[其它模板]20xx34定稿選修3-12基因工程的基本操作程序(已修改)
2025-01-15 23:26 本頁(yè)面
【正文】 二 、 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定 一 、 目的基因的獲取 一 、 目的基因的獲取 1. 基因的結(jié)構(gòu) （ 1） 原核生物基因結(jié)構(gòu) 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 編碼蛋白質(zhì) 調(diào)控遺傳信息的表達(dá) （調(diào)控程序） … A‥ ……… ATGTGCACGTAGTTA……… ‥ G…… T‥ ……… TACACGTGCATCAAT……… ‥ C… 啟動(dòng)子 終止子 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 啟動(dòng)子 終止子 ATGTGCACGTAGTTA TACACGTGCATCAAT RNA聚合酶 AUGUGCACGUAGUUA 啟動(dòng)子： 位于基因首端一段能與 RNA聚合酶 結(jié)合并能起始 mRNA合成的序列。沒(méi)有啟動(dòng)子，基因就不能轉(zhuǎn)錄。 RNA聚合酶 :能夠識(shí)別 啟動(dòng)子上的結(jié)合位點(diǎn) 并與其結(jié)合的一種蛋白質(zhì) . 終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷，它能阻礙 RNA聚合酶的移動(dòng)，并使其從 DNA模板鏈上脫離下來(lái)，使轉(zhuǎn)錄終止。 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) （能編碼蛋白質(zhì)） 啟動(dòng)子 終止子 （ 2）真核與 原核生物基因結(jié)構(gòu)的比較 外顯子 內(nèi)含子 編碼蛋白質(zhì) （不能編碼蛋白質(zhì)） ① 相同點(diǎn)：都是由能夠編碼蛋白質(zhì)的編碼區(qū)和具有調(diào)控作用的非編碼區(qū)。 ② 不同點(diǎn)：原核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是連續(xù)的；真核細(xì)胞的編碼區(qū)是間隔的，不連續(xù)的。 真核生物基因結(jié)構(gòu) 外顯子 ：真核細(xì)胞基因 DNA中的編碼序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成 RNA并進(jìn)而翻譯為蛋白質(zhì)。 內(nèi)含子 ：真核細(xì)胞基因 DNA中的間插序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成 RNA，但隨即被剪除而不翻譯。 主要是指編碼 蛋白質(zhì) 基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。 例如：與生物抗逆性相關(guān)的基因，與生物優(yōu)良品質(zhì)相關(guān)的基因，藥物和保健品相關(guān)的基因，與毒物降解相關(guān)的基因，以及與工業(yè)所需要酶相關(guān)的基因。 目前被廣泛提取使用的目的基因有：蘇云金桿菌抗蟲(chóng)基因、植物抗病基因（抗病毒、抗細(xì)菌 )、 人胰島素基因 等。 （ 3）用化學(xué)方法直接 人工合成目的基因 （ 1） 從基因庫(kù)中獲取目的基因 （ 2） 應(yīng)用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 （ 1）從基因庫(kù)中獲取目的基因 ① 基因文庫(kù)和部分基因文庫(kù)的慨念 ② 基因組文庫(kù)和 cDNA文庫(kù)的主要區(qū)別 ③ 怎樣從基因文庫(kù)中找到我們所需要的目的基因 ① 基因文庫(kù)和部分基因文庫(kù)的慨念 ： 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段 ,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存 ,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因 ,稱(chēng)為基因文庫(kù)。 基因文庫(kù)中包含了一種生物所有的基因 ,這種基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)。 基因文庫(kù)中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫(kù)叫做部分基因文庫(kù)。如：cDNA文庫(kù)。 基因組文庫(kù)的建立方法 提取某種生物的全部 DNA 用適當(dāng)?shù)南拗泼该盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與運(yùn)載體連接 導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存（ 基因組文庫(kù)） 目的基因 分離 部分基因文庫(kù)的建立方法 mRNA 反轉(zhuǎn)錄酶 單鏈 DNA 合成 雙鏈 DNA（ cDNA） 載體 插入 導(dǎo)入 受體菌
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