生物：12基因工程的基本操作程序課件1新人教版選修(已修改)
2025-01-30 02:18 本頁面
【正文】 基因工程的基本操作程序 目的基因的獲取 基因表達載體的構建 將目的基因導入受體細胞 目的基因的檢測與鑒定 基因工程基本操作的四個步驟 有了目的基因，我們才能賦予一種生物以另一種生物的遺傳特性。 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可進行遺傳、表達和發(fā)揮作用 載體進入受體細胞穩(wěn)定表達，才能實現一種生物的基因在另一種生物中的轉化。 才能確定目的基因是否真正在受體細胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達。 一、目的基因的獲取 (一 )、目的基因主要是 ______________________ 編碼蛋白質的結構基因 請舉出三個以上的例子 （二）、獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 從基因文庫中獲取 利用 PCR技術擴增 人工合成 請閱讀 P9第一和二兩段 一、目的基因的獲取 （一）從基因文庫中直接獲取 ： 概念見 P9 :按外源 DNA片段的來源分類 種類 基因組 DNA文庫： 含有一種生物的 全部 基因 部分基因文庫： 只包含了一種生物的 部分 基因， 如： cDNA文庫 為了在不知目的基因序列的情況下，便于獲得所需的目的基因。 ： 見課本 P9 基因組文庫與部分基因文庫的關系 提取某種生物的全部 DNA 用適當的限制酶切 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與載體連接 導入受體菌中儲存 基因組文庫 （ 1）直接分離法 (鳥槍法 ) 某種生物的單鏈 mRNA 單鏈互補 DNA 雙鏈 cDNA片段 導入受體菌中儲存 與載體連接 cDNA文庫 反（逆）轉錄酶 DNA聚合酶 反轉錄法： cDNA的合成流程圖解 基因組文庫和部分基因組文庫 (cDNA文庫 )比較 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復制 ___________的核酸合成技術 聚合酶鏈式反應 體外 特定 DNA片段 原理： DNA復制 利用 PCR技術擴增目的基因 四種脫氧核苷酸 (dNTP) 一對引物： 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） 模板 DNA( 需含有目的基因 ) Mg2+(激活劑 ) 條件： 緩沖溶液 一對寡核苷酸序列：與目的基因的起始段互補 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物 前提： ? 過程 變性、退火、延伸三步曲 ?變性： 加熱至 90～ 95℃雙鏈 DNA解鏈成為單鏈DNA ?退火： 冷卻至 55～ 60℃部分引物與模板的單鏈DNA的特定互補部位相配對和結合 ?延伸： 加熱至 70～ 75℃以目的基因為模板，合成互補的新 DNA鏈 變性 退火 延伸 具體過程 PCR(多聚酶鏈式反應 ) ① 概念： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復制
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