《蛋白質(zhì)化學(xué)最終版》ppt課件-文庫(kù)吧
2025-04-27 13:55 本頁(yè)面
【正文】 C O O RCH C O O HRNH 3 +C O O－ C H H 3 N + CH3 K1 C O O H C H H 3 N + CH3 C O O－ H 2 N CH3 K2 Ala+ Ala 177。 Ala－ H C C O O H C H H 3 N + CH2 C O O H C O O－ C H H 3 N + CH2 C O O H C O O－ C H H 2 N CH2 C O O － Asp+ Asp177。 Asp－ Asp= K1 K2 K3 C C CH2 C O O N + 3 H O O－ H 舉例： － ② .紫外吸收 苯丙氨酸： ?max＝ 259nm 酪氨酸： ?max＝ 278nm 色氨酸： ?max＝ 279nm 含有這三種氨基酸的蛋白質(zhì)在 280nm波長(zhǎng)下有最大光吸收，可以測(cè)定蛋白質(zhì)的含量。 ③ .茚三酮的反應(yīng) A. 靈敏度 B. 氨基酸與茚三酮生成的藍(lán)紫色物質(zhì)，在 570nm測(cè)定吸光值 、羥脯氨酸與茚三酮生成黃色物質(zhì)，在 440nm處測(cè)吸光值 （三）氨基酸的分離與分析 ? 1. 自動(dòng)氨基酸分析儀 PH 2上樣于鈉型陽(yáng)離子交換柱 PH PH ，與標(biāo)準(zhǔn)氨基酸圖譜比較分析 P66 ? 2. 高效液相色譜 ? 3. 離子交換層析 ? 4. 生物質(zhì)譜 蛋 白 質(zhì) 的 分 子 結(jié) 構(gòu) 第 三 節(jié) 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)包括 一級(jí)結(jié)構(gòu) 二級(jí)結(jié)構(gòu) 三級(jí)結(jié)構(gòu) 四級(jí)結(jié)構(gòu) 空間結(jié)構(gòu) 定義 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)指多肽鏈中氨基酸的排列順序。 一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu) 化學(xué)鍵 肽鍵 ，有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。 ? 肽鍵 是由一個(gè)氨基酸的 ?羧基與另一個(gè)氨基酸的 ?氨基脫水縮合而形成的化學(xué)鍵 。 ? 二硫鍵 ：兩個(gè)半胱氨酸的 SH通過(guò)縮去一份子 H2形成 的 SS鍵 。 （一）肽鍵和肽鏈 NH2 CH CHOOH甘 氨 酸甘 氨 酸NH CH CH OHOH甘 氨 酸+ HOH 甘氨酰甘氨酸 肽鍵 NH 2 CH C N CH COOHHHHO* 肽 是由氨基酸通過(guò)肽鍵縮合而形成的化合物。 * 肽鏈中的氨基酸分子因?yàn)槊撍s合而基團(tuán)不全，被稱為 氨基酸殘基 。 * 由十個(gè)以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為 寡肽，由更多的氨基酸相連形成的肽稱 多肽 。 N 末端：多肽鏈中有 自由氨基 的一端 C 末端：多肽鏈中有 自由羧基 的一端 體內(nèi)多肽和蛋白質(zhì)生物合成時(shí)，是從氨基端開始，延長(zhǎng)到羧基端終止。 多肽鏈有兩端 H2N CH2COOH C N H C C CH3 O O OH N CH2 CH H 丙氨酸 絲氨酸 甘氨酸 N末端 C末端 牛核糖核酸酶 GSH過(guò)氧化物酶 H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH還原酶 NADPH+H+ NADP+ 生物活性肽 谷胱甘肽 (GSH) 一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。 （三）蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定的原理 C末端氨基酸分析 N末端氨基酸分析 N末端氨基酸分析 （ DNFB）法： P70 （ DNSCl） 靈敏度： 1?109mol。 N ( C H 3 ) 2S O 2 C lH 2 N C H CR OH N C H CR OS O 2N ( C H 3 ) 2+水解N ( C H 3 ) 2S O 2 H N C H CR OO H+ 氨基酸丹磺酰氯多肽 N 端丹磺酰 N 端氨基酸丹磺酰氨基酸（苯異硫氰酸， PITC法） ： P71，蛋白質(zhì)自動(dòng)分析儀 ：肽鏈外切酶，從多肽鏈的 N端逐個(gè)水解氨基酸。 : H 2 N C H CR OH N C H CR O OR nCC HH N O Hn 1N 端氨基酸 C 端氨基酸OR nCC HH 2 N O HH 2 N C H CR ON H N H 2 +H+N H 2 N H 2氨基酸酰肼 C
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