FN3SO2）%~%含（C17H16FN3SO2）%~% 分析方法 性狀 檢查方法：感觀具體試驗(yàn)操作：取本品，觀察其外觀性狀。限度：本品應(yīng)為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色。 鑒別 檢查方法：高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、電子分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計(jì)。試藥與試劑：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。色譜條件：流動(dòng)相：（）甲醇（52:48）流速：：流動(dòng)相 檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器 波長(zhǎng)：230nm 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）具體試驗(yàn)操作：在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，比較供試品溶液中沃諾拉贊峰與對(duì)照品溶液中沃諾拉贊峰的保留時(shí)間。限度：供試品溶液中沃諾拉贊峰與對(duì)照品溶液中沃諾拉贊峰保留時(shí)間應(yīng)一致。 檢查 有關(guān)物質(zhì) 檢查方法：高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、電子分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計(jì)。試液與試藥：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。試驗(yàn)條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測(cè)器（檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm）； 流動(dòng)相：（）甲醇（52：48）為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按下表梯度進(jìn)行洗脫； 溶劑：流動(dòng)相A； 流速：。 梯度如下表：時(shí)間（分鐘）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）01000231000452080501000601000 具體試驗(yàn)操作：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相A適量，振搖，使充分溶解，加流動(dòng)相A稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密量取適量，作為對(duì)照溶液。分別取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ工作對(duì)照品各適量，精密稱定，作為雜質(zhì)對(duì)照品溶液。取富馬酸沃諾拉贊工作對(duì)照品及雜質(zhì)工作對(duì)照品各適量，作為系統(tǒng)適用性溶液。照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D）試驗(yàn)，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，（）甲醇（52：48）為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按上表梯度進(jìn)行洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。取系統(tǒng)適用性溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，雜質(zhì)Ⅲ、Ⅰ、沃諾拉贊、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ依次出峰，理論板數(shù)按沃諾拉贊峰計(jì)算應(yīng)不低于5000，且沃諾拉贊峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。精密量取供試品溶液、對(duì)照溶液與雜質(zhì)對(duì)照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。 計(jì)算公式：已知雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ： （Ax為供試品溶液中已知雜質(zhì)的峰面積，AS為對(duì)照品溶液中已知雜質(zhì)的峰面積，Wx為已知雜質(zhì)工作對(duì)照品的稱樣量，Px為已知雜質(zhì)工作對(duì)照品含量，Vx為已知雜質(zhì)對(duì)照品溶液的稀釋體積，V為供試品溶液的稀釋體積，W為供試品的稱樣量） （Ai為供試品溶液中其他單個(gè)未知雜質(zhì)的峰面積，At為對(duì)照溶液主峰面積） （A總為供試品溶液中所有峰的峰面積和，A主為供試品溶液中沃諾拉贊的峰面積，為供試品溶液中已知雜質(zhì)的峰面積之和，At為對(duì)照溶液中沃諾拉贊的峰面積）限度：供試品溶液色譜圖中如顯雜質(zhì)峰（溶劑峰及富馬酸峰除外），雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，%；其他單個(gè)未知雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液的主峰面積（%）；其他雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液的主峰面積的4倍（%）。 吡啶3磺酸 檢查方法：高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、電子分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計(jì)。試液與試藥：磷酸二氫鉀、磷酸、甲醇、水。試驗(yàn)條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測(cè)器（檢測(cè)波長(zhǎng)為261nm）； 流動(dòng)相：（）為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按下表梯度進(jìn)行洗脫； 溶劑：流動(dòng)相A； 流速：。梯度如下表：時(shí)間（分鐘）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）01000710001090910901000201000 具體試驗(yàn)操作：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相A適量，振搖，使充分溶解，加流動(dòng)相A稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取雜質(zhì)Ⅶ工作對(duì)照品適量，精密稱定，作為對(duì)照品溶液。照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D）試驗(yàn)，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，（）為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按上表梯度進(jìn)行洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為261nm。取對(duì)照品溶液、供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖， 計(jì)算公式： （Ax為供試品溶液中吡啶3磺酸的峰面積，AS為對(duì)照品溶液中吡啶3磺酸的峰面積，Wx為雜質(zhì)Ⅶ工作對(duì)照品的稱樣量，Px為雜質(zhì)Ⅶ工作對(duì)照品含量，Vx為吡啶3磺酸對(duì)照品溶液的稀釋體積，V為供試品溶液的稀釋體積，W為供試品的稱樣量）限度：供試品溶液色譜圖中如顯與對(duì)照品溶液相對(duì)應(yīng)的雜質(zhì)峰，%。 溶出度檢查方法：溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅹ C第二法） 高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：溶出儀、溫度計(jì)、高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、容量瓶、移液管、燒杯，PH計(jì)。