[自然科學(xué)]免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)(已修改)
2025-03-04 05:20 本頁面
【正文】 二、 免疫血清學(xué)技術(shù) 凝集試驗(yàn) 沉淀試驗(yàn) 補(bǔ)體參與的 試驗(yàn) 標(biāo)記抗體技術(shù) 中和試驗(yàn) 直接凝集試驗(yàn) 間接凝集試驗(yàn) SPA協(xié)同凝集試驗(yàn) 橋梁凝集試驗(yàn) 絮狀沉淀試驗(yàn) 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 免疫電泳 火箭免疫電泳 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 免疫熒光抗體技術(shù) 免疫酶技術(shù) 同位素標(biāo)記技術(shù) 中和試驗(yàn) 用 途 定性 定量 定位 種 類 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 一、 免疫血清學(xué)技術(shù) ? 種類： 1. 凝集試驗(yàn) 細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，當(dāng)與相應(yīng)抗體特異結(jié)合后，在適量電解質(zhì)存在的條件下可逐漸凝集，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象稱為凝集反應(yīng)（直接凝集試驗(yàn)） 。 ? 間接凝集試驗(yàn) 將可溶性抗原或抗體結(jié)合在一種與免疫無關(guān)的惰性微粒表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原作用，在有電解質(zhì)存在的適宜條件下，微粒即可被動(dòng)的被凝集，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。通過微載體進(jìn)行的凝集試驗(yàn)叫間接凝集試驗(yàn)，也稱微載體技術(shù)。 ? 常用的微載體： 致敏紅細(xì)胞、聚苯乙烯乳膠、炭粉顆粒 Ag + （紅細(xì)胞、乳膠、炭） 載體 載體 Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag 間接凝集反應(yīng) Ag ?將抗原結(jié)合在微載體上進(jìn)行的凝集試驗(yàn)叫 “ 正向間接凝集試驗(yàn) ” ； 將抗體結(jié)合在微載體上進(jìn)行的凝集試驗(yàn)叫 “ 反向間接凝集試驗(yàn) ” 。 ? SPA協(xié)同凝集試驗(yàn) 葡萄球菌 A蛋白（ staphylococal protein A,SPA)是葡萄球菌的特異性表面抗原，能與多種動(dòng)物 IgG的 Fc片段結(jié)合。特異性的 IgG的 Fc片段與 SPA結(jié)合后，其 Fab片段仍保持與特異性抗原結(jié)合的特點(diǎn)而發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，從而導(dǎo)致葡萄球菌的凝集。 橋梁凝集試驗(yàn) 又稱 Coombs抗球蛋白試驗(yàn)，用于檢測(cè)不完全抗體。單價(jià)抗體只有一個(gè)抗原結(jié)合部位，不會(huì)產(chǎn)生凝集反應(yīng)，當(dāng)加入抗球蛋白抗體后，可以將兩個(gè)各連結(jié)一個(gè)抗原決定簇的單價(jià)抗體再連結(jié)起來，出現(xiàn)凝集。 ? 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所發(fā)生的沉淀反應(yīng) (precipitation)。 如細(xì)菌、寄生蟲的浸出液、組織浸出液、培養(yǎng)濾液、動(dòng)物血清等，與相應(yīng) Ab相遇后在有電解質(zhì)存在下 AgAb復(fù)合物相互交聯(lián)形成免疫復(fù)合物達(dá)一定大時(shí)，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀反應(yīng)。 ? 沉淀抗原是細(xì)胞的浸出成分，為細(xì)微的膠體溶液，單個(gè)抗原的體積小而總面積大，出現(xiàn)反應(yīng)需要的抗體量多 ? 沉淀試驗(yàn)可分為 環(huán)狀 /絮狀沉淀試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫電泳。 免疫電泳技術(shù) 將瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)與電泳技術(shù)結(jié)合起來的一種免疫檢測(cè)技術(shù)。 在 Ag、 Ab在凝膠中擴(kuò)散的同時(shí)加入電場(chǎng)作用，使 Ag、 Ab的擴(kuò)散速度加快，同時(shí)限制了擴(kuò)散的方向，增加了試驗(yàn)的敏感性。 Ag Ab + 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，可以再結(jié)合補(bǔ)體 ，但這一反應(yīng)不能被肉眼觀察到，可加入紅細(xì)胞及其抗體（溶血素），根據(jù)是否溶血來判定反應(yīng)系統(tǒng)是否存在相應(yīng)抗原抗體，如紅細(xì)胞不溶解說明存在相應(yīng)的抗原抗體，為陽性反應(yīng)；如溶血?jiǎng)t說明不存在相應(yīng)的抗原抗體，為陰性反應(yīng)。 ? 檢測(cè)系統(tǒng) Ag + Ab AgAb AgAb補(bǔ)體 + 補(bǔ)體 紅細(xì)胞 + 溶血素 紅 溶 指示系統(tǒng) （不溶血，陽性） 紅 溶 補(bǔ)體 （溶血，陰性） 4. 標(biāo)記抗體技術(shù) 標(biāo)記抗體技術(shù)是在抗體球蛋白分子上，連接某一個(gè)特定的、容易檢測(cè)的分子或原子 (標(biāo)記物 )，利用標(biāo)記抗體能與相應(yīng)抗原結(jié)
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