【正文】 ；⑤乙肝的保護性抗體指抗HBs；⑥HBeAg陽性表示乙肝的傳染性極強；⑦抗HBs、抗HBs、抗HB。一、酶和酶作用底物（一）酶的要求：一個酶蛋白分子每分鐘可催化103～104個底物分子轉變成有色產物。，標記后酶活性保持穩(wěn)定，且不影響標記抗原與抗體的免疫反應性。用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后，酶活性可出現抑制或激活。、輔助因子及其底物對人體無害，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物應價廉易得。由無色的糖蛋白（主酶）和亞鐵血紅蛋白（輔基）結合而成的復合物。RZ值僅說明血紅素基團在HRP中的含量，并非表示HRP制劑的真正純度，而且RZ值高的HRP并不意味著酶活性也高，RZ值與酶活性無關。酶變性后，RZ值不變但活性降低，因此使用酶制劑時，酶活性單位比RZ值更為重要。（βGal）：βGal來源于大腸桿菌。（三）常用的底物（1）鄰苯二胺（OPD）：是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD應用液穩(wěn)定性差，易變色，需新配制后在1小時內使用，顯色反應過程需避光，而且具有致癌性。TMB穩(wěn)定性好，成色無需避光，無致突變作用，是目前ELISA中應用最廣泛的底物。（3）其他：5氨基水楊酸（5ASA）和2，2聯氮二（3乙基苯并噻唑6磺酸）二銨鹽（ABTS）。（βGal）的底物常用4甲基傘酮基RD半乳糖苷（4MUU），酶作用后，生成高強度熒光物4甲基傘形酮（4MU），其敏度性較HRP高30～50倍，但測量時需用熒光計。：同源雙功能交聯劑。①優(yōu)點：操作簡便、有效，重復性好。（2）二步法：連接HRP。優(yōu)點：酶標志物質量較均一，標記效率也較一步法高。（二）酶標記物的純化及鑒定常用的純化方法有葡聚糖凝膠G200/G150過柱層析純化和50%飽和硫酸銨沉淀提純等。（抗原）具有免疫活性。三、固相載體除均相酶免疫測定外，各種非均相酶免疫測定反應最后都需要分離游離和結合的酶標記物。（一）固相載體的要求　結合抗體或抗原的容量大；可將抗體或抗原牢固地固定在其表面，經長期保存和多次洗滌也不易脫落；不影響所固定的抗體或抗原的免疫反應性，而且為使反應充分進行，最好其活性基團朝向反應溶液，固相方法簡便易行，快速經濟?？乖蚩贵w以非共價或物理吸附方式結合到此載體上。目前采用非共價和化學偶聯共價吸附方法進行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點：易與抗體（抗原）形成化學偶聯，且結合容量大?？芍瞥纱呕㈩w粒。：常有硝酸纖維素膜（Nc）、玻璃纖維素膜及尼龍膜等通過非共價鍵吸附抗體（抗原），廣泛用于定性或半定量斑點ELISA的固相載體。普遍使用的聚苯乙烯載體，將抗原或抗體溶于緩沖液（）中，加于ELISA板孔中4℃過夜。：包被的蛋白質濃度過低，固相載體表面不能被此蛋白質完全覆蓋，其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，最后產生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過程稱為封閉。酶免疫測定技術（EIA）：用于液體標本中抗原或抗體的定性和定量。一、均相酶免疫測定利用酶標志物與相應的抗原或抗體結合后，標記酶的活性會發(fā)生改變的原理，可以在不將結合和游離酶標志物分離的情況下，通過測定標記酶的活性的改變，而確定抗原或抗體的含量。（一）酶放大免疫測定技術（EMIT）EMIT的基本原理是半抗原與酶結合成酶標半抗原。反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結果就可推算出標本中半抗原的量?？寺∶腹w免疫測定（CDEIA）的反應模式為競爭法。ED標記的抗原與抗體結合后由于空間位阻，不再能與酶受體（EA）結合，而游離的ED標記的抗原上的ED可和EA結合，形成具有活性的酶，加入底物測定酶活性，酶活力的大小與標本中抗原含量成正比。（一）異相液相酶免疫測定　主要用于檢測樣品中極微量的短肽激素和某些藥物等小分子半抗原。：將待測樣品抗原、酶標抗原及特異性抗體進行一次性溫育，待反應達平衡后，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。（二）固相酶免疫測定　酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。故：①固相的抗原或抗體；②酶標記的抗原或抗體；③酶反應的底物三種試劑為反應必備。原理是先將特異性抗體與固相載體連接；加入待測標本，形成固相抗原抗體復合物；再加入酶標抗體形成雙抗體夾心，洗滌；加底物顯色，根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量檢測。雙抗體夾心法只適用于二價或以上的較大分子抗原的測定，不能用于小分子半抗原的檢測。測定時將待測抗原和酶標抗體同時加入，溫育、洗滌，加入底物顯色。必要時可將標本經過適當稀釋后重復測定。原理為先用抗小分子的特異性抗體包被固相，然后同時加入待測樣本和酶標記的小分子，兩種小分子競爭與固相上的抗小分子的特異性抗體結合，溫育一定時間后洗滌，加入酶底物顯色。（二）檢測抗體的方法：最常用的方法，屬非競爭性結合試驗。多用于檢測IgG類型抗體。其原理及操作步驟類似雙抗體夾心法，也可采用一步法。臨床上乙型肝炎表面抗體的測定常用此法。競爭抗體與待測抗體的特異性及親和力越接近，則測定的可靠性越強。原理：先將針對IgM的二抗包被于固相載體，加入待測標本，其中IgM類抗體可被固相抗體捕獲，再加入特異性抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體結合后，加入酶標記特異性抗原的抗體，形成固相二抗IgM抗原酶標記抗體復合物，加底物顯色后，即可對待測標本中IgM是否存在及含量進行測定。均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質的檢測。實戰(zhàn)演練目前酶免疫技術中應用較廣、提純較簡便的酶是『正確答案』D『答案解析』HRP是目前在酶聯免疫吸附試驗中應用最為廣泛的標記用酶。以下關于酶標記抗體或抗原不正確的是，因為游離的酶或未標記上的抗原或抗體成分在測定過程中被洗掉『正確答案』C『答案解析』每批制備的酶標志物都要進行質量和標記率的鑒定，質量鑒定包括酶活性和抗體（抗原）的免疫活性鑒定。沉淀線經生理鹽水反復漂洗后，滴加酶的底物溶液，若在沉淀線上能顯色，則表示酶標記物中的酶活性仍保留。關于酶聯免疫吸附試驗（ELISA）錯誤的是『正確答案』A『答案解析』酶聯免疫吸附試驗（ELISA）屬于固相酶免疫測定。酶免疫技術中懸浮在溶液中具有液相反應速率的固相載體是『正確答案』D『答案解析』酶免疫技術中懸浮在溶液中具有液相反應速率的固相載體是磁性微粒。ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是『正確答案』B『答案解析』ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是間接法。該法是針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠的決定簇的兩種單克隆抗體，即包被使用一種單抗，酶標記使用另一種單抗。但當待測抗原濃度過高時，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標抗體結合而抑制夾心復合物的形成，出現鉤狀效應（hookeffect），顯色降低，嚴重時可出現假陰性結果。這是應用此法必須要注意的問題。雙位點一步法鉤狀效應產生是因為『正確答案』E『答案解析』雙位點一步法鉤狀效應產生是因為標本中的抗原濃度過高。關于ELISA競爭法的敘述中，正確的是『正確答案』C『答案解析』關于ELISA競爭法的敘述中，正確的是被測物含量多則標記物被結合的機會少。臨床上檢測IgM抗體常用的ELISA方法是『正確答案』E『答案解析』捕獲法，又稱反向間接法。酶免疫技術分為兩類酶免疫測定，它們是『正確答案』C『答案解析』酶免疫技術分為兩類酶免疫測定，它們是酶免疫組化和酶免疫測定。半抗原一般用均相酶免疫測定法。A．解剖式印模 B．功能性印模 C．無壓力印模 D．二次印模 E．一次印模1下列對鉤蟲卵形態(tài)描述錯誤的是 A．五色透明 B．橢圓形C．內含4個卵細胞 D．卵殼較厚E．卵內細胞可分裂為多個細胞1病毒持續(xù)感染屬于 A．免疫防御 B．免疫自穩(wěn)C．免疫監(jiān)視功能失調 D．免疫自穩(wěn)功能失調 E．免疫防御作用過高1血氨升高見于 A．劇烈肌肉運動 B．進食高蛋白質 C．肝昏迷 D．膽囊炎 E．嚴重燒傷1用膠體金結合物做免疫滲濾試驗，陽性時斑點出現 A．無色 B．黃色 C．藍色 D．紅色 E．發(fā)出熒光1ABO血型遺傳中，父母雙方各遺傳給子代一個基因，可以組成基因型的數目為（）。）病毒與立克次體主要相同點是 A．繁殖方式 B．對抗生素敏感C．可在人工培養(yǎng)基生長 D．細胞內寄生 E．核酸類型可作為SLE特異性標志的自身抗體是 A．抗Sm抗體和抗dsDNA B．抗dsDNA抗體和ANA C．抗ssDNA抗體和ANA D．抗DNP抗體和ANA E．抗SSA抗體和抗核組蛋白抗體如血象顯示全血細胞減少，骨髓象顯示增生低下，三系造血均減低，則符合 A．骨髓纖維化 B．脾功能亢進C．再生障礙性貧血 D．嚴重的缺鐵性貧血 E．骨髓增生異常綜合征臨床用于IgG含量測定的常規(guī)方法是 A．免疫比濁法 B．雙向瓊脂擴散 C．補體結合試驗 D．ELISA E．RIA引起獲得性免疫缺陷綜合征的病毒是 A．EBV B．HBV C．HCV D．HIV E．HEV配制100m1 25%金銀花注射液(已知其 50%℃)，需加入多少克氯化鈉才能配成等滲溶液 A． B． C． D． E．審核處方的內容不包括A．處方中藥品名稱、規(guī)格、書寫 B．處方中藥品的價格 C．用藥劑量、用法 D．給藥途徑E．藥物配伍禁忌和相互作用電阻型血液分析儀白細胞正常直方圖曲線呈現 A．1個峰 B．3個峰 C．5個峰 D．7個峰 E．9個峰具有過敏毒素作用的補體成分有__ A．C2a B．C3a C．C4a D．C5a E．C4b最能提示腎實質病變的是尿中出現 A．透明管型 B．顆粒管型C．上皮細胞管型 D．紅細胞管型 E．白細胞管型1傷寒、副傷寒病人在哪一期間采取血液標本進行病原分離率最高 A．發(fā)病一周內 B．發(fā)病一周后C．發(fā)病第二至三周時 D．發(fā)病第四周及以后 E．潛伏期內1至目前霍亂弧菌已鑒定到200多個血清群，其中引起大范圍流行的血清群包括__ A．O1群 B．O139群 C．O22群D．O1群和O22群 E．O1群的O139群1類風濕性關節(jié)炎患者體內主要存在 A．變性RNA B．變性DNA C．變性ENA D．變性IgG E．變性IgM1下列選項中，關于熒光素與蛋白質結合比率(F/P)的說法正確的是 A．F/P值越高，說明抗體分子上結合的熒光素越少 B．F/P值越高，說明細胞上結合的熒光素越多 C．固定標本的熒光抗體以F/P＝ D．活細胞染色的熒光抗體以F/P＝ E．(RB200)F/P＝A515/A2801下列除哪項外，均是黑膏藥的“火毒” A．酮類 B．醛類 C．低級脂肪酸 D．丙三醇 E．丙烯醛1器官移植中免疫抑制的方法有__ A．使用環(huán)孢素A B．使用轉移因子 C．血液凈化 D．使用FK506 E．使用環(huán)磷酰胺1腦脊液球蛋白定性試驗特異性最強的試驗是 A．Pandy試驗 B．RossJone試驗 C．NonneApelt試驗 D．Rivalta試驗 E．HiCN試驗1凈選加工時采取挖去毛的藥物是 A．枇杷葉 B．石韋 C．金櫻子 D．骨碎補 E．鹿茸1水蛭炮制時，采用的輔料是 A．麩炒 B．米炒 C．土炒 D．砂炒 E．滑石粉炒通常血小板聚集試驗的測定原理為 A．化學發(fā)光法 B．ELISA法 C．光學(濁度)法D．膠體金免疫滲透法 E．染色法2苦杏仁的炮制條件是（）A．5倍量沸水，加熱10分鐘 B．10倍量沸水，加熱5分鐘 C．10倍量沸水，加熱10分鐘 D．10倍量沸水，加熱15分鐘 E．15倍量沸水，加熱5分鐘2如血液稀釋倍數為200倍，用目視計數法計數中央5個中方格內紅細胞數為N，則正確的計算公式為(/L)A．N2510106200 B．N5/2510106200 C．N25/510106200 D．N510103200 E．N25101032002下列激素中哪種不是含氮激素__ A．催乳素 B．抗利尿激素 C．生長激素 D．雌激素E．促甲狀腺激素釋放激素2系統(tǒng)誤差可分為恒定系統(tǒng)誤差和 A．隨機誤差 B．恒定誤差 C．比例誤差 D．總體誤差 E．平均誤差2內源凝血途徑的始動因子是 A．FⅠ B．FⅢ C．FⅩ D．FⅫ E．FX2鹽析法分離蛋白質的原理是 A．使蛋白質發(fā)生變性沉淀 B．破壞蛋白質的一級結構C．破壞膠體穩(wěn)定因素改變溶解度 D．破壞蛋白質的二級結構 E．破壞蛋白質的高級結構2API試劑條中，需要用液狀石蠟封口的試驗是 A．URE B．CIT C．TDA D．ONPG E．GLU