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(自創(chuàng))基因工程的基本操作程序(已修改)

2025-03-08 14:33 本頁(yè)面
 

【正文】 目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定基因工程基本操作的四個(gè)步驟有了目的基因,我們才能賦予一種生物以另一種生物的遺傳特性。使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并可進(jìn)行遺傳、表達(dá)和發(fā)揮作用 載體進(jìn)入受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá),才能實(shí)現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉(zhuǎn)化。 才能確定目的基因是否真正在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá)。一、目的基因的獲取(一 )、目的基因主要是______________________,也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因請(qǐng)舉出三個(gè)以上的例子(二)、獲取目的基因的常用方法有哪些 ?請(qǐng)閱讀 P9第一和二兩段從基因文庫(kù)獲取 目的基因利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 目的基因人工合成 目的基因 已知序列未知序列一、目的基因的獲?。ㄒ唬幕蛭膸?kù)中直接獲?。?概念見(jiàn) P9 :按外源 DNA片段的來(lái)源分類種類基因組 DNA文庫(kù): 含有一種生物的 全部 基因部分基因文庫(kù): 只包含了一種生物的 部分 基因, 如: cDNA文庫(kù)為了在不知目的基因序列的情況下,便于獲得所需的目的基因。:見(jiàn)課本 P9注意:注意: u基因文庫(kù) 中不是直接保管相應(yīng)基因,而是 保存受體菌 ,菌中含基因。提取某種生物的全部 DNA用適當(dāng)?shù)南拗泼盖幸欢ù笮〉?DNA片段將 DNA片段與載體連接導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存基因組文庫(kù)( 1)直接分離法 (鳥(niǎo)槍法 )某種生物的單鏈 mRNA單鏈互補(bǔ) DNA雙鏈 cDNA片段導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存與載體連接cDNA文庫(kù)反(逆)轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶反轉(zhuǎn)錄法: cDNA的合成流程圖解基因組 DNA文庫(kù) cDNA文庫(kù)基因組 DNA文庫(kù)與 cDNA文庫(kù)的比較PCR技術(shù)擴(kuò)增與 DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù) DNA復(fù)制相同點(diǎn)原理原料條件不同點(diǎn)解旋方式場(chǎng)所酶結(jié)果DNA雙鏈復(fù)制(堿基互補(bǔ)配對(duì))四種脫氧核苷酸模板、能量、酶DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化體外復(fù)制 細(xì)胞核內(nèi)熱穩(wěn)定的 DNA
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