酵母菌的分離及培養(yǎng)條件的優(yōu)化(已修改)
2025-05-26 20:49 本頁面
【正文】 設(shè)計型實驗 酵母菌的分離及培養(yǎng)條件的優(yōu)化 一、目的要求 掌握培養(yǎng)基的配置及滅菌方法，能夠正確的配制 培養(yǎng)基并在高壓滅菌鍋內(nèi)進行滅菌。 熟知培養(yǎng)基成分的選擇原則，能夠?qū)ε囵B(yǎng)基的成分和配比進行優(yōu)化設(shè)計。 掌握固體斜面、平板的制備技術(shù)，能夠通過劃線、涂布等方法分離菌種。 熟知影響酵母菌生長繁殖各種培養(yǎng)條件，能夠?qū)u瓶培養(yǎng)條件進行優(yōu)化設(shè)計。 了解酵母菌培養(yǎng)過程的代謝變化規(guī)律。掌握酵母菌培養(yǎng)過程參數(shù)的測定和分析方法。 ? 二、基本原理 ? 酵母菌是單 細胞 真菌生物，具有很高的營養(yǎng)價值，特別是含有較多蛋白質(zhì)、 B族維生素、核酸和礦物質(zhì)，同時也能產(chǎn)生一些保健功能活性物。因酵母屬于簡單的單 細胞 真核生物，易于培養(yǎng)，且生長迅速，被廣泛用于現(xiàn)代生物學(xué)研究中。是遺傳工程研究過程中常用的受體菌種。從自然界或商品中分離純的酵母菌株，通常采用平板或斜面涂布劃線法。這兩種方法簡單有效，是實驗室分離純化菌種常用到的方法。 ? 在發(fā)酵過程中定時地取樣測定，包括對菌體進行鏡檢、測定不同時期發(fā)酵液的菌體濃度、殘留的還原糖等參數(shù)，動態(tài)地了解發(fā)酵過程中過程變量的變化，分析菌體生長、基質(zhì)消耗、產(chǎn)物生成的速度，研究發(fā)酵動力學(xué)，為生產(chǎn)中優(yōu)化培養(yǎng)條件提供數(shù)據(jù)依據(jù)。 ? 三、實驗材料 ? （一）菌種： 從安琪酵母中分離的酵母菌 ? （二）培養(yǎng)基 ? 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 YPD： ? 酵母浸粉 1% 蛋白胨 2% 葡萄糖 2% 固體培養(yǎng) 基再加瓊脂 2% ? 優(yōu)化 N源培養(yǎng)基： ? 酵母浸粉 1% (NH4)2SO4 2% 葡萄糖 2% ； ? 酵母浸粉 1% (NH4)2SO4 4% 葡萄糖 2% ； 酵母浸粉 1% NH4NO3 2% 葡萄糖 2% ； ? 酵母浸粉 1% NH4NO3 4% 葡萄糖 2% ； ? 酵母浸粉 1% NaNO3 2% 葡萄糖 2% ； ? 酵母浸粉 1% NaNO3 4% 葡萄糖 2% ； ? （三）儀器設(shè)備 ? 超凈工作臺， 756型分光光度計，旋轉(zhuǎn)式搖床，恒溫培養(yǎng)箱，全自動滅菌鍋，三角瓶、涂布器、移液管、平皿等玻璃儀器。 ? （四）試劑 ? 酵母浸粉、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂 (NH4)2SO4 2%、 (NH4)2SO4 4%、 NH4NO3 2% NH4NO3 4%、 NaNO3 2%、 NaNO3 4%等；裴林試劑甲液、裴林試劑乙液； NaOH溶液、 HCl等。 四 實驗內(nèi)容 分離單菌落 （ 1）實驗物品滅菌 儀器：包扎 9個移液管、 9個涂布器、 9個裝
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