人教版教學(xué)課件基因工程基本操作程序(已修改)
2025-01-30 00:34 本頁面
【正文】 基因工程的基本操作程序 目的基因的獲取 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 目的基因的檢測(cè)與鑒定 基因工程基本操作的四個(gè)步驟 一、目的基因的獲取 (一 )目的基因主要是 ______________________, 也可是一些具有調(diào)控作用的因子。目的基因的獲取方法主要有 ____________和 ___________兩大類 編碼蛋白質(zhì)的基因 （二）獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 從基因文庫中獲取 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 人工合成法（反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法） 如：與生物抗性相關(guān)的基因、與優(yōu)良品質(zhì)相關(guān)的基因、與生物藥物和保健品相關(guān)的基因、與毒物降解相關(guān)的基因、與工業(yè)用酶相關(guān)的基因等。 直接分離法 人工合成法 從基因文庫中獲取目的基因 （ 1）基因文庫 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫。 種類 基因組文庫： 含有一種生物的 全部 基因 部分基因文庫： 只包含了一種生物的 部分 基因， 如： cDNA文庫 原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)： 基因 非編碼區(qū)： 非編碼區(qū)： 調(diào)控序列 編碼區(qū)： 編碼蛋白質(zhì) 終止子： 終止轉(zhuǎn)錄 啟動(dòng)子：?jiǎn)?dòng)轉(zhuǎn)錄 ， RNA聚合酶結(jié)合識(shí)別位點(diǎn) mRNA 翻譯 特定功能的蛋白質(zhì) 轉(zhuǎn)錄 特點(diǎn)： 編碼區(qū)是連續(xù)的，非編碼區(qū)起調(diào)控作用 DNA分子 2：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)： 基因 非編碼區(qū)： 非編碼區(qū)： 編碼區(qū)： 編碼蛋白質(zhì) 終止子 啟動(dòng)子 前體 mRNA 外顯子和內(nèi)含子都轉(zhuǎn)錄 特點(diǎn)： 編碼區(qū)間隔不連續(xù)！分為 內(nèi)含子 和 外顯子 。 編碼蛋白質(zhì) 不編碼蛋白質(zhì) 剪切掉內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄的部分 mRNA DNA分子 提取某種生物的 全部 DNA 適當(dāng)?shù)南拗泼? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與載體連接 重組 DNA分子 基因組文庫 導(dǎo)入受體菌 （ 2）基因文庫的構(gòu)建方法 ① 基因組文庫的構(gòu)建 有啟動(dòng)子和內(nèi)含子 提取某生物 特定發(fā)育時(shí)期 的 mRNA 單鏈 DNA 雙鏈 cDNA片段 重組載體 與載體連接 cDNA文庫 逆轉(zhuǎn)錄酶 DNA聚合酶 導(dǎo)入受體菌 ② cDNA文庫的構(gòu)建 逆轉(zhuǎn)錄法： 部分基因：基因的選擇性表達(dá) 無啟動(dòng)子和內(nèi)含子 真核生物的基因用逆轉(zhuǎn)錄法得到的 cDNA與原基因相同嗎？有哪些差異？原核生物基因呢？ 思考？ 真核生物：無非編碼區(qū)和內(nèi)含子 原核生物：無非編碼區(qū) （ 3）構(gòu)建基因文庫的目的 怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因呢 ? 便于在 不知道目的基因核苷酸序列的情況下，獲得所需的目的基因。 依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。 如：根據(jù)基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA
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