【正文】 第十章 甾體激素類藥物的分析 基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷駢多氫菲 C2 0C2 1A B C D 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 分類： 甾體激素 腎上腺皮質(zhì)激素 性激素 雄性激素及蛋白同化激素 孕激素 雌激素 OH OO HO C H2O HHH H腎上腺皮質(zhì)激素 氫化可的松 OH OO HOHF HO C H3OHC H3腎上腺皮質(zhì)激素 醋酸地塞米松 OOHH HHOC H3雄性激素 丙酸睪酮 OOHH HHO蛋白同化激素 苯丙酸諾龍 COH HHC H3O孕激素 黃體酮 CH OH HHO HC H雌激素 炔雌醇 一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 1. 腎上腺皮質(zhì)激素 主要活性基團 性 質(zhì) △ 4 – 3 – 酮 UV、與羰基試劑反應 C17 – α – 醇酮基 還 原 性 2. 雄性激素及蛋白同化激素 主要活性基團 性 質(zhì) △ 4 – 3 – 酮 UV、與羰基試劑反應 C17 – β – 羥基 可成酯 3. 孕激素 主要活性基團 性 質(zhì) △ 4 – 3 – 酮 UV、與羰基試 劑反應 C17 –甲酮基 與亞硝基鐵氰 化納反應 C17 –乙炔基 與 AgNO3反應 4. 雌激素 主要活性基團 性 質(zhì) A環(huán)為 3–OH 苯環(huán) UV、與重氮苯磺酸鹽反應 C17 –乙炔基 與 AgNO3反應 C17 –羥基 可成酯 二、鑒別試驗 （一）與強酸的呈色反應 甾體激素類藥物 呈色 H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl （母核） 與硫酸顯色反應 顯 色 熒光 加水稀釋 潑尼松龍 深紅 絮狀 ↓灰 潑尼松 橙 黃 →藍綠 炔雌醚 橙紅 黃綠 ↓紅色 炔雌醇 橙紅 黃綠 絮狀 ↓玫紅 醋酸可的松 黃或微 褪色并澄 帶橙 清 (二 ) 官能團的反應 腎上腺皮質(zhì)激素藥物 呈色 四氮唑鹽 OHˉ 1 C17 – α – 醇酮基 還原性 A. 呈色反應 腎上腺皮質(zhì)激素藥物 Cu2O↓橙紅色 堿性 酒石酸銅 B. 沉淀反應 Ag↓黑色 氨制硝酸銀 甾酮類激素藥物 呈色 羰基試劑 2. C3–酮基和 C20–酮基 ＃常用的羰基試劑： 2,4二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼 OO HNC O N H N H 2H C lC O N H NO HN異煙腙（黃色） 睪酮 OCC H 3O2NC O N H N H 2H C l黃體酮 C O N H NCC H3N H N O CNN異煙雙腙（黃色） 具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物 呈色 亞硝基鐵氰化納 間二硝基酚 芳香醛 3. 甲酮基 黃體酮 藍紫色 亞硝基鐵 氰化納 其他甾體 淡橙色 不顯色 COC H3O黃體酮 ? ? ?????? ?? ??? ]NOCNFe[?OHH2O2+4F e5C NN OC HCOO藍紫色 有機氟 Fˉ 有機破壞 有機氯 Clˉ 4. 有機鹵素 茜素氟藍 硝酸亞鈰 硝酸 —硝酸銀 AgCl↓ 呈色 OOO HO HC H 2 NC H 2 C O O HC H 2 C O O H茜素氟藍 OOO HOC H 2 NC H 2 C O OC eC H 2 C O OFO H藍紫色 F ??Ce雌激素類藥物 紅色偶 氮染料 重氮苯磺酸 5. 酚羥基 含炔基的甾體激素 銀鹽沉淀 硝酸銀 6. 乙炔基 R C C HA g N O 3R C C A g↓ 炔雌醇 O HC C HH OO HC C A gH O白 3AgN O???? ?? 黃體酮雙酮肟黃體酮 鹽酸羥胺△ ℃? ? ?? ? ? ~.???? ?? 苯甲酸酯炔雌醇 苯甲酰氯KOH ℃? ? ?? ? ? ~. (三 ) 制備衍生物測定 . ℃? ? ?? ? ? ~.????? ?? 睪丸素丙酸睪酮 醇制 K O H△ ???? ??鹽酸氨基脲苯丙酸諾龍 △ ? ?分解℃約 ? ? ?.縮氨基脲衍生物? ? ???? ??? ? KOHO C O C HR 醇制香 ??? O C O C HCHCH?? SOHOHHC ??（四）水解產(chǎn)物的反應 ?戊酸戊酸雌二醇 醇制 ???? ?? N a O H?H特臭 己酸己酸羥孕酮 醇制 ???? ???OH? ?H特臭 △ ４ 3酮 240nm 苯環(huán) 280nm OCCC ???CCCCCC ?????（五） UV法 CH??3300～ 3000cm1 HC ?? 3000～ 2700cm1 OC ??1900～ 1650cm1 CC ??1650～ 1450cm1 1000～ 650cm1 CH??（六） IR法 3750～ 3300cm1 ν OH?醋酸可的松 C OOOO HC H 2 O C O C H 3結(jié)構(gòu)特征：△ 4–3–酮、 C17 –OH C20 –酮基、 C11 –酮基、醋酸酯 1630cm1 OC ??ν OH?3420cm 亞甲基、角甲基吸收帶 1750cm1 1232cm1 1052cm1 COC ???結(jié)構(gòu)特征：△ 4–3–酮、 C17 –OH C17–乙炔基 炔諾酮 OO HC C H1650cm1 OC ??ν OH?3300cm 3270cm1 ν CH?CC ??1615cm1 結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、 C17 –OH C17 –乙炔基 炔雌醇 O HC C HH O1505cm1 ν OH?3505cm 3300cm1 ν CH?CC ??1590cm1 3610cm ν OH?酚羥基 醇羥基 1615cm1 苯環(huán)的骨架振動 （七） TLC法 主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別 ? 方法：對照品法 要求供試品溶液所顯主斑點的 顏色 和 位置 與對照品溶液的主斑點相同。 炔諾酮 TLC圖 （八） HPLC法 主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏） ? 方法：對照品法 要求在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品峰的 tR與對照品峰的 tR一致。 三、 雜質(zhì)檢查 （一）其他甾體 與標示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“其他甾體” O HH 3 C OO HH 3 C OO HOLi/NH3 C2H5OH 弱酸 雌二醇－ 3－甲醚 苯丙酸諾龍的合成路線 I II O HO O C O ( C H 2 ) 2 C 6 H 5O強酸 苯丙酰氯 HCl III 3. 特點 （ 1）可能存在多個甾體雜質(zhì) （ 2）結(jié)構(gòu)