酵母菌的分離及培養(yǎng)條件的優(yōu)化(參考版)
2025-05-14 20:49本頁面
【正文】 ? ，必須將發(fā)酵液滅活后方可排除。 ? 出料 ? ，調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥，將罐壓升至—— 。 ? 注意事項(xiàng)：若不需要取無菌樣時(shí)，可不進(jìn)行酒精火焰保護(hù)的操作。 ? ，把無菌取樣瓶口置于酒精火焰上拔去瓶蓋，打開取樣放料閥取好樣后，立即蓋上瓶蓋同時(shí)關(guān)閉底閥。 ? 取樣 ? ，微開取樣放料閥，保持 10min后關(guān)閉兩閥門。 ? ，保持罐壓在 。 ? ，并在火焰的保護(hù)下拔下瓶塞，迅速將菌種倒入發(fā)酵罐內(nèi)。 ? ，控制罐壓在 ，點(diǎn)燃接種火圈內(nèi)的酒精棉球。 ? 接種 ? ，接種量根據(jù)工藝要求確定。 ? 當(dāng)培養(yǎng)基溫度達(dá)到發(fā)酵需要的溫度后，關(guān)閉夾套手動(dòng)進(jìn)水閥，調(diào)整轉(zhuǎn)速至正常轉(zhuǎn)速，將控制系統(tǒng)切換至‘自動(dòng)；運(yùn)行狀態(tài)，調(diào)整進(jìn)風(fēng)量、罐壓，等待接種。 ? 在關(guān)閉進(jìn)氣閥處的蒸汽閥的同時(shí)打開 NB型過濾器的出氣閥，進(jìn)行換氣，保持罐壓 。 ? 調(diào)節(jié)罐面排氣閥，保持罐壓 ，維持溫度 121℃ 123℃ 之間，計(jì)時(shí)實(shí)消 20min。 ? 微開夾套排污閥，打開夾套蒸汽閥，保持夾套壓力為 ，待培養(yǎng)基預(yù)熱達(dá)到 95℃ 以上時(shí)停攪拌，關(guān)閉夾套蒸汽閥，開大夾套排污閥。 ? 4 、培養(yǎng)基實(shí)消 ? 投料結(jié)束后，啟動(dòng)電機(jī)。 加水定容至 60%65%左右后，啟動(dòng)電機(jī)攪拌5min ? 按工藝要求調(diào)整好 PH后，擰緊進(jìn)料口螺蓋。 3 、加培養(yǎng)基 投料前，應(yīng)校正并安裝 PH電極和 OD電極。 ，保持罐壓 ,維持溫度在120℃ ~125℃ 之間，計(jì)時(shí)空消 30min ，關(guān)閉進(jìn)氣閥及底閥處的蒸汽閥，打開底閥開始排污。 ，同時(shí)打開夾套蒸汽閥進(jìn)汽，在同時(shí)向罐內(nèi)排光冷凝水之后，關(guān)閉夾套蒸汽閥，直至空消結(jié)束。 ? 操作注意：空氣流量計(jì)內(nèi)不能通入蒸汽， NB過濾器消毒前必須將空氣流量計(jì)出口閥關(guān)閉，以免造成設(shè)備損壞。 二、配制 配多少培養(yǎng)基 10L罐裝料量 60%： 10X60%=6L 接種量 10%：培養(yǎng)基 5400ml(實(shí)際操作培養(yǎng)基5000ml)，種子液 600ml 配方用多少 6L:60g酵母浸粉 1%,120gc120g葡萄糖 2%； 150ml: 1%,3g酵母浸粉 1%,3g葡萄糖 2%.其中 100ml加 1g瓊脂配成固體培養(yǎng)基用于倒平板； 50g原液用于測 OD時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)液。 四 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 分離單菌落 （ 1）實(shí)驗(yàn)物品滅菌 儀器：包扎 9個(gè)移液管、 9個(gè)涂布器、 9個(gè)裝有 9ml蒸餾水的試管、 16個(gè)平板、 液體： 3g酵母浸粉 1%、 6g蛋白胨 2%、 6g葡萄糖2%，配成 300ml溶液，取 240ml溶液平均分裝兩個(gè)三角瓶中，然后每個(gè)三角瓶放入 ，剩下 60ml為液體培養(yǎng)基，然后將以上設(shè)備拿去滅菌 ? （ 2）劃線涂布 ? 超
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