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分子生物學要點-文庫吧

2025-03-23 03:17 本頁面


【正文】 并與富含嘌呤鏈上的堿基形成氫鍵。4SSCP:單鏈構象多態(tài)性檢測是一種基于DNA構象差別來檢測點突變的方法。相同長度的單鏈DNA,如果堿基序列不同,形成的構象就不同,這樣就形成了單鏈構象多態(tài)性。4管家基因:在生物體生命的全過程都是必須的,且在一個生物個體的幾乎所有細胞中持續(xù)表達的基因。4 細胞全能性:指同一種生物的所有細胞都含有相同的DNA,即基因的數(shù)目和種類是一樣的,但在不同階段,同一個體的不同組織和器官中基因表達的種類和數(shù)目是不同的。4 SD序列:轉錄出的mRNA要進入核糖體上進行翻譯,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列與大腸桿菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互補,是核糖體的識別位點。4反義核酸技術:是通過合成一種短鏈且與DNA或RNA互補的,以DNA或RNA為目標抑制翻譯的反義分子,干擾目的基因的轉錄、剪接、轉運、翻譯等過程的技術。4核酸探針:探針是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用,并在相互作用之后可以檢測出來的生物大分子。核酸探針是指能識別特異堿基順序的帶有標記的一段DNA或RNA分子。4周期蛋白:是一類呈細胞周期特異性或時相性表達、累積與分解的蛋白質(zhì),它與周期素依賴性激酶共同影響細胞周期的運行。4CAP:是大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白,這種蛋白可將葡萄糖饑餓信號傳遞個許多操縱子,使細菌在缺乏葡萄糖時可以利用其他碳源。50、順反子5結構域二、 問答題(一)、病毒、原核、真核基因組的特點?答:病毒基因組的特點:① 種類單一;②單倍體基因組:每個基因組在病毒中只出現(xiàn)一次;③形式多樣;④大小不一;⑤基因重疊;⑥動物/細菌病毒與真核/原核基因相似:內(nèi)含子;⑦具有不規(guī)則的結構基因;⑧基因編碼區(qū)無間隔:通過宿主及病毒本身酶切;⑨無帽狀結構;⑩結構基因沒有翻譯起始序列。原核基因組的特點:①為一條環(huán)狀雙鏈DNA;②只有一個復制起點;③具有操縱子結構;④絕大部分為單拷貝;⑤可表達基因約50%,大于真核生物小于病毒;⑥基因一般是連續(xù)的,無內(nèi)含子;⑦重復序列很少。真核基因組的特點:① 真核生物基因組遠大于原核生物基因組,結構復雜,基因數(shù)龐大,具有多個復制起點;②基因組DNA與蛋白質(zhì)結合成染色體,儲存于細胞核內(nèi);③真核基因為單順 反子,而細菌和病毒的結構基因多為多順反子;④基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū);⑤真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因,由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成;⑥存在大量的重 復序列;⑦功能相關的基因構成各種基因家族;⑧存在可移動的遺傳因素;⑨體細胞為雙倍體,而精子和卵子為單倍體。(二)、乳糖操縱子的作用機制?答:乳糖操縱子的組成:大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉移酶,此外還有一個操縱序列O,一個啟動子P和一個調(diào)節(jié)基因I。 阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié):沒有乳糖存在時,I基因編碼的阻遏蛋白結合于操縱序列O處,乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài),不能合成分解乳糖的三種酶;有乳糖存在時,乳糖 作為誘導物誘導阻遏蛋白變構,不能結合于操縱序列,乳糖操縱子被誘導開放合成分解乳糖的三種酶。所以,乳糖操縱子的這種調(diào)控機制為可誘導的負調(diào)控。 CAP的正性調(diào)節(jié):在啟動子上游有CAP結合位點,當大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時,cAMP濃度升高,與CAP結合,使 CAP發(fā)生變構,CAP結合于乳糖操縱子啟動序列附近的CAP結合位點,激活RNA聚合酶活性,促進結構基因轉錄,調(diào)節(jié)蛋白結合于操縱子后促進結構基因的 轉錄,對乳糖操縱子實行正調(diào)控,加速合成分解乳糖的三種酶。協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機制,互相協(xié)調(diào)、互相制約。(三)、真核生物轉錄水平的調(diào)控機制?答:真核生物在轉錄水平的調(diào)控主要是通過反式作用因子、順式作用元件和RNA聚合酶的相互作用來完成的,主要是反式作用因子結合順式作用元件后影響轉錄起始復合物的形成過程。 轉錄起始復合物的形成:真核生物RNA聚合酶識別的是由通用轉錄因子與DNA形成的蛋白質(zhì)DNA復合物,只有當一個或多個轉錄因子結合到DNA上,形成有功能的啟動子,才能被RNA聚合酶所識別并結合。轉 錄起始復合物的形成過程為:TFⅡD結合TATA盒;RNA聚合酶識別并結合TFⅡDDNA復合物形成一個閉合的復合物;其他轉錄因子與RNA聚合酶結 合形成一個開放復合物。在這個過程中,反式作用因子的作用是:促進或抑制TFⅡD與TATA盒結合;促進或抑制RNA聚合酶與TFⅡDDNA復合物的結 合;促進或抑制轉錄起始復合物的形成。反式作用因子:一般具有三個功能域(DNA識別結合域、轉錄活性域和結合其他蛋白結合域);能識別并結合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用元件;對基因的表達有正性或負性調(diào)控作用。轉錄起始的調(diào)控:⑴反式作用因子的活性調(diào)節(jié):①表達式調(diào)節(jié)——反式作用因子合成出來就具有活性;②共價修飾——磷酸化和去磷酸化,糖基化;③配體結合——許多激素受體是反式作用因子;④蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用——蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)復合物的解離與形成。⑵反式作用因子與順式作用元件的結合:反式作用因子被激活后,即可識別并結合上游啟動子元件和增強子中的保守性序列,對基因轉錄起調(diào)節(jié)作用。⑶反式作用因子的作用方式——成環(huán)、扭曲、滑動、Oozing。⑷反式作用因子的組合式調(diào)控作用:每一種反式作用因子結合順式作用元件后雖然可以發(fā)揮促進或抑制作用,但反式作用因子對基因調(diào)控不是由單一因子完成的而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。(四)、真核生物轉錄后水平的調(diào)控機制?答:(1)、5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的調(diào)控意義:5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA穩(wěn)定的一個重要因素,它至少保證mRNA在轉錄過程中不被降解。 (2)、mRNA選擇性剪接對基因表達調(diào)控的作用 (3)、mRNA運輸?shù)目刂疲ㄎ澹?、受體的特點?答:高度專一性;高度親和性;可逆性;可飽和性;特定的作用模式(六)、表皮生長因子介導的信號傳導途徑?答:表皮生長因子受體是一個典型的蛋白酪氨酸激酶受體,這個信號轉導途徑的主要步驟是:受體二聚化的形成及其磷酸化:表皮生長因子與受體的結合使受體發(fā)生二聚化,從而改變受體構象,使蛋白酪氨酸激酶活性增強,受體自身的幾個蛋白酪氨酸殘基在激酶的作用下發(fā)生磷酸化。 募集接頭蛋白Grb2:表皮生長因
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