【正文】 積/%物料平衡/%分離度峰純度未 破 壞合格22467470100高溫破壞合格22340471光照破壞合格22346631酸 破 壞合格21616957堿 破 壞合格21194823氧化破壞合格21645931計(jì)算公式：物料平衡%=（破壞后總峰面積/濃度）/（破壞前總峰面積/濃度）結(jié)論：溶劑及輔料均不干擾本品的測(cè)定，各破壞條件下主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，主峰未檢出不純物，樣品破壞前后物料守恒，故該方法測(cè)定本品有關(guān)物質(zhì)的專屬性良好。 富馬酸沃諾拉贊及已知相關(guān)雜質(zhì)定量限試驗(yàn)結(jié)果名稱峰面積平均RSD%定量限/ng123456雜質(zhì)Ⅲ1590146215461662165317901617雜質(zhì)Ⅰ2426270726952707299623592648沃諾拉贊3059325231003047334032033167雜質(zhì)Ⅱ451051085109460746825691雜質(zhì)Ⅳ257928442436219825852344雜質(zhì)Ⅴ401247114409430740794460雜質(zhì)Ⅵ652064636752600366876496 結(jié)論：此法靈敏度較高，在限度范圍內(nèi)可用于富馬酸沃諾拉贊及已知雜質(zhì)定量檢查。 富馬酸沃諾拉贊及已知相關(guān)雜質(zhì)檢測(cè)限試驗(yàn)結(jié)果名稱雜質(zhì)Ⅲ雜質(zhì)Ⅰ沃諾拉贊雜質(zhì)Ⅱ雜質(zhì)Ⅳ雜質(zhì)Ⅴ雜質(zhì)ⅥC檢測(cè)限ng/ml檢測(cè)限/ng結(jié)論：此法靈敏度較高，可有效檢出富馬酸沃諾拉贊及已知雜質(zhì)。 富馬酸沃諾拉贊及已知相關(guān)雜質(zhì)線性試驗(yàn)結(jié)果名稱濃度范圍（μg/ml）線性方程R2沃諾拉贊～A=雜質(zhì)Ⅰ～A=94476C1153雜質(zhì)Ⅱ～A=雜質(zhì)Ⅲ～A=63504C1447雜質(zhì)Ⅳ～A=雜質(zhì)Ⅴ～A=雜質(zhì)Ⅵ～A=精密度試驗(yàn) 重復(fù)性試驗(yàn)取本品（批號(hào)：XS150301，規(guī)格：10mg）100片，精密稱定其重量。分別取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ工作對(duì)照品各適量，精密稱定，作為雜質(zhì)對(duì)照品溶液。取供試品適量，加流動(dòng)相A充分溶解，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，作為對(duì)照溶液。按外標(biāo)法計(jì)算各已知雜質(zhì)的含量；未知單雜以自身對(duì)照法計(jì)算其含量。（～31，制劑的質(zhì)量控制一第78~95頁） 富馬酸沃諾拉贊片有關(guān)物質(zhì)檢查重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果序號(hào)123456平均值RSD%雜質(zhì)Ⅰ（%）雜質(zhì)Ⅱ（%）雜質(zhì)Ⅲ（%）雜質(zhì)Ⅳ（%）雜質(zhì)Ⅴ（%）雜質(zhì)Ⅵ（%）其他單雜（%）其他總雜（%）結(jié)論：試驗(yàn)結(jié)果表明，此法重復(fù)性良好。（~49，制劑的質(zhì)量控制一第96~113頁） 富馬酸沃諾拉贊片有關(guān)物質(zhì)檢查中間精密度試驗(yàn)結(jié)果序號(hào)123456平均值RSD%雜質(zhì)Ⅰ（%）雜質(zhì)Ⅱ（%）雜質(zhì)Ⅲ（%）雜質(zhì)Ⅳ（%）雜質(zhì)Ⅴ（%）雜質(zhì)Ⅵ（%）其他單雜（%）其他總雜（%）結(jié)論：此法檢查本品的有關(guān)物質(zhì)中間精密度良好。對(duì)照溶液：精密量取供試品溶液適量，作為對(duì)照溶液。將上述各溶液于室溫下放置12小時(shí)，分別于0、12小時(shí)，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積考察溶液穩(wěn)定性，～9。 準(zhǔn)確性試驗(yàn)雜質(zhì)對(duì)照品溶液：分別取雜質(zhì)Ⅰ（%）、Ⅱ（%）、Ⅲ（%）、Ⅳ（%）、Ⅴ（%）、Ⅵ（%）工作對(duì)照品各適量，精密稱定，作為雜質(zhì)對(duì)照品溶液。 富馬酸沃諾拉贊各已知雜質(zhì)的測(cè)定結(jié)果名稱雜質(zhì)Ⅰ雜質(zhì)Ⅱ雜質(zhì)Ⅲ雜質(zhì)Ⅳ雜質(zhì)Ⅴ雜質(zhì)Ⅵ測(cè)得含量%未檢出未檢出未檢出未檢出回收率溶液：1）取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ，雜質(zhì)Ⅲ，雜質(zhì)Ⅳ，雜質(zhì)Ⅴ，雜質(zhì)Ⅵ，精密稱定，置200ml量瓶中，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密稱定，置同一20ml量瓶中，按處方比例加入輔料，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率（80%濃度）溶液。2）取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ，雜質(zhì)Ⅲ，雜質(zhì)Ⅳ，雜質(zhì)Ⅴ，雜質(zhì)Ⅵ，精密稱定，置200ml量瓶中，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密稱定，置同一20ml量瓶中，按處方比例加入輔料，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率（100%濃度）溶液。3）取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ，雜質(zhì)Ⅲ，雜質(zhì)Ⅳ，雜質(zhì)Ⅴ，雜質(zhì)Ⅵ，精密稱定，置200ml量瓶中，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密稱定，置同一20ml量瓶中，按處方比例加入輔料，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率（120%濃度）溶液。分別精密量取上述溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，、11。再按下式計(jì)算回收率：回收率（%）=式中：M測(cè)得量為回收率溶液中已知雜質(zhì)的測(cè)得量； M供試品中的量為回收率溶液中供試品的已知雜質(zhì)的量； M加入量為回收率溶液中已知雜質(zhì)的加入量； 富馬酸沃諾拉贊雜質(zhì)測(cè)定回收率試驗(yàn)結(jié)果編號(hào)M加入量/μgM測(cè)得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅰ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%123456789編號(hào)M加入量/μgM測(cè)得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅱ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%123456789編號(hào)M加入量/μgM測(cè)得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅲ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090編號(hào)M加入量/μgM測(cè)得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅳ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090編號(hào)M加入量/μgM測(cè)得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅴ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090編號(hào)M加入量/μgM測(cè)得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅵ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090結(jié)論：此方法測(cè)定雜質(zhì)準(zhǔn)確性良好。分別取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ工作對(duì)照品各適量，精密稱定，作為雜質(zhì)對(duì)照品溶液。精密稱定，置20ml量瓶中，加流動(dòng)相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密量取上述溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算各雜質(zhì)含量，~13。 吡啶3磺酸方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證結(jié)果條件選擇C18柱，（）為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫；紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為261nm。專屬性酸、堿、高溫、氧化、光照降解雜質(zhì)均與主峰分離良好，各已知雜質(zhì)與相鄰峰分離良好，主峰及各已知雜質(zhì)峰純度均合格；輔料及其降解產(chǎn)物和梯度峰不干擾本品有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。定量限。中間精密度試驗(yàn)：測(cè)得吡啶3磺酸含量RSD=%。耐用性采用不同色譜柱，不同的流動(dòng)相比例、pH、鹽濃度等檢查吡啶3磺酸，吡啶3磺酸測(cè)的含量的RSD均小于10%。梯度表如下：時(shí)間（分鐘） 流動(dòng)相A（%） 流動(dòng)相B（%）01000710001090910901000201000 溶液配制 供試品溶液：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相A適量，振搖，使沃諾拉贊充分溶解，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。破壞性試驗(yàn) Ⅶ工作對(duì)照品破壞試驗(yàn)溶液的配制與處理：溶液稀釋步驟處理方法溶劑未破壞→20ml100ml無降解處理高溫破壞→20ml100ml水浴100℃加熱6小時(shí)高溫空白溶劑適量水浴100℃加熱6小時(shí)光照破壞→20ml100ml光照箱4500LX照射40小時(shí)光照空白溶劑適量光照箱4500LX照射40小時(shí)酸破壞→20ml100ml1mol/L鹽酸2ml，室溫放置28小時(shí)酸空白溶劑適量1mol/L鹽酸2ml，室溫放置28小時(shí)堿破壞→20ml100ml1mol/L氫氧化鈉溶液1ml，室溫放置26小時(shí)堿空白溶劑適量1mol/L氫氧化鈉溶液1ml，室溫放置26小時(shí)氧化破壞→20ml100ml30%雙氧水3ml，室溫放置23小時(shí)氧化空白溶劑適量30%雙氧水3ml，室溫放置23小時(shí)取上述溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。Ⅶ工作對(duì)照品與樣品混合破壞試驗(yàn)溶液的配制與處理：供試品配制：（），雜質(zhì)Ⅶ，按處方加入輔料（），混合均勻，作為供試品粉末。（～25，制劑的質(zhì)量控制一第179~191頁） 富馬酸沃諾拉贊片吡啶3磺酸檢查破壞試驗(yàn)結(jié)果名稱吡啶3磺酸總峰面積主峰面積%吡啶3磺酸峰面積吡啶3磺酸面積%物料平衡%分離度峰純度未 破 壞合格129089360937/高溫破壞合格134946966205光照破壞合格131575089733酸 破 壞合格1351111139062堿 破 壞合格1370201153110氧化破壞合格132680297055計(jì)算公式：物料平衡%=（破壞后總峰面積/濃度）/（破壞前總峰面積/濃度）結(jié)論：溶劑及輔料均不干擾本品的測(cè)定，各破壞條件下主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，主峰未檢出不純物，樣品破壞前后物料守恒，故該方法測(cè)定本品有關(guān)物質(zhì)的專屬性良好。 吡啶3磺酸定量限試驗(yàn)結(jié)果1名稱稀釋步驟定量限/ng吡啶3磺酸→100ml 吡啶3磺酸定量限試驗(yàn)結(jié)果2名稱123456平均RSD%峰面積830844842868904882 結(jié)論：此法靈敏度較高，在限度范圍內(nèi)可用于富馬酸沃諾拉贊及已知雜質(zhì)定量檢查。 吡啶3磺酸檢測(cè)限試驗(yàn)結(jié)果名稱稀釋步驟檢測(cè)限/ng吡啶3磺酸→100ml結(jié)論：此法靈敏度較高，可有效檢出富馬酸沃諾拉贊及已知雜質(zhì)。 吡啶3磺酸線性試驗(yàn)結(jié)果名稱濃度范圍（μg/ml）線性方程R2雜質(zhì)Ⅶ～A=1精密度試驗(yàn) 重復(fù)性試驗(yàn)取本品（批號(hào)：XS