試液與試藥：鹽酸、磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。試驗(yàn)條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測(cè)器（檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm）； 流動(dòng)相：（）甲醇（52:48）； 溶劑：； 流速：。具體試驗(yàn)操作：取本品，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄X C第二法），轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時(shí)，取溶液適量濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液適量，用溶出介質(zhì)定量稀釋成每1ml中約含沃諾拉贊11μg的溶液，作為供試品溶液；另取富馬酸沃諾拉贊工作對(duì)照品適量，用溶出介質(zhì)溶解并定量稀釋制成每1ml中約含沃諾拉贊11μg的溶液，作為對(duì)照品溶液，精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各20μl，照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，計(jì)算每片的溶出量。 計(jì)算公式：（A供為供試品溶液的主峰面積；A對(duì)為對(duì)照品溶液主峰面積；M對(duì)為對(duì)照品的稱樣量，mg；T對(duì)為對(duì)照品的含量；V對(duì)為對(duì)照品溶液的稀釋體積；V供為供試品溶液的稀釋體積；X為標(biāo)示量，10mg或20mg）限度：不得低于標(biāo)示量的85%。 含量均勻度檢查方法：含量均勻度檢查法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅹ E） 高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、容量瓶、移液管、燒杯，PH計(jì)。試液與試藥：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。試驗(yàn)條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）； 紫外檢測(cè)器（檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm）； 流動(dòng)相：（）甲醇（52:48）； 溶劑：流動(dòng)相； 流速：。 具體試驗(yàn)操作： 供試品溶液：取本品1片，置100ml量瓶（10mg規(guī)格）或200ml量瓶（20mg規(guī)格）中，加流動(dòng)相適量，振搖，使充分溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。 對(duì)照品溶液：取富馬酸沃諾拉贊工作對(duì)照品適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊10mg），精密稱定，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。 精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算每片中沃諾拉贊的含量。依法測(cè)定10片中沃諾拉贊的含量。 計(jì)算公式：含量（%）=（W對(duì)分別為對(duì)照品的稱樣量，mg；P對(duì)為對(duì)照品的含量；A樣、A對(duì)分別為供試品、對(duì)照品溶液中沃諾拉贊的峰面積；V樣、V對(duì)分別為供試品溶液、對(duì)照品溶液的稀釋體積） 分別測(cè)定每片以標(biāo)示量為100的相對(duì)含量，求其均值和標(biāo)準(zhǔn)差以及標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值：如，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若，則不符合規(guī)定；若，且，則應(yīng)另取20支復(fù)試，根據(jù)初、復(fù)試結(jié)果，計(jì)算30支的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值：如，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若，則不符合規(guī)定。其中： ，限度：應(yīng)符合規(guī)定。 微生物限度：營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、膽鹽乳糖培養(yǎng)基、MUG培養(yǎng)基、%氯化鈉溶液。：智能生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、電動(dòng)吸引器 、薄膜過(guò)濾器等。：用平皿法，依法檢查（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅺ J）。（1）細(xì)菌、霉菌及酵母菌：供試品配制：按中國(guó)藥典（2010年版二部）微生物限度檢查法（附錄XI J）的規(guī)定，稱取供試品10g，加pH ，混勻，靜置10min，取上部澄清液體作為1：10供試液，備用。直接接種法：取1:，分別加入1ml約含50～100cfu/m15株試驗(yàn)菌。立即傾注瓊脂培養(yǎng)基15～20ml，每株菌平行制備2個(gè)平皿，待凝固后置規(guī)定溫度培養(yǎng)3～5天觀察結(jié)果，測(cè)定其菌數(shù)。菌液組測(cè)定試驗(yàn)所加入試驗(yàn)菌的菌數(shù)。供試品對(duì)照組：取1:10供試液1ml，按試驗(yàn)組供試液制備方法和菌落計(jì)數(shù)方法測(cè)定其菌數(shù)。（2）控制菌的檢查法大腸埃希菌：試驗(yàn)組取1：10供試液10ml，分別加入100ml、200ml的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，加入10～100cfu/ml試驗(yàn)菌，3537℃培養(yǎng)1824h；，接種至5mlMUG培養(yǎng)管內(nèi)，培養(yǎng)5h與24h時(shí)，置紫外燈366nm處觀察，然后沿培養(yǎng)基管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液。陰性菌對(duì)照組：取1：10供試液10ml，分別加入100ml、200ml的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，加入10～100cfu/ml的金黃色葡萄球菌，同試驗(yàn)組方法進(jìn)行試驗(yàn)。于24h在366nm紫外光下觀察，同時(shí)用未接種的MUG培養(yǎng)基作本底對(duì)照。在紫外光下若管內(nèi)培養(yǎng)物呈現(xiàn)藍(lán)白色熒光，為MUG陽(yáng)性；不呈現(xiàn)熒光，為MUG陰性。觀察后，沿培養(yǎng)管的管壁加人數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質(zhì)陽(yáng)性；呈試劑本色，為靛基質(zhì)陰性。本底對(duì)照的MUG和靛基質(zhì)試驗(yàn)應(yīng)為陰性。如MUG陽(yáng)性、靛基質(zhì)陽(yáng)性，判檢出大腸埃希菌；如MUG陰性、靛基質(zhì)陰性，判未檢出大腸埃希菌。限度：細(xì)菌數(shù)不得過(guò)1000cfu/g；霉菌和酵母菌數(shù)不得過(guò)100cfu/g；大腸埃希菌不得檢出/g 含量測(cè)定檢查方法：高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、容量瓶、移液管、燒杯、PH計(jì)。試藥與試劑：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。色譜條件：流動(dòng)相：（）甲醇（52:48）流速：：紫外檢測(cè)器 波長(zhǎng)：230nm 溶劑：流動(dòng)相 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm） 具體試驗(yàn)操作：取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊1