12基因工程的基本操作程序z4班l(xiāng)(已修改)
2025-03-16 12:48 本頁面
【正文】 基因工程的基本操作程序 ?目的基因的獲取 ?基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ?將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ?目的基因的檢測與鑒定 一、目的基因的獲取 目的基因主要是指 ______________________ 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 例子 ? 獲取目的基因的常用方法有哪些 ? （ 1）從 基因文庫 中獲取 （ 2）利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 （ 3）人工合成 (一 )從基因文庫中獲取目的基因 ？種類？如何構(gòu)建？ 一、目的基因的獲取 基因組文庫 cDNA文庫 含有一種生物的 全部 基因 含有一種生物的 部分基因 種類： 基因組文庫 cDNA文庫 基因組 DNA文庫 cDNA文庫 基因組 DNA文庫與 cDNA文庫的比較 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 啟動子 終止子 與 RNA聚合酶結(jié)合位點 ：編碼蛋白質(zhì) ,連續(xù)不間斷 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 原核細(xì)胞 基因結(jié)構(gòu) ①不編碼蛋白質(zhì)。 ②調(diào)控遺傳信息表達(dá) ,上游有啟動 子，下游有終止子 真核細(xì)胞 基因結(jié)構(gòu) 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列 內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列 ：調(diào)控，上游有啟動子，下游有終止子 非編碼序列： 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 與 RNA聚合 酶結(jié)合位點 內(nèi)含子 外顯子 啟動子 終止子 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 不同點 編碼區(qū)是 _____的 編碼區(qū)是間隔的、 _____的 相同點 都由能夠編碼蛋白質(zhì)的 ______和具有調(diào)控作用的 ______區(qū)組成的 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較 連續(xù) 不連續(xù) 編碼區(qū) 非編碼 (一 )從基因文庫中獲取目的基因 ？種類？如何構(gòu)建？ ？ 一、目的基因的獲取 依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。 如： 根據(jù)基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì) 等特性。 1．有關(guān)目的基因的獲取和基因文庫的理解，不正確的是 ( ) A．目的基因可以從自然界中分離，也可以人工合成 B．目的基因主要指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 C．基因文庫就是基因組文庫 D． cDNA文庫只含有某種生物的一部分基因 2．下列屬于獲取目的基因方法的是 ①利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成 ②從基因文庫中獲取 ③從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥ D C (二）利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 PCR技術(shù) — 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ? 原理： ? 前提： ? 條件： DNA雙鏈復(fù)制 一段已知目的基因的核苷酸序列 四種脫氧核苷酸 一對引物 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） DNA的兩條鏈為模板 溫度控制 一、目的基因的獲取 復(fù)習(xí)： 目的基因？ 獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 什么是基因文庫？種類？ 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)？ 怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因？ 基因組文庫？ cDNA文庫？
